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文档简介
1、o生物化学与分子生物学复习提纲第 2 章 氨基酸1. 凯氏定氮法2. 蛋白质水解方法( 优缺点 )3. 氨基酸结构通式4. 氨基酸的分类(缩写,结构式,分类)5氨基酸的酸碱性质(解离形式,HH公式,等电点:pH> pl,带负电,pHv pl,带正电)6. 氨基酸化学反应(羧基反应,氨基反应,茚三酮反应 ,侧链基团反应: -SH )7氨基酸的旋光性和光谱性质(蛋白的氨基酸为L型,近紫外区:Trp、Phe、Tyr , L-B定律)8分离分析方法(分配层析,离子交换层析:类型、分离氨基酸用强酸型阳离子交换树脂、决定亲和力的因素、氨基酸洗脱顺序 ) 第 3 章 蛋白质的通性、纯化和表征1酸碱性质
2、(等电点,等离子点)2蛋白质沉淀(方法,原理)3分离纯化方法(透析,超过滤,凝胶过滤:原理、分离顺序 ,盐溶,盐析:可逆,有机溶剂:防止变性方法 ,凝胶电泳,等电聚焦, 离子交换层析 ,亲和层析,高效液相层析)4相对分子量的测定(凝胶过滤,SDS-PAGE :原理,电泳顺序,速度沉降)5含量和纯度测定(常用方法)第 4 章 蛋白质的共价结构1分子大小(单体蛋白、寡聚蛋白、亚基)2结构组织层次(一、二、三、四级结构,形成因素,一级结构决定高级结构)3肽(肽键结构:构成、肽平面、反式,肽链书写方法,双缩脲反应)4蛋白质测序策略5测序的常用方法 (末端分析:N端一FDNB法、DNS法、PITC法、氨
3、肽酶法,C端一肼 解法、还原法、羧肽酶法; 二硫键断裂方法 ; 多肽链部分断裂 :常用内切酶、化学裂解; 序列测定 : PITC 法;序列重建,确定二硫键位置)第 5 章 蛋白质的三维结构1稳定三维结构的力(疏水相互作用,氢键,离子键,范德华力,二硫键)2折叠的空间性质(二面角,拉氏图)3二级结构(a螺旋:结构,影响因素 一R基电荷性质、R基大小、Pro和Gly的存在;3 折叠:类型、结构特点;3转角:结构)4纤维状蛋白质举例5超二级结构和结构域(概念,类型)6三级结构(球状蛋白质的分类,特征)和四级结构(同多聚/杂多聚,驱动力和专一性,优越性)7蛋白质的变性(概念,引起变性的因素,特征)第6
4、章 蛋白质的功能与进化1蛋白质功能2. 血红素的结构(原卟啉IX-Fe 2+)和珠蛋白结构3血红蛋白结构(a伍-血红素,结合 02的机制)4. 血红蛋白的功能(氧结合曲线双曲线 /S形曲线,别构效应:概念、类型; R态和T 态;Hill方程:Hill图、Hill系数一一协同程度的量度; BPG的作用:负异促调节物/别构 抑制剂;Bohr效应)5. 血红蛋白分子病(镰状细胞贫血病:机制,地中海贫血)6. 免疫球蛋白(IgG结构,ELISA :原理) 第7章糖类和糖生物学1. 糖的生物学作用2. 糖的分类3. 单糖的结构(链状结构:甘油醛t D/L系醛糖,二羟丙酮t D/L系酮糖,差向异构体;环
5、状结构:半缩醛酮,异头碳一a B型,吡喃糖和呋喃糖)4. 单糖的性质(氧化:Fehling/Benedict试剂t还原糖;糖酯;糖苷:异头碳失去-OH,与 另一化合物缩合,O/N/S/C-苷)5. 重要的单糖(己糖一一 葡萄糖:Glc,还原性吡喃醛糖; 果糖:Fru,还原性呋喃酮糖; 半 乳糖:Gal,还原性醛糖;甘露糖:Man,还原性醛糖;戊糖一一核糖/脱氧核糖:Rib,还原 性呋喃醛糖;木糖:Xyl,还原性醛糖;阿拉伯糖:Ara,还原性醛糖;核酮糖:还原糖;木 酮糖:还原糖)6. 单糖衍生物(糖醇:羰基还原为羟基;糖酸:醛糖酸/糖醛酸;脱氧糖:2-脱氧核糖;氨基糖:葡糖胺、N-乙酰葡糖胺、
