安捷伦高效液相1100培训教材

1、安捷伦高效液相1100培训教材 二 化学分析仪器部 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 关机 ：（单元泵） 自动进样器检测器 （检测器） （四元泵） 溶剂预备 二次蒸馏水 基本操作步骤：（一） 或 双击 图标 通讯 使其命令前有来调用所需的界面把流淌相放入溶剂瓶中打开阀单击图标单击选项消失参数设定菜单 选中则系统开头由溶剂瓶到泵入口 直到全部要用通道无气泡为止 单击图标单击选项单击关泵 消失参数设定菜单进入编辑画面单击泵下面的瓶图标以二元泵为例 单击 输入溶剂的实际体积和瓶体积 数据采集方法编 辑 开头编辑完整方法从菜单中选择 项单击 在 中加入方法的信息方法的用途等 单击进入下一画面 在 处输

2、入，（），一行”，编辑梯度 单击进入下一画面 也可 以爱护柱子 选择合适的进样方式，“只能输入进样体积可以输入进样体积和洗瓶位置 点击进入下一画面 如图所示 ” 会在洗瓶中洗针 在”下面的方框内输入所需温度，并选中它，点击” 键，如图所示，选中”使柱温箱的温度左右全都 点击进入下一画面 检测器参数设定： 波长 输入随时间切换的波长 色谱条件： 流淌相：，水 ；流量：；停止时间：出峰完毕 样品波长一般选择最大汲取处的波长 参比带宽 至少要与样品信号的带宽相等 狭缝窄宽时同时可以输入采集光谱方式范围 选中所用的灯点击进入下一画面 检测器参数设定： ，设定为， 若环境温度不稳定，则设定光学单元温度为

3、高于环境温度度，以防样品在池中沉淀只有在高速分析下设为更短 节约流淌相可随时投入使用 如图所示：“”若环境温度掌握在 点击图标 设为 必需将 设为 将其设为点击，进入下一画面 检测器参数设定： 色谱条件样品 柱温箱：，响应时间停止时间 大多数应用设为多波长及光谱 放射 步长 单击单击菜单输入一方法名单击 从菜单“”中选中”，选中，然后单击钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击（犹如时检测二个信号，则重复，选中） 从 菜单中选择 在 如上图所示在中选择或 框中输入前缀 仪器会自动命名 instrument system onready method 从菜单中 选中您的数据文件名 单击 ”菜单中

4、选择选项从中选择及合适的显示时间 反复进行 从 中选择 ”，如积分结果不抱负，再从菜单中选择 选项 从菜单中选择选项则修改相应的积分参数 图标 从菜单中选择选项 （） 选中 （） 从 菜单中选择“ （）（） 底部的关机： 则报告结果将打印到屏幕上 钮 则单击 的水冲洗系统分钟 反相色谱柱正相色谱柱用适当的溶剂冲洗 及其它窗口 如 用关 然后关泵 用适于 （五） 存放时 色谱柱用相应的有机相 对于手动进样器毫升 流淌相使用前必需过滤 溶剂不能干枯 其它办法事项见说明书 两端封死 要用水冲洗进样口 易长菌 要配制水异丙醇 正相每次数 维护学问 它会对色谱柱 消退由于 污染对分析结果的影响 由于填料

5、颗粒很细溶剂和样品中的细小颗粒 会使色谱柱和毛细管简单堵塞 溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损 样品过滤头的类型 适用于大进样量的过滤 处理样品体积少于 适用于范围广的过滤内径滤膜类型 适用于全部溶剂并无任何可溶物不适用于有机溶剂推举 用于蛋白质和其相关样品 适用于绝大多数有机溶剂和水溶液 由和两种规格 乙醇 具有蛋白汲取低 不适用于二甲基甲酰胺 用缓冲盐时，由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象，析出的细小盐粒特别坚硬，它附着在蓝宝石活塞杆上，随着蓝宝石活塞杆的往复运动，简单产生划痕，并磨损密封垫，造成漏液等故障现象 缓冲盐的浓度在或 大于时，必需使用该在线冲洗选项清洗液配制：

6、水异丙醇该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力 不能干枯 为什么 的流淌相管路特别细？在使用时，应特殊留意”柱外效应”对分析结果的影响 液体流淌相的流速也 比气相慢个数量级样品进入色谱柱后进样器 连接管中都会引起色谱 峰的展宽 为使柱外效应减之最小使用加工工艺难度高的毛细管线作为流淌相管路 内径绿色；内径红色内径； 流淌相使用前必需进行脱气处理 如以防止在洗脱过程中当流淌相由色 谱柱流至检测器时气泡会增加基线的噪音 甚至无法分析 柱中固定相发生降解而转变柱的分别性能可能会 造成荧光猝灭 常用的脱气方法比较 利用液体中氦气的溶解度比空气低效果 较好 加热回流法但操作简单 抽真空脱气法 超声脱气

7、法用超声波振荡 在线真空脱气法在线脱气无需额外操作脱气效果明显优于以上几种方法 以及堵塞后的处理 从而影响泵的运行 以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞 请严格执行溶剂过滤 请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液可在溶剂中加入的叠氮化钠：在溶剂瓶内溶剂的上方小流量连续吹，以氩气隔绝空气避开使溶剂瓶暴露在直射阳光下堵塞后的处理法方法 在浓硝酸中浸泡 泵给色谱柱供应稳定流量精确的流淌相 过滤使用缓冲盐时用 的水冲洗系统分钟如甲醇谱柱正相色谱柱用适当的溶剂冲洗 压力高于使用合适的密封圈 然后关泵适于反相色 如何选择合适的泵头活塞密封圈 但使用正相溶剂 特殊是长时间使用时 我们建议使用聚四

8、氟乙烯密封圈 聚四氟乙烯密封圈的压力范围为建议在泵的压力限制中 当盐溶液与有机溶剂溶液混合时而不会消失沉淀重力作用使盐颗粒沉淀下来 阀接水相盐溶液此法连接可有效使盐回落到盐溶液中若颠倒过来消失问题 当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时 有机溶剂通道直接接在通道的上方通道上以除去阀口上可能消失的盐沉淀 在线真空脱气机使用要留意那些事项 的真空脱气机无需过多维护 要用随仪器附带的注射器抽满脱气机腔体 要先抽空 由于样品分子在液体流淌相中的集中系数 比在气体中小个数量级 因此在柱子以外的任死何体 积柱接头 器样品分子的集中和滞留而使柱效降低 获得抱负的分析结果 检测 在更换色谱柱时留意接头处理就可以了卡套接头或管线手拧街头 要留意柱子接头处的外形和长度下面是不同厂家柱子接头的外形和长度 客户只需 柱子出口为不