微波辅助提取法提取金针菇多糖工艺探究

1、微波辅助提取法提取金针菇多糖工艺探究摘要：采用微波辅助提取法对金针菇多糖进行提取，通 过单因素试验及正交实验优化确定出金针菇多糖最佳提取 工艺如下:微波功率350w,水料比35 : 1,微波处理时间9min, 提取次数为2次，在此条件下，多糖提取率为1. 26%,远远 高于水提法。关键词：金针菇；多糖；微波辅助提取法；工艺 中图分类号：s646. 15文献标识码：a文章编号： 1674-0432 (2010) -12-0075-20引言近年来，天然植物多糖的生物活性是目前科学研究的热 点。天然植物多糖能提高机体的免疫功能，具有多种生物功 能1。多糖是金针菇中重要的生物活性物质，相关研究表 明，

2、金针菇多糖是一类主要以b- (1, 3)糖昔键连接的葡 聚糖，具有抑制肿瘤、抗癌、降血糖、降血脂和增强机体免 疫力等作用2。但目前金针菇多糖其提取率低及价格较高 而限制了应用，因此如何提髙金针菇多糖的提取率，减低成 本是其大规模应用的前提。微波辅助提取技术(mae)是近年来兴起的生物活性物 质提取技术。其原理是利用不同组分吸收微波能力的差异， 使萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物 质从体系中分离，进入到介电常数较小、吸收能力相对较差 的萃取剂中，达到较高的提取率。微波辅助提取法与传统的 回流提取法相比具有高效、清洁等特点，目前已广泛应用于 天然药物的分离提取3。本研究将微波辅助

3、提取技术引入 金针菇多糖的提取与分离中，以期探索出一条高效的、适应 工业化生产的金针菇多糖提取工艺路线，为其进一步开发利 用提供技术保证。1材料与方法1. 1材料与试剂金针菇子实体（市售，干燥至恒重，粉碎过40目筛）； 95%乙醇（ar）；浓硫酸（ar）；苯酚（ar）；三氯甲烷（ar）； 正丁醇（ar）；葡萄糖（ar）o1.2仪器hh-s恒温水浴锅（江苏金坛市正基仪器有限公司）；722 分光光度计（上海光谱器有限公司）；wd800型galanz微波 炉（格兰仕微波炉电器有限公司）；re-52aa旋转蒸发仪（上 海亚荣生化仪器厂）；kdc-1044低速离心机（科大创新股份 有限公司中佳分公司）。

4、1. 3试验方法1.3. 1多糖含量测定采用苯酚-硫酸法4,以葡萄糖 为标准样品。精确称取0. lg葡萄糖，用蒸馆水定容至100ml 容量瓶中，摇匀备用。吸取上述lmg/ml的葡萄糖溶液0. 00.1.00、2. 00. 3.00、4. 00. 5. 00. 6. 00 分别用蒸馆水稀释至 50ml容量瓶中，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液。从各个瓶 中准确移取2. 00ml,置于25ml具塞比色管中，加入5%苯酚 溶液1. 00ml,摇匀，迅速加入浓硫酸5.00ml,静置lomin 后，置于35°c水浴加热40min,冷却至室温，用分光光度计 在490nm处测定吸光度，制作标准曲线(图

5、1),得回归方程 为 y=0. 0415x+0. 0405, r2=0. 9979o图1葡萄糖标准曲线1.3.2微波辅助提取法提取金针菇多糖 精密称取金针 菇粉末5g,加入一定量的蒸馆水放于150ml三角瓶中，置于 微波炉中调整微波功率、微波处理时间、水料比进行提取。 过滤，取滤液，提取数次，合并滤液减压浓缩至1/10体积, 95%乙醇(1:2)沉淀多糖，过夜，离心去上清，流沉淀，用 蒸馆水定容到50ml容量瓶中，去蛋白，收集上清液，测吸 光度值，计算多糖得率。2结果与分析2. 1微波功率对金针菇多糖提取率的影响微波功率分别为150w、250w、350w、450w、550w,在水 料比40:1

