临床医学论文-黄芪对血液透析患者氧化应激的影响

1、临床医学论文黄罠对血液透析患者氧化应激的影响作者：曲晓璐，戴芹，漆映辉，唐咏华，徐达华，吴屮华，王晓【摘要】口的：了解维持性血液透析(mainlenance hemodialysis, mhd)患者的氧化应激及微炎症状态，观察黄英对其的影响。方法：选取60例mhd患者随机分为2组，在透析过程中给予(治疗组)或 不予(对照组)黄茂注射液治疗12周，另选取年龄和性别匹配的健康成年志愿 者10例为健康人组。荧光分光光度法测定血浆晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, ages)、晚期蛋白质氧化产物(advanced oxidation protein p

2、roduct, aopp)、脂氧化终末产物丙二醛(malondialdehyde, mda) 及维生素e (vitamin e, vit e)含量；酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, elisa)测定血浆c反应蛋白(c reactive protein, crp) 含量。结果：与健康人比较，mhd患者血浆ages、aopp、mda和crp含量显着升高 (p<0.01), vit e含量显着降低(p<001)；黄罠注射液治疗12周后，mhd 患者血浆ages、aopp、mda和crp含量明显下降(p<005, p<0.01

3、) , vit e浓 度无变化(p>0.05) o结论：mhd患者存在明显的氧化应激及微炎症状态；黄茂注射液可在一定程 度上降低其氧化产物的蓄积，减轻微炎症状态，但减少抗氧化剂vit e丢失的作 用不明显【关键词】 黄英；血液透析；氧化性应激methods: sixty mhd patients were included and randomized into treatment group and control group, with another 10 healthy volunteers as normal contro1. the patients in the treat

4、ment group were treated with astragalous injection and the patients in the control group were treated with normal saline for 12 weeks. a spectrophotometric method was used for the measurement of plasma concentrations of oxidative parameters including advanced glycation end products (ages), advanced

5、oxidation protein product (aopp), malondialdehyde (mda) and vitamin e (vit e). the content of c reactive protein (crp) was evaluated by enzyme 1 inked immunosorbent assay.results: compared with the normal control group, the plasma levels of ages, aopp, mda and crp were significantly increased, while

6、 plasma level of vit e was significant ly decreased in mhd patients (p<0.01) after ast ragalous tnj ect ion t reatment, the plasma levels of ages, aopp, mda and crp were decreased as compared with the control group (pco.ol), while there was no significant difference in plasma vit e level between

7、the treatment group and control group.conclusion: there exist oxidative stress and micro inflammation inmhd patients astragalous tnjection can ameliorate the accumulation of oxidativc products and micro inflammatory status, but it has no signi ficant effect on plasma vi t e leve1.keywords: astragalo

8、us membranaceus; hemodialysis; oxidative stress维持性血液透析(maintenance hemodialysis, mhd)患者的年死广率达9% 25%,其致死原因主耍是心血管系统疾病、感染及各种远期并发症。近10年来的 研究揭示，这些并发症与机体长期处于高氧化状态密切相关，氧化应激是导致透 析患者动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变、慢性炎症状态和贫血等多种远期并 发症的重要原因之一，因此众多学者纷纷提出血液透析患者应实行预防性抗氧化 治疗。我们初步观察了上海市浦南医院60例mhd患者的氧化应激状态以及黄罠 注射液对其的影响。1资料与方法1.1-般资

9、料 选取2006年4月至2007年3月在上海市浦南医院血液净化室进行规律性维持血液透析治疗的合格受试患者60例，按患者进入临床治疗 的先后顺序，以1 ： 1比例随机(按随机数字表法)分为2组：治疗组和对照组, 每组各30例。入选者均排除近1个月内的急性感染、输血、手术史，排除慢性 感染、活动性自身免疫性疾病及恶性肿瘤，近1个刀内未接受静脉滴注铁剂，静 脉滴注或口服免疫抑制剂、维生索c及维生索e等治疗。治疗组和对照组的原发 病主要为慢性肾小球肾炎、高血压肾病及糖尿病肾病，另有少数病例的原发病为 尿酸性肾病、多囊肾、狼疮性肾病、慢性肾盂肾炎、药物性肾损害、慢性间质性 疔炎及原因不明的终末期肾病。两