6、半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺、胞壁酸、N-乙酰胞壁酸、神经氨酸、N-乙酰神经氨酸)7. 寡糖(表述方法; 常见二糖:蔗糖一一Glc a K>2 3 Fru乳糖一一Gal 3 1 t4G;麦芽糖 Glc a 1t 4GIc;海藻糖Glc al 今 1aGlC ;环糊精)8. 多糖(贮存同多糖:淀粉/糖原一一Glc a-1,4/ a-1,6 ;结构同多糖: 纤维素一一Glc 31,4 , 壳多糖 GlcNAc 31,4;结构杂多糖:果胶质,半纤维素,肽聚糖,糖胺聚糖)9. 糖缀合物(糖蛋白:N-糖苷键一一Asn, O-糖苷键一一Ser/Thr ;蛋白聚糖;脂多糖) 第8章脂质与生物膜1. 脂质
7、的分类2. 三酰甘油(脂肪酸:饱和 /不饱和,必需脂肪酸一一亚油酸、亚麻酸;酰基甘油:皂化/皂 化值,卤化/碘值)和蜡3. 磷脂(甘油磷脂:表8-3)和鞘脂(鞘氨醇, 神经酰胺一一鞘磷脂/鞘糖脂)4. 萜和类固醇(胆固醇)5. 血浆脂蛋白(结构,类型,功能)6. 生物膜结构(脂双层+蛋白质)和特征(不对称性,流动性) 第9章酶引论1. 碰撞理论和过渡态理论(活化能 /活化自由能)2. 酶降低活化自由能 (邻近、定向一一结合自由能;底物形变、诱导契合)3. 酶的特点4. 酶的化学组成(辅基/辅酶)5. 酶的命名和分类(6大类)6. 酶的专一性(结构/立体专一性,假说: 诱导契合)7. 酶活力测定
8、(酶活力:代表酶的量,酶单位国际单位/Katal 单位;比活力:代表酶的纯度;测定方法:测酶促反应初速率)8. 核酶(非蛋白质酶 RNA )9. 酶分子工程(固定化酶、化学修饰酶、抗体酶)第 10 章 酶动力学1. 有关概念( 基元反应 ,速率表达式, 质量作用定律 ,速率常数,反应分子数和级数, 一、 二、零级反应的特征 )2. 米-曼式方程(方程表述,米式常数,动力学参数的意义)3.米-曼式曲线(双曲线,线性化作图求KM 和 V max)4. 多底物酶促反应机制(序列 /乒乓机制)5其他影响因素(pH/温度/激活剂)6. 酶的抑制作用 (类型 ;可逆抑制的动力学:表达方程,双倒数做图,参数
9、变化 ;抑制剂举 例)第 11 章 酶作用机制和酶活性调节1酶活性部位(特点,确定方法)2基元催化的分子机制(酸碱催化,共价催化:亲核/亲电,金属离子催化)3酶高催化能力的原因(邻近和定向效应,诱导契合,底物形变:去稳定化/去溶剂化/静电效应,电荷极化,多元催化,疏水微环境)4丝氨酸蛋白酶催化机制5酶活性的别构调节(相关概念,动力学特点:曲线形状,协同模型)6酶活性的共价调节 (可逆:磷酸化一一激酶/磷酸酶,级联放大;不可逆:酶原一一消化酶/凝血酶)7. 同工酶第 12 章 维生素与辅酶1维生素的类型2维生素的辅酶形式及主要生化功能(表12-1)3几种维生素缺乏症(脚气病一B1,坏血病一C,夜
10、盲症一A)第 13 章 核酸通论1核酸的种类2核酸的生物功能第 14 章 核酸的结构1核苷酸(碱基:嘧啶一一C/T/U,嘌呤一一A/G ;核苷:糖的C1与嘧啶的N1或嘌呤的N9 形成N-糖苷键;核苷酸:磷酸的位置,常见核苷酸一一表14-4)2核酸的共价结构 (3/ ,5/ -磷酸二酯键,表示方法,mRNA的特殊结构:3Z polyA尾巴, 5帽子 )3. DNA高级结构(双螺旋结构,超螺旋,染色体组装)4. RNA高级结构(tRNA :二级结构一一三叶草形 /四环四臂,三级结构一一倒 L形)第 15章 核酸的理化性质和研究方法1 核酸的水解(类型,优缺点)2. 酸碱性质(碱基解离;核苷解离;