6、、处理时间8min、提取3次的条件下提取，金针 菇多糖提取率分别为 0.24%、0.87%、1.18%、0.96%、0.67%。 多糖提取率随微波功率增大而逐渐上升，但到达350w开始 下降，可能是由于多糖水解程度加大而造成的。同时功率大 时，提取时提取液粘稠度增加，使过滤困难，故功率为350w 是比较适合的。2.2水料比对金针菇多糖提取率的影响水料比分别为10:1、20:1、30:1、40：1,在微波功率 350 w、处理时间8min.提取3次的条件下提取，金针菇多 糖提取率分别为0.87%、1.02%、1.16%、1. 18%o多糖提取率 随着加水量的上升而逐渐上升，但当加水量超过30:1

7、后， 提取率没有明显上升，考虑材料和能耗，因此确定水料比 30：1是比较适合的。2.3微波处理时间对金针菇多糖提取率的影响微波处理时间分别为6、8、10、12、14min,在微波功 率350w、水料比30:1、提取3次的条件下提取，金针菇多 糖提取率分别为 0. 69%. 1. 16%. 1. 23%. 1. 14%. 1. 07%o 随 着微波处理时间的延长，多糖提取率先上升，达到一定值后, 出现了下降，可能是由于处理过长时间导致了多糖的水解程 度加大。故在时间选定上不适宜太长，lomin是比较适合的。2.4提取次数对金针菇多糖提取率的影响提取次数分别为1、2、3、4次，在微波功率350w、

8、水 料比30:1、处理时间lomin的条件下提取，金针菇多糖提取 率分别为0.73%、1.21%、1.23%、1. 24%o多糖提取率随着提 取次数的上升而逐渐上升，但提取2次、3次和4次，提取 率相差不大，所以考虑到时间与能耗，故确定提取次数为2 次较为合适。2.5正交试验优化金针菇多糖提取工艺在提取次数为2次的情况下，通过单因素实验确定以a 微波功率，b水料比，c微波处理时间作为影响多糖提取率 的主要因素，设计l9 (33)正交试验，因素水平见表1,结 果见表2o由表2可以看出，微波提取金针菇多糖最佳工艺条件为 a2b3c1/a2b3c3,故采用这2种组合重新试验，确定出a2b3c1 组合

9、多糖提取率最高，为1.26%o即微波功率350w,水料比 35:1,微波处理时间9min,所以此组合为金针菇多糖超声波 提取最佳工艺条件。2.6微波辅助提取法提取金针菇多糖与水提法比较为考察微波辅助提取法提取金针菇多糖的优越性，我们 在进行研究的同时，采用水提法提取金针菇多糖，以多糖的 提取率为衡量指标，经单因素实验及正交试验确定出金针菇 多糖水提法的最佳工艺条件为水料比30:1、浸提温度90匸、 浸提时间4h、提取次数2次，提取率0. 99%0微波辅助提取 法金针菇多糖提取率远远高于水提法。3结论微波提取是一种现代提取技术，提取效率高，能有效降 低生产成本，提高经济效益。实验结果表明，微波法提取金 针菇多糖最佳提取工艺为：微波功率350w,水料比35:1, 微波处理时间9min,提取次数为2次，在此条件下，多糖提 取率为1.26%,远远髙于水提法。本研究对金针菇多糖的工 业化生产及功能性保健品的开发能够起到一定的指导作用。参考文献1 陈祥贵，王志民，郑炜，等金针菇多糖的酶法提取 及利用j.四川工业学院学报,1999, 18(4) ： 38-40.2 宋牌，吴茂玉，和法涛，等.微波法提取苹果渣中 多酚的工艺研究j.食品科技,2007, (10):227-229.3 张惟杰.复合多糖的生化研究技术m.北京:科学 出版社,1998.基金项目：吉林省科技发展计