沐舒坦针剂治疗兔创伤性急性肺损伤的实验研究

1、沐舒坦针剂治疗兔创伤性急性肺损伤的实验研究 摘要：目的 在兔创伤性肺损伤早期应用盐酸氨混素(沐舒坦)，观察其对兔创伤性急性肺 损伤的疗效并探讨其作用机制。方法 将实验动物(新西兰兔)随机分为3组：i组:对照组 (n=12) ; ii组:常规剂量沐舒坦治疗组，静脉注射沐舒坦5mg.kg (n=12) ;iii组:大剂量沐 舒坦组，静脉注射沐舒坦15mg.kg (n=12) 0 3组动物均采用自行研制的bim-vi型生物撞 击机撞击动物右侧胸壁致伤。分别于伤前和伤后仁3、7小时记录动物的心率、呼吸频率 的变化,并通过静脉插管抽血以测定血气、tnf-a. il-1p> il6、il8等指标，并

2、进行肺组 织的病理学检查。结果 实验动物肺损伤发生率达100% (36.36) o对照组动物(i组) 伤后pao2明显低于ii组和iii组(p<0.05) , paco2明显高于ii组和iii组(p<0.05)。 ii、iii组间pao2、paco2比较无显著性差异。ii、iii组外周血促炎因了 tnfa及il/、 il6、il8含虽显著低于对照组(p<0.05) , iii组血浆炎性细胞因了水平低于ii组血浆炎性 细胞因子水平(p<0.05) o组织病理学检查:ii、iii组动物肺组织水肿、灶性出血、肺不张 等急性肺损伤的表现较i组明显减轻，而iii组的上述急性肺损伤

3、的表现相对1【组有所减轻。 结论创伤后早期静脉应用大剂量沐舒坦能有效改善兔创伤性急性肺损伤的损伤程度。关键词：肺损伤;细胞因子;氧分压;沐舒坦;兔study of mucosolvan treatment of traumatic ali in rabbitswuhong-tao, ma xiao-lin, jiangyao-guang(trauma center, institute of surgery research, daping hospital, third military medical university, chongqing 400042, china)abstract

4、: objective to investigate the effects of mucosolum on acute lung injury after trauma in rabbits and its mechanism.methods thirty-six rabbitwere divided randomly into3groups.group i :control group, 12rabbits; ii:normal dosage mucosolvan group, 12rabbits;iii:large dosage mucosolvan group, 12rabbits.t

5、he model of thoraco-ab-dominal impact injury in rabbits was established with a steel ball falling down to the xiphoid process of animals.muco-solvan was injected with a dose of15mg.kg.preparation of the rabbits and the wounding methods were the same.results the morbidity of acute lung injury is100%

6、(36.36) .in group i , pao 2 decreased sharply after trauma .in group ii a nd iil the decrease of pao 2 were less serious than that of group i .the content of tnf-a, il-1, il-6a nd il-8i n group i was more tha n those of group ii an dill (p<0.05) .the content oftnf-at il-1, il-6and il-8in grouplll

7、was less than that of group ii (p<0.05) .in group ii andlll pathologic changes of au such as pulmonary edema, focal hemor-rhage, atelectasis were less serious than that of group in groupiil those changes were less serious than that of group i【.conclusion mucosolvan has definite treatment effects

8、on traumatic ali.key words:iung injury;cytokine;pao 2 ;mucosolvan;rabbits仓伤性急性肺损伤是胸部创伤示最常见的肺部并发症，若得不到有效的治疗，则可能发 展为ards,成为临床上该类患者死亡的主要原因之一。目前对急性肺损伤的治疗主要是病 因治疗，尽早进行机械通气，也可早期应用一定剂量的激素和抗氧化剂，如地塞米松、超氧 化物歧化酶等，但这些药物的疗效尚不肯定。沐舒坦是一种新型的粘液溶解剂，近年来，对 其呼吸系统的保护作用倍受关注。本研究通过建立创伤性急性肺损伤动物模型，采用沐舒坦 针剂治疗兔急性肺损伤，并通过检测相关指标观察其

9、疗效，探讨其作用机制，以期能为临床 治疗创伤性急性肺损伤提供一定的理论依据。材料与方法1动物模型与分组健康成年新西兰兔（山第三军医大学大坪医院实验动物中心提供）36只，雌雄不限， 兔龄8-10个月，体重3.03.8 （3.45±0.30） kg,随机分为3组，每组12只。i组:对照 组;ii组:常规剂量沐舒坦治疗组;iii组:大剂量沐舒坦治疗组。对照组:致伤后不作任何处理;沐 舒坦常规剂量组:致伤后分别于伤后即刻、2、4小时3个时相点按5mg.kg静脉注射沐舒坦; 沐舒坦人剂量组:致伤后分别于伤后即刻、2、4小时3个时相点按15mg.kg静脉注射沐舒坦。 所有实验动物均用速眠新dmg

