探析肥胖对哮喘大鼠炎症介质的影响

1、探析肥胖对哮喘大鼠炎症介质的影响(丹阳市人民医院江苏丹阳212300)【摘要】目的：通过分析研究肥胖哮喘的动物模型的发病情况与介质变化, 探究哮喘发病中肥胖起的作用。方法：随机将30只雄性大鼠分成a组(即“肥 胖哮喘组”)、b组(即“哮喘组”)和c组(对照组)，每组10只。a组大鼠用高脂 饲料进行喂养，b、c组则用普通饲料进行喂养。a组大鼠和b组大鼠进行腹腔 注射，两周后进行雾化吸入ova,构建哮喘模型。用肺组织进行病理切片，并用 免疫组化的检测方法测定肺组织中的tnf-&alpha冰平，应用elisa双抗体夹心法 检测il8水平。结果：与b、c两组相比，a组大鼠的气道壁明显增厚、炎症

2、细 胞浸润度较高，肺组织肿瘤坏死因子-&alpha;水平(24%&plusmn;4% )明显比b组 (14%&plusmn;5% )和 c 组(8%&plusmn;3% )高&lt;0.05), il-8 水平33.15&plusmn;7.02)ng/l-l)比 b 组(23.82&plusmn;234ng/l-1)与 c 组 (16.78&plusmn;4.19)ng/l-l高(p&lt;0.05)<>结论：肥胖能够影响哮喘发作的严 重程度和部分哮喘因子含量。【关键词】肥胖；哮喘;tnf-&alpha

3、;水平；炎症【中图分类号】r965【文献标识码】a【文章编号】1007-8231 (2016) 12-0245-02近年来，哮喘的发牛与发展在很大程度上都与肥胖有关，肥胖这一危险的哮 喘发病因素逐渐得到重视。肥胖是因为食物的摄入量过多或者是机体代谢发牛改 变所造成的体内脂肪聚积，导致人体体重增长过度而引起的。目前，医学界认为 哮喘病的发病有很多炎性因子参与其中，同时也在一定程度上影响了肥胖的发病 lo通过对比不同体重的大鼠参加哮喘发病的il8水平、tnf-&alpha;水平与组 织病理学上的改变，研究在哮喘中肥胖的影响机制。现将结果报道如下。1.资料与方法1.1材料与试剂实验的试剂包括

4、大鼠il8酶联免疫试剂盒、卵清蛋白、大鼠tnf-&alpha;抗 体以及pbs缓冲液，器材包括酶联分析仪、不锈钢高压锅、高频雾化器和光学显 微镜，以及37°c恒温箱。1.2方法随机将30只雄性大鼠分为肥胖哮喘组、哮喘组与对照组，每组各10只。a 组用高脂饲料进行饲养，并建立肥胖模型，b组和c组则用普通饲料进行饲养, 每周测量一次身长和体重，并将测量的数据记录下来。12周后，a组大鼠的身长 为(26.7&plusmn;5.2) b组和c组为(276&plusmn;4.3)a组与b、c两组间的差异无 统计学意义;体重 a 组为(399&plusmn;36)

5、g, b、c 组为(301&plusmn;33)g, a 组 和b、c两组差异具有统计学意义(p<0.05), a组大鼠的平均体重高于b、c两 组20%,达到肥胖标准。哮喘模型的制作：a组和b组每只大鼠的腹腔注射腹腔注射10毫克卵清蛋 白、10毫克氢氧化铝、1毫升生理盐水所配置的悬浊液，c组的大鼠则每天注射 1毫升生理盐水，第10天重复一次；从第14天起，a组和b组用1%是卵清蛋 白雾化吸入发敏，每次20分钟，c组则用生理盐水进行雾化吸入，连续进行七 天。观察三组的临床症状。1.3病理学检测杀死大鼠并将其右肺的下叶组织取出，保存于福尔马林溶液中，脱水、包埋、 切片、烤片，并染色将

