止痛凝胶膏剂体外释放与经皮渗透性探究

1、止痛凝胶膏剂体外释放与经皮渗透性探究摘要采用改良franz扩散池法进行实验，以延 胡索乙素为指标，hplc测定样品的含量，考察止痛凝胶膏剂 的体外释放和经皮渗透行为。经统计分析，24h内延胡索乙 素累积释药率和释药速率为81.9%, 2. 26 ug cm-2 h-1； 24 h累积经皮渗透率和速率分别为12. 53% , 0. 27 ygcm-2h-l, 48 h内累积经皮渗透率和速率为20. 31%, 0. 22 ugcm-2 h-l,表明止痛凝胶膏剂具有较好的释放 和透皮性能，透皮行为符合零级动力学过程。关键词透皮吸收；延胡索乙素；hplc；凝胶膏剂止痛凝胶膏剂由延胡索、川乌、草乌等多味

2、中药组成， 具有理气、活血、止痛之功效，用于行经腹痛、胃痛、肋痛、 头痛。凝胶膏剂（原巴布剂）是一类以水溶性高分子材料为 基质的新型外用剂型，具有载药量大，保湿性强，可反复揭 帖，随时终止给药，用药安全等优点1-2,是当前中药经 皮给药新剂型研究热点之一。本实验以方中君药延胡索中有 效成分延胡索乙素为指标，考察了止痛凝胶膏剂的体外释放 和经皮渗透行为，以期阐释止痛凝胶膏剂体外释药、经皮渗 透规律。1材料高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，717型自 动进样系统，empower色谱工作站，美国waters公司）； bsa224s cw电子分析天平（德国赛多利斯公司）；tk-20透 皮扩散

3、实验仪（上海错凯科技贸易有限公司）；z92-b多功能 搅拌器（天津利华仪器厂）。延胡索乙素对照品（中国食品药品检定研究院，批号 110726-201011）； peg400 （国药集团化学试剂有限公司）； 甲醇、乙睛为色谱纯；水为娃哈哈纯净水；其他试剂均为分 析纯。凝胶膏剂基质均为食用或者药用规格，包括聚丙烯酸 钠、卡波姆、明胶等。小鼠由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心 提供，昆明种雄性小鼠，spf级，体重15-17 g,合格证号 scxk-（军）-2009-0017 o2方法与结果2.1止痛凝胶膏剂贴的制备2. 1. 1空白基质的制备按基质处方比例称取卡波姆加 入甘油、蒸馆水适量，放

4、置使其充分溶胀，作为a相；称取 处方量pvp-k30, pva,明胶加入适量水中溶胀成胶，作为b 相；称取处方量聚丙烯酸钠、高岭土加入适量甘油中，作为 c相；b相与c相混合后加入a相，最后加入交联剂，搅拌 均匀即得空白基质。2. 1.2含药凝胶膏剂的制备精密称取处方量中药浸膏 和基质，混合均匀，制成膏体后均匀涂布于衬布上，加盖聚 乙烯薄膜，即得止痛凝胶膏剂样品。2.2实验方法与装置采用垂直式franz扩散池，将止痛凝胶膏剂贴紧密贴于 处理好的屏障上，固定于释放池与接收池之间，于接收池中 准确加入接受液18 ml,排净气泡。接受液为peg400-95%乙 醇-水(1 ： 3 ： 6) 3-4,扩

5、散池的有效扩散面积2.834 cm2, 磁力搅拌器转速400 rmin-1,水浴温度(32. 5±0. 2) °c, 分别在不同时间点取样，取样时将接收液全部取出，同时补 加同样体积的新鲜接收液。2.3延胡索乙素hplc分析2. 3. 1 色谱条件 agilent zorbax sb-c18 色谱柱(4. 6 mmx250 mm, 5 um)；流动相甲醇-乙睛-15 mmol十二烷基 磺酸钠溶液-三乙胺(24 ： 32 ： 44 ： 0. 5) 5,流速1.0 ml min-1 ；检测波长280 nm；柱温30 °c。在上述色谱条 件下，延胡索乙素与其他组分色谱峰

6、均达到基线分离，空白 接收液无干扰，见图1。2. 3.2对照品溶液的制备 取延胡索乙素对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每lml含2.020 ug的溶液，即得。2. 3.3供试品溶液的制备 精密量取接收液适量，蒸干, 用甲醇溶解，置10 ml量瓶中，用甲醇定容，过0. 45 um 微孔滤膜，即得。2. 3.4线性关系考察 精密吸取延胡索乙素对照品溶液 过 0.45 um 滤膜，分别进样 1, 2, 5, 10, 20, 50, 80 ul, 记录峰面积，以延胡索乙素进样量为横坐标，峰面积为纵坐 标，绘制标准曲线，回归方程为y=2x106x-l 561.8(r=0. 999 9),线性范围 0.