10、.kg）肌肉注射麻醉示取仰卧位，固定，将其置于bim-vi型 生物撞击机下，采用重362.8g、宜径4.40cm的钢球自撞击机钢管1m高处自由下落的方式 撞击动物右侧胸壁处致伤，撞击动能e=35.55jo2观察指标与方法分别在伤前和伤示1、3、7小时记录各组动物的心率、呼吸频率的变化，并通过动脉 插管抽取血标木，测定血气分析（包括氧分圧、二氧化碳分压以及血液ph值），用elisa 法测定血清tnf-a> il-1. il6、il8等，试剂盒由武汉|専士徳公司购入，按说明书操作。 各组动物伤示7小时处死并进行人体解剖，详细检杏和记录肺损伤的类型、特点、严重程 度以及有无心脏等脏器的合并伤，

11、并参照1989年提出、美国创伤外科学会1994年修订的 （aast）分级标准进行分级门o三组动物凡是具有肉眼病理特征的肺脏受损部位均取 材，用10%卬醛固定，石蜡包埋，5pm切片，he染色，光镜下观察其组织形态学变化。3统计学处理所有计量资料均以均数士标准差x±s）表示，组间比较采用t检验。结果1生命体征变化所有动物撞击致伤示均出现明显的呼吸频率急剧加快，并岀现呼吸窘迫及呼吸矛盾运 动，1小时示恢复至撞击前水平;同时心率加快、股动脉搏动有力。随着伤后时间的延长， 呼吸和心率逐渐减慢，至伤后6小时左右，动物呼吸频率仍未恢复到伤前水平。2伤情特点三组动物均出现双侧肺损伤。主耍为肺的点状或

12、片状出血及广泛挫伤为主，其中"只 (30.6%)发生双肺弥漫性出血、2只(0.6%)发生横形裂伤。挫伤一般分布在肺中、下叶 和肺门附近。其中双肺同时损伤均较重27只(75.0%);以右肺损伤为主5只(13.9%), 左肺损伤为主3只(8.3%);发生右肺下叶破裂1只(2.8%)。按1994年修定的肺损伤 aast分级:均集屮在iiiv级之间。其屮，ii级14只(38.9%) , iii级21只(58.3%), iv级1只(2.8%);本组无i级v级和vi级损伤。3大体解剖及组织病理学观察3.1大体观察:三组动物均有急性肺损伤表现，主要表现为肺部不同程度的充血、不规 则的灶状、片状出血

13、和实变，同吋可见肺不张，而创伤后早期应用沐舒坦的ii、iii组动物的 上述肺损伤情况明显减轻，而且iii组动物的肺损伤情况肉眼观察较ii纟r有所减轻。3.2光镜观察:对照纟fl光镜下肺组织病理学变化主要为炎性粒细胞浸润，小血管(包括 小动脉、小静脉和毛细血管)淤血并有粒细胞扣押;小血栓或微血栓形成，小血管内皮细胞 肿胀及空泡变性，血管周囤水肿，小血管壁及周围炎性细胞浸润;弥漫性肺泡隔增厚并炎性 细胞浸润，灶性出血，有的区域嗜酸性粒细胞浸润明显。常规剂量治疗组亦表现有炎性粒细 胞浸润,小血管淤血，血管内皮细胞肿胀及空泡变性，血管周围水肿,小血管壁及周围炎细 胞浸润等，但损伤程度较对照组为轻。人剂

14、量沐舒坦治疗组可见肺泡壁多数完整，腔内有少 许出血、渗出及炎细胞浸润，但肺间质口细胞浸润明显。4三组动物伤后的血气变化血气分析:对照组动物伤后各时相点pao 2明显低于常规剂量沐舒坦治疗组及大剂量 沐舒坦治疗组(p<0.05) ;paco 2叽显高于常规剂量沐舒坦治疗组及大剂量沐舒坦治疗组 (pvo.05),而其它血气指标均无显著性差异(见表1)。5炎性细胞因子含量变化对照组伤后各时相点tnfa、il-1> il-6及il-8血浆水平明显高于常规剂量组和大剂量 组(见表2) o表1 3组动物血气各时相点动脉血气变化（略）各组与对照组比较:pvo.05;人剂量纽与常规剂量组比较:无显

