53-实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

1、53-实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定教学目标知识耳标识记：记住鉴定所用材料，懂得选材的要求。理解：理解实验的目的、原理和方法步骤，进一步归纳出生物组 织中可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。能力目标1 学会制备生物组织试样，并能按规范化要求操作，独立完成鉴 定工作。2能正确选取鉴定试剂，并能进行规范化操作。3. 明确观察对象，正确说出鉴定过程屮试样的颜色变化，并能用 准确的语言解释实验现象，作出结论；填写实验报告册。4能熟练使用低倍镜、制作徒手切片、临时装片，了解规范使用 高倍镜的方法。情感0标培养科学思维能力和科学研究方法。

2、重点落实方案重点掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。落实方案教师可事先配制好已知待测样品，如葡萄液、植物油滴、鸡蛋蛋 白稀释液。让学生按要求加入相应试剂，观察颜色变化，从而讣学生 自己归纳出本实验的简单原理。难点突破策略难点实验内容较多，实验时间长，必须周密安排，才能按时完成。突破策略学生要分工合作。实验要求1、按学号坐定，不再换位，不准走动，小声交流，教师讲课时不准操作、不准交谈。2、仪器摆放整齐，试验前先检查仪器，破损自负，试验结束刷洗干 净，恢复原样，以备后用。椅子放回。3、按组轮流做卫生，课代表负责，转天交报告，打铃下课。4、取量小，节约，而且现象明显。实验原理1.

3、 可溶性还原糖鉴定原理生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽 糖和蔗糖。前二种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛轻基， 因此叫做还原糖；蔗糖分了内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林 试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原 糖。斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色cu (oh) 2沉淀的悬浊液，葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件 下还原为砖红色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为：cii20ii- (ciioii) 4-ciio+2cu (011) 2cii20ii- (cii0ii)4-c00h+cu20+2h20用斐林试剂

4、鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色棕色砖红色沉淀2. 脂肪鉴定原理苏丹iii、苏丹iv为一种橙黄色脂肪染色剂，苏丹iii染液遇脂肪的 颜色反应为橘黄色，苏丹iv染液遇脂肪的颜色反应为红色。3. 蛋白质鉴定原理将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩腺。双缩腺在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质 分子中含有的肽链与双缩腺结构相似，因此，蛋口质可与双缩服试剂 发生颜色反应。材料用具实验材料：葡萄糖液、苹果组织液，植物油滴、浸泡过的花牛种 了或新鲜的花生种了，鸡蛋蛋口稀释液、黄豆组织液。仪器：徒手切片刀，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管, 酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，载

5、玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸， 显微镜。试剂：斐林试剂，苏丹iii染液或苏丹iv染液，双缩服试剂，体积 分数为50%的酒精溶液，蒸憾水。实验指导生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋口质的鉴定实验，实际上 是三个独立的实验。在实验中，如注意以下问题，效果则更好。1. 在做可溶性还原糖的鉴定实验中，一是选材最好是口色或近于 白色的植物组织，这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩 盖。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、 白萝卜。二是斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后方可使用，切勿将甲 液和乙液分别加入组织样液中。2在做脂肪的鉴定实验中，切取花生了叶薄片，要求实验技能较 高，不妨改成

6、刮取花生子叶泥制作临时装片，易做，效果乂好。3在做糖和蛋口质的实验时，鉴定z前需要留出一部分样液，以 便与鉴定后的样液的颜色做比较，这样可增强说服力。课时安排1课吋教学过程一、操作要点及注意事项1往试管加入试剂时，要使试管稍倾斜，用滴管沿管壁缓慢加入 试剂。2. 注意斐林试剂必须混合试剂a和b后方可使用，而双缩豚试剂 使用吋是先加入试剂a,摇匀后观察颜色变化，再加入试剂e,再观 察颜色变化。3鉴定可溶性糖，加热试管时，应该用试管夹夹住试管上部，放 入盛开水的大烧杯加热；注意试管底部不接触烧杯底部，同时试管口 不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾吋冲出试管，造成烫伤。如果 试管内溶液过于沸腾，可以