7、 002 020.161 6 ugo2. 3.5精密度试验 精密吸取供试品溶液，连续进样6 次，记录峰面积，rsd 2. 1%,表明该方法精密度良好。2. 3.6稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别于0, 2, 4, 8, 12, 24 h进样，记录峰面积，rsd 1. 9%,表明该方法 稳定性良好。2. 3.7重复性试验平行制备供试品溶液6份，分别进 样，记录延胡索乙素峰面积，rsd 1.0%,表明该方法重复性 良好。2. 3.8加样回收率试验 精密量取6份已知延胡索乙素 含量的供试品，分别置于10 ml量瓶中，按1 ： 1的比例加 入对照品，混匀，用接收液定容，即得加样回收试验样品， 平行

8、进行6次试验。按2. 3.1项下色谱条件进行测定，计算 平均加样回收率，结果见表1。2. 4体外释放实验取止痛凝胶膏剂帖6片，按2. 2项下方法进行实验，以 不锈钢纱网为屏障，于0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24 h取样， 制备释放样品，采用hplc测定接收液中延胡索乙素含量， 绘制体外释放曲线，结果见图2。2.5体外经皮渗透实验研究2. 5. 1离体鼠皮的制备将小鼠断颈处死，用适量脱毛 剂将小鼠毛小心脱去，用生理盐水冲洗干净，剪下皮肤，小 心剥离脂肪层，选取完整的皮肤，置于生理盐水中，于4 1 贮存。2. 5.2经皮渗透实验取止痛凝胶膏剂帖6片，按2.2 项下方法进行实验，将屏障

9、换成小鼠皮肤，于1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 h取样，制备透皮样品，用hplc测定延胡索乙 素含量，按2. 4项下进行计算，结果见表2,对结果进行线 性拟合，结果见表3。3讨论延胡索乙素的平均释放数据拟合符合higuchi方程，即 q=28. 302tl/2 +26. 887 (r=0. 974 4), 24 h 内延胡索乙素 累积释药率和累积释药速率为81.9% ,2.26u g cm-2 h-1,表明止痛凝胶膏剂整个释药过程符合凝胶 膏剂的释药规律，即骨架控释规律。24 h内止痛凝胶膏剂中延胡索乙素的透皮曲线q-t线性关系良好，方程为q=0. 726t+l. 142 4 (

10、r=0.997 3),延胡索乙素均以恒定的速度透过皮肤，符合 零级动力学模型，属于皮控型的给药系统。由于止痛凝胶膏 剂体外透皮吸收符合零级动力学模型，贴中药物的浓度越 高，透皮速率越快，从24 h到48 h,随着时间的推移，药 物经皮渗透量增加，使药物浓度降低，导致透皮速率降低。 因此，提高药物浓度对增加经皮渗透量是有意义的。参考文献1刘淑芝.中药巴布剂研究现状j.中医外治杂志，2005,14 (5)：3.2薛桂蓬，邢建国，赵媛，等.复方雪莲风湿凝 胶膏提取工艺研究j.中国现代应用药学，2012, 29(2)： 129.3田璐，张蜀，林华庆，等.经皮给药制剂体外透皮扩散实验方法的研究进展j.中

11、国药房，2012,23(29)：2761.4杜茂波，刘淑芝，李曼玲，等.萸连巴布剂体 外释放和透皮行为研究j.中国中药杂志，2009, 34(8)： 969.5杜茂波，刘淑芝，刘树扬，等.元胡止痛软胶囊中延胡索提取工艺优选j.中国实验方剂学杂志， 2012,18 (9)：50.study on in vitro release and percutaneous absorption for zhitong cataplasmsong li-hual, du maobo2, liu shu-zhi2*, geke-yal, wang wen-ping3, ca0qi-chen3, li xian

12、-duan2 (1. college of traditional chinese medicine,capital medical university, beijing 100069, china；2. institute of chinese medicine, china academy of chinese medical science, beijing 100700, china；3. liaoning university of traditional chinese medicine, shenyang 110847, china)abstract to evaluate i

13、n vitro release and transdermal behaviors of zhitong cataplasm, modified franz diffusion cell method was applied to investigate in vitro transdermal absorption of zhitong cataplasm and the content of tetrahydropalmatine was determined by hplc. in 24 hours, accumulative release rate of tetrahydropalmatine was 81. 9%, transmission rate was 2. 26 u g cm2 h-l. in 48 hours , accumulative transdermal rate and transmission rate of tetrahydropalmatine were 20. 31%, 0. 22 u g cm-2 h-l. so zhitong cataplasm h