15、著性差异。表2 3组动物伤后不同时相点tnfa、il-1. il6及il8血浆水平对比（略）各组与对照组比较:pvo.05;大剂量组与常规剂量组比较:pvo.05讨论本实验采用口制的生物撞击机成功复制了创伤性急性肺损伤的动物模型,伤后动物表现 为严重的低氧血症，组织病理学改变及血浆内细胞因了含暈变化与文献报道相似2。急性肺损伤（acute lung injury, ali）是指由严重感染、创伤等所引起的肺实质细胞损 伤为主要表现的临床综合征。木实验主要研究沐舒坦针剂在创伤性急性肺损伤救治屮的作用 及其机制。沐舒坦（盐酸氨漠素，盐酸漠环已胺醇）针剂系徳国勃林殷格翰公司生产的一种 新烈静脉用粘液溶

16、解剂，其化学成分为trans-4- （2-amino-3, 5-dibromo-benzyl） amino cy-clohexanolhydrochlorideo它主耍作用于气道分泌细胞，促进浆液性分泌，使粘液溶解 稀释，易被支气管纤毛排出，减少粘液的滞昭，从而使呼吸道通畅3 o此外，与传统 的祛痰药不同，它町以促进肺表面活性物质分泌，降低肺泡表而张力，同时川抑制呼吸道平 滑肌的收缩，减少咳嗽。沐舒坦述和其它一些治疗约物有协同作用，如它可以增加抗生素在 肺组织中的浓度，从而提高了抗生素疗效，防止了肺部感染4。更为重要的是，沐舒 坦能显著降低血浆炎症细胞因了 （cytokine, ck）水平5-

17、7,保护肺血管内皮细胞，改 善肺功能。il1、il8、il6、tnfc（等ck作为机体内重要的炎症介质，常参与机体的炎 症、创伤反应。有文献报道8, 9,创伤示发生严重创伤的病人血浆il6、tnf-a高于 未发生严重创伤者。若严重创伤病人出现il6、tnf-a的显著升高，死亡率将是100%,提 示严重创伤病人il6、tnf-a出现刃高则预后不良。动物实验也证实，严重创伤动物血浆 il6显著高于非严重创伤动物，血浆il6与伤情及转归有关，伤情越重，il6越高，预后 不良口0 o本实验对3组动物血浆中的ck含量进行了研究，发现在伤后1小时各组动 物血浆ck水平即显著升高，但对照组动物的ck水平随时

18、间推移逐渐进行性升高，而在伤 后7小时达高峰；i、ii二组动物血浆ck水平在伤后3小时仍高于伤前，但明显低于对照 组动物血浆ck水平，大剂量治疗组动物的血浆ck水平低于常规剂量组血浆ck水平。结 合病理学检查，对照组动物肺组织光镜下见:肺小血管管腔内大量中性白细胞侵入内膜下， 并向外侵入平滑肌层、血管外膜及周围间质;肺泡间隔内有人量白细胞浸润，使肺泡隔膜变 厚;肺泡腔内充有水肿液、屮性白细胞及许多巨噬细胞。治疗组光镜检查见:肺小血管腔内白 细胞（屮性多叶核白细胞及少量单核细胞，淋巴细胞）集聚，且有附壁现象;小血管周囤间 质水肿,亦见少最上述白细胞浸润;细支气管及腔内亦见上述门细胞浸润;肺泡腔内

19、充有水肿 液及少站巨噬细胞和屮性白细胞（常规沐舒坦剂录治疗纟fl和人剂赧沐舒坦治疗纟ii光镜检杏羌 异不明显)，肺纟fl织损伤程度较对照纟fl明显减轻。综上所述，我们认为伤示ck的峰值出现 越早，且在较高水平上持续的时间越长，则其肺部的损伤可能越重。这提不创伤示给予人剂 量的沐舒坦治疗有助于减轻tnf-a等细胞因了介导的肺部过度急性炎症反应，以及肺损伤 后肺泡组织细胞的损伤。本实验还观察到，在创伤早期(伤后13小时内)动脉氧分压变化并不明显或仅轻度 卜降，直到伤后7小时左右才开始表现出低氧血症，而早期使用沐舒坦治疗的2组动物伤 后7小时的氧分压有明显改善，此与文献报道一致11, 12 o此提示

20、在临床救治中，部 分创伤性急性肺损伤在早期其临床表现或许并不明显，在创伤后早期即开始使用沐舒坦，有 助于减轻及防止肺组织的进一步损伤。木实验屮，沐舒坦针剂在对兔急性肺损伤起到了明显的治疗及保护作用，减轻了创伤示 由炎性介质所介导的肺损伤。因此，在创伤性急性肺损伤早期人剂量应用沐舒坦治疗是切实 可行效果明显的有效而廉价的治疗方法。参考文献：1 moore ee, cogbill th, jurkovich gj, et al.organ injury scal-ing:spleen and liver (1994revision) j .trauma, 1995, 38:323-324.2 朱云

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