7、提起试管夹，使试管与沸水接触面减少， 以免溶液溢出。二、方法步骤教师把事先配制好已知待测样品，葡萄糖液、植物油滴、鸡蛋蛋 口稀释液让学&按要求加入相应试剂，观察颜色变化。砖红色fy 橘黄色fy紫色。然后分别鉴定生物组织中的三种物质。（-）可溶性还原糖的鉴定1. 制备苹果组织样液教师用家用豆浆机事先制成苹果组织样液。2. 实验操作和观察%1 向试管注入苹果组织样液。%1 向试管内注入刚配制的斐林试剂、振荡试管，此吋溶液呈现蓝 色。提问学生为什么？答：生成cu （oh ） 2沉淀。%1 将这支试管放入盛有开水的大烧杯中，加热煮沸2分钟。观察 试管中溶液的颜色变化。（二m旨肪的鉴定1. 制备

8、花生种子子叶切片或花生子叶泥临时装片。2. 实验操作和观察%1 用苏丹iii染液，染色23分钟。%1 用吸水纸吸去花半了叶薄片周围的染液，并用酒精洗去浮色。%1 用吸水纸吸去了叶薄片周围的酒精，制成临吋装片。%1 先在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处，移至视野中央，再 用高倍镜进行观察，可看到已着色的圆形小颗粒（注意指导学生使用 高倍显微镜的方法）提问学生小颗粒的颜色是什么？（三）蛋口质的鉴定1. 制备黄豆组织样液教师用豆浆机，事先制成黄豆组织样液。2. 实验操作和观察%1 向试管内注入黄豆组织样液2mlo%1 向试管中加入2ml双缩月尿试剂a（质量浓度为0. lg ml1 的氢氧化钠溶液），

9、摇荡均匀。注意观察试管内溶液的颜色有什么变 化。再向试管屮加入34滴双缩躱试剂b （质量浓度为o.olg ml 1的硫酸铜溶液），摇荡均匀。注意观察溶液的颜色有什么变化。三、结论与讨论1结论：斐林试剂分别和葡萄糖、苹果果肉组织液作用后产生同 样颜色反应；苏丹iii染液能将植物油滴和花纶种了的圆形颗粒染成同 样的颜色；双缩服试剂和鸡蛋蛋口稀释液和黄豆组织液分别产生同样 颜色反应；证明苹果果肉中、花生种了中、黄豆组织中各存在什么样 物质？答：葡萄糖、脂肪、蛋口质。2.讨论：为什么根据某些化学反应能够使生物组织中的有关有机 物产生固定的颜色反应可以鉴定生物组织有糖、脂肪、蛋白质的存在?因为某些化学试

10、剂与生物组织屮的化合物发生一定的化学反应 后，可产&新的化合物，而这种化合物是有固定的颜色。因此，根据 待检测物与某些化学试剂反应的固有颜色，如砖红色、橘黄色、紫色 等。可以鉴定生物组织中存在有糖、脂肪、蛋口质。四、实验效果检查与评定银幕显示检测题做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋口质的鉴定实验吋，需要 根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问 题：各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子 小麦种子%1 其中适合于鉴定糖的是，理由是，你打算用什么试剂鉴定o%1 小麦种子不如花生种子更适合用來鉴定脂肪，这是因为 ,你怎样进行鉴定？%1 适合于鉴定蛋白质的是,理由是,

11、鉴定所用的试齐g是o答案：梨 梨的组织细胞颜色为口色，并且糖含量较高 斐林 试剂或班氏试剂。小麦种子的脂肪含量不如花生种子高，也不容易 做切片用苏iv试剂鉴定。黄豆和花生蛋口质含量高双缩豚试 剂。五、布置作业1. 将可溶性糖、脂肪、蛋白质鉴定原理及结论填写在实验报告 册上。2. 斐林试剂主要用來鉴定可溶性还原糖，其主要成分为naoh和cus04的混合液，用你已有的化学知识判断，这两种物质混合以后能 发生什么反应?,并且请解释为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久：o通过查有关资料或请教化学老师：斐林试剂中的什么成分在加热条件下与还原糖发生了什么化学反应?砖红色的 沉淀物是什么?。答案：生成了蓝色的cu (oil) 2沉淀的悬浊液 吋间一长，cu (oh) 2沉淀在溶液底部无法发生反应发生了氧化还原反应，生成了 砖红色的cu20沉淀和某种糖的有机酸3. 某同学在显微镜下观察被苏丹iii染色后的花生了叶切片，当转 动细准焦螺旋调整焦距时，有部分细胞看得很清楚，另一部分细胞 较模糊，这是由于()a.反光镜没有调好b.标木切得厚薄不均匀c.显微镜物镜损坏d.细准焦螺旋未调节好答案：b板书设计一、操作要点及注意事项1