10、组在年龄、性别、透析疗程等一般情况和原发 病方面的差异无统计学意义，具有可比性(p>0.05) o另选择10例年龄和性别 匹配的健康成年志愿者作为止常对照组。见表1。表1各组一般资料(略)tabic 1 general data in different groups1.2治疗方法 使用日木kawsumi phx 2100型和德国fresenius medical care 4008 b型血液透析机,血仿膜透析器(gambro gfs plus 12), 面积1.3 m2,均一次性使用。水处理过程包描软化、活性碳吸附和反渗透等步 骤。碳酸氢盐透析液，透析液流量500 ml/min,血流量

11、200280 ml/min,血管 通路为自身动 静脉内痿，每周透析3次，每次4h。治疗组于每次透析结束前 30 min予以黃茂注射液30 ml+生理盐水100 ml稀释后从动脉端缓慢滴注，黃茂 注射液由上海福达制药有限公司生产(批号051208),每支10ml,相当于含生 药量20 g,主要化学成分是皂甘类、黄酮类、多糖类、氨基酸、微量元素等； 对照组于每次透析结束前30 min以生理盐水130 ml从动脉端缓慢滴注，疗程 12周。临床试验过程屮按照“透析记录单”的要求，每小时记录一次透析时的 血压、心率、呼吸及体温情况，密切观察出现的任何不良事件，并如实记录。所 有病例每周按要求详细填写一次

12、临床病例观察表。1.3观察指标及测定方法 治疗前，治疗组和对照组分别在开始观察的 透析前3 min内采血；治疗后，治疗组和对照组分别在观察结束h之后的首次来 院透析前3 min内采血;健康人清晨空腹采全血。所取标本均静置30 min后3 000 r/min离心10 min,移液器移取上清液分装，一40 °c冰箱冻存，待所有标本收 集完成后同一批次测定。治疗前后各检测一次血常规、心电图和肝功能以进行安 全性评估。1.3.1血浆晚期糖基化终末产物含量测定 采用hitachi (f 4500)荧 光分光光度计在激发波lx 360 nm发射波lx 430 nm和狭缝宽度5 nm的条件下 测定

13、荧光强度单位，计算每毫克蛋白所含血浆晩期糖基化终末产物(advancedglycation end products, ages）含量（荧光强度单位）1。1.3.2血浆晚期蛋口质氧化产物含量测定 参照文献方法2测定血浆晚 期蛋白质氧化产物（advanced oxidation protein products, aopp）含量。氯 胺t标准品购自美国sigma公司（货号:08822ld；批号:0857139）。1.3.3血浆脂氧化终末产物丙二醛含量测定 硫巴比妥酸反应底物法测定 血浆晩期脂氧化终末产物丙二醛（malondialdehyde, mda）含量，试剂盒购自南 京建成生物工程研究所（批

14、号：20060630）o1.3.4血清c反应蛋白含量测定 采用酶联免疫吸附双抗体夹心法 （enzymelinked immunosorbent assay, elisa）测定血清高敏c反应蛋口 （creactive protein, crp）含量，试剂盒购自徳国acei公司（货号：48041； 批号：042601） o1.3.5血浆维生素e含量测定 荧光分光光度计法测定血浆维生素e含量, 试剂盒购自南京建成生物工程研究所（批号：20060704）,按试剂盒说明书进行 操作。1.4统计学方法 采用sigma stat 3.0统计软件包，计量资料数据以x± s表示，采用t检验或方差分析进

15、行数据分析，统计检验均采用双侧检验,p<0.05 被认为差异有统计学意义。2结果治疗组1例因出现透析低血压反应而退出观察，1例死亡（狼疮性肾炎合并 多脏器衰竭），共脱落2例，其它未岀现不良反应，58例完成观察。2.1 mhd患者的氧化应激状态mhd患者血浆ages、aopp、mda、crp含量 与健康人比较显着升高(p<0.05, p<0.01),维生索e含量显着降低(pco.ol), 提示mhd患者存在氧化应激及微炎症状态。见表2。2.2黄英对mhd患者氧化应激状态的影响 对照组血液透析12周后，血浆 ages含量有所升高(p<005), aopp、mda、crp、维