6、其做成病理切片，通过光镜观察气道壁的变化情况与炎症 的细胞浸润状况。1.4免疫组化测定取出大鼠右肺的下叶组织，免疫组化的方法检测这三组的大鼠肺组织中的 tnf-&alpha;情况。1.5检测血浆il-8的水平在大鼠的心脏处取3毫升血，并立刻放在efta抗凝采血管中，避免血液样 本被污染，离心5分钟留取血浆，并用elisa双抗体夹心法测定这3组大鼠的血 浆il8含量，严格规范操作方法。1.6统计学方法对搜集的数据用spss 13.0统计软件进行统计和分析，采用f检验法比较各 组指标变化情况，差异具有统计学意义(pv0.05)。2 结果2.1发病症状对比建立好动物哮喘模型后，与b组相比，a

7、组大鼠的哮喘发作吋，躁动、气促、 和大小便失禁等情况比较明显，c组大鼠则无明显症状。2.2病理学测定结果比较he染色结果表明，与b、c两组大鼠的检测结果相比，a组大鼠的肺组织的 气道壁明显增厚、炎症细胞的浸润程度较高。2.3免疫组化测定结果对比免疫组化的测定结果用肿瘤坏死因子-&alpha;水平在肺组织中占的总体比例 表示，a 组为 24%&plusmn;4%、b 组为 14%&plusmn;5%> c 组为 8%&plusmn;3%, a组明显高于b组和c组的检测结果(pv0.05)。2.4血浆il8的检测结果比较a 组的 il-8 水平33.15&am

8、p;plusmn;7.02)ng/l-l)明显高于 b 组(23.82&plusmn;2.34ng/l：l)、c 组(16.78&plusmn;4.19)ng/l：l (p<0.05)。3 .讨论支气管哮喘的主要病理过程为气道炎症、气道重构和气道的上皮损伤。而 tnf-&alpha;能够活化炎症细胞的诱导基因，调控促炎症细胞趋化因了 il8,形成 哮喘病症的发生与发展的发病环境。而且，在哮喘发病时，引发的炎症介质 会刺激气道的上皮，引发上皮损伤和修复异常，从而导致气道重构。此外，还会 产生tnf和各种前炎性因子、趋化因子，导致气道炎症加重。因此，在气道炎 症和气道

9、损伤中，tnf-&alpha;起到了调节、加重哮喘的作用。而哮喘中的肥胖因 素与tnf-&alpha;的关系也备受关注。实验亦表明了 a组犬鼠的tnf-&alpha;水平 比普通的哮喘组大鼠更高，由此可知肥胖会加重哮喘的发病症状和改变其病理过 程。在哮喘的发病过程中，il8有较强的趋化性细胞因子3。在实验中，a组人 鼠哮喘在发作时，症状较重、病理改变比较明显，其气道壁的重构与炎症细胞的 浸润程度更为明显，且血浆il8水平也比b组大鼠高。因此，肥胖之所以成为哮 喘的高危因素，与其较高的il8水平有关。总之，用一样的致敏方式使肥胖大鼠与正常大鼠哮喘。在致敏的过程中，a 组大

10、鼠的发病症状比b、c两组更为明显。观察大鼠的病理切片可以看出，a组 的气道重构与炎症细胞侵润最为明显，b组其次，c组则无明显炎症变化，这说 明肥胖不但会增加患上哮喘的病因，而且会加重其发病症状。在哮喘的发病过程 中，肥胖与tnf-&alpha;. il8这两种细胞因子正相关。而实验也表明，a、b两 组的tnf-&alpha;水平和血浆il8水平都比c组高(p<0.05),且a组的 tnf-&alpha;> il-8水平比b组高(pv0.05)。因此，肥胖成为哮喘的高危因素之一， 和肥胖者的tnf-&alpha;水平与il-8水平的升高有关，加重了炎症的反应程度和 临床表现。【参考文献】陈一平,姜晓红，封广义,孙起翔，罗明洁,李超乾不同品系小鼠肥胖哮喘模 型建立及比较j中国药理学通报,2016,02 (31) :288-292.陈琳，裴厚霜，朱述阳,朱