16、生索e含量无明显变化(p >0.05)；治疗组经黄罠注射液治疗12周后，血浆ages、aopp、mda、crp含量 显着降低(p<005, pco.ol),血浆维生素e浓度无明显变化(p>0.05)。提 示黄罠注射液可降低mhd患者氧化产物的蓄积，减轻微炎症状态，但减少抗氧化 剂维生素e丢失的作用不明显。见表2。表2各组氧化应激指标的变化(略)table 2 changes of oxidation indexes in different groups*p<0.05, *p<0.01, vs normal contral group; ap<0.05, p

17、vo.ol, vs control group; pv0.05, pvo.ol, vs pre treatment.3讨论心血管系统疾病、感染及各种远期并发症是mhd患者的主要致死原因3。 目前在终末期肾病患者中，心血管疾病仍然有很高的患病率及死亡率，但仅靠传 统的危险因索不能解释，氧化应激是促使其发病的重耍原因之一 4。最近的 研究表明氧化应激在动脉粥样硬化小起着很重要的作用5 o ben zvi等6通过检测mhd患者血浆及唾液中总的抗氧化剂状况也发现，mhd患者均存在氧化 应激增加。也有研究证实，mhd患者体内存在微炎症状态7。微炎症是指一 种非病原微生物感染引起的表现为循环屮炎性蛋白和炎

18、症性因子升高，导致患者 出现各种并发症的非显性炎症状态8。近期研究认为crp是一种较好的乐毒 症慢性炎症反应标志物9。mhd患者的氧化应激状态可能与尿毒症毒素、透 析膜生物不兼容性及透析吋抗氧化物质丢失和药物影响等因素有关10, 11 oages是蛋口质的氨基、脂质、脂蛋口等与还原糖的醛基之间发牛非酶促糖 基化反应的终产物，尿毒症病人冇更高的血清ages水平，提不尿冉症中ages 的前体物质在构成和生成途径方而与高血糖状态下的ages不同；aopp作为尿毒 症患者氧化应激的标志物，血液透析患者血清aopp显着升高12 ； mda是脂 质过氧化反应和脂质代谢产物之一，同时也口j作为血管硬化危险度

19、评估的指标13l维生素e是一种重耍的脂溶性抗氧化剂。检测mhd患者血浆ages、aopp、mda、crp及维生素e含量等氧化述原标志物有一定意义14。国内外关于屮医药对血液透析患者抗氧化治疗的研究报道不多。从传统屮医 理论分析，尿毒症血液透析的患者，其基本病机多为正虚邪实，主要表现为气血 亏虚和湿浊内蕴两种证型15。黄罠为补气主药，具补气升阳、益气固表、托 毒生肌等功效，为中医治疗肾脏病所常用，其注射液为黄罠提取物的灭菌水溶液, 于1997年列入国家中医药管理局评审公布的“全国中医医院急诊必备中成药目 录”。我们的前期研究曾报道黄罠注射液可改善血液透析患者细胞免疫功能16。 另冇研究报道，黄罠

20、能捉高慢性肾功能衰竭患者的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, sod)活性，抑制细胞膜脂质过氧化，清除超氧阴离子自由基，降低 肾病综合症患者mda浓度，增加sod活性，证实黄罠对非透析肾脏病患者有一定 的抗氧化作用17, 18。沈健等19研究发现黄英注射液能对抗ages对肾 小球系膜细胞的损伤，可能是通过抑制氧化应激来保护肾小球系膜细胞免受ages的损害；有研究报道以黄英为主的益气固肾液具有改善透析膜牛物相溶性 的作用20。本文研究结果显示，mhd患者血浆ages、aopp、mda等氧化产物及crp含量 明显高于正常健康人，还原物质维生索e含量显着降低，表明mhd患者存

21、在氧化 应激和微炎症状态，这与国内外研究报道一致。黄罠注射液治疗12周后，mhd 患者的血浆ages、aopp、mda等氧化产物含量明显下降，血浆crp含量明显降低, 但血浆维生素e浓度无明显变化，提示透析过程中加以黄罠注射液阶段性治疗 后，可在一定程度上降低mhd患者氧化产物的蓄积，减轻微炎症状态，但减少抗 氧化剂维生索e丢失的作用不明显，是否与样本量偏少有关，有待进一步研究。【参考文献】1 liu zq, hou ff, wang l, et al establishment of elisa for measuring serum advanced glycation end produ

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