11、核苷酸解离 :等电点,解离曲线图15-1;滴定曲线图 15-2)3核酸紫外吸收 (240-290nm ,最大吸收在 260nm ; A260/A280 :纯 RNA > 2.0 纯 DNA > 1.8; 摩尔磷吸光度:单链比双链高增色/减色效应)4. 变性(概念;引发因素;性质变化;爆发式熔解温度;影响溶解温度的因素:离子强 度, G-C 含量,甲酰胺)5. 复性(二级动力学; 影响因素 ;退火;退火温度)6. 分子杂交( Southern 印迹 DNA , Norther 印迹 RNA)7. 核酸的分离纯化(超速离心;凝胶电泳:琼脂糖凝胶电泳凝胶浓度与孔径成反比,迁移率与碱基对的
12、对数成反比, EB 染色,紫外线下发橙红色荧光 ;脉冲电场凝胶电泳,聚丙 烯酰胺凝胶电泳 孔径决定于丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的浓度; 柱层析: 羟基磷灰石柱 层析双链吸附力比单链强, dsDNA >DNA-RNA >dsRNA ;寡聚脱氧胸苷酸亲和柱层析 mRNA ; DNA/RNA 的提取与纯化)8. 核酸测序( 双脱氧链终止法:原理;化学降解法:原理四组特异反应;自动测序)9. 核酸化学合成(固相亚磷酸三酯法:脱保护基、偶联反应、终止反应,氧化作用)第 16 章 激素1. 激素的分类2. 激素分泌的等级控制和反馈调节(图16-2、16-3)3. 激素作用机制(细胞内受体:图16
13、-4;细胞表面受体: 第二信使 cAMP 、cGMP 、IP3、DAG、Ca2+, cAMP介导的途径一一图 16-6, IP3- Ca2+介导的途径一一图 16-8)4. 昆虫激素和植物激素(种类)第 17 章 新陈代谢总论1. 相关概念(新陈代谢、中间产物、代谢物、分解代谢、合成代谢)2. 新陈代谢的功能第 18 章 生物能学1. 相关概念(体系一一3种、环境、热力学的两个定律、自由能方程一一 G=dH-TAS)2. 自由能变化与平衡常数的关系(方程11、 12;计算举例)3. 高能化合物(概念;高能磷酸化合物:ATP、 PEP、 1,3-二磷酸甘油酸、磷酸肌酸、乙酰磷酸、磷酸精氨酸;其他
14、:乙酰 CoA、S-腺苷甲硫氨酸)第 19 章 六碳糖的分解和糖酵解作用1. 糖酵解(过程,酶,能量结算)2. 丙酮酸在无氧条件下的去路(乳酸、乙醇)3. 糖酵解的调节( 3 个不可逆步骤及相关酶;果糖 -2,6-二磷酸)4. 其他六碳糖的分解(果糖、半乳糖、甘露糖分解过程;乳糖不耐症/半乳糖血症)第 20 章 柠檬酸循环1. 丙酮酸形成乙酰 CoA (转运丙酮酸移位酶,反应过程,丙酮酸脱氢酶酶复合体,5种辅助因子)2. TCA 循环(反应过程,酶,化学结算)3. TCA 循环的调节(丙酮酸脱氢酶系:别构调节/共价修饰; 3 个不可逆步骤:柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、a-酮戊二酸脱氢酶复合体)
15、4. TCA循环的双重作用(分解和合成双重作用图20-6 ;添补反应丙酮酸t草酰乙酸,丙酮酸羧化酶; )5. 乙醛酸循环(植物特有;过程及酶图20-7)第 22 章 戊糖磷酸途径1. 戊糖磷酸途径(反应过程图 22-2; NADPH 的产生; C 数目的变化)2戊糖磷酸途径的调控(限速步骤:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 J NADNADPH +/NADPH ; 4种情况)3生物学意义(细胞产生还原力的主要途径,另一个来源是脂肪酸合成中苹果酸酶催化苹果 酸形成丙酮酸时产生 ;不同结构糖分子的重要来源)第 23 章 糖异生和糖的其他代谢途径1糖异生的途径(3步迂回措施;与糖酵解的差异一一表23-1 ;能
16、量结算)2糖异生的调节(PFK/果糖-1,6-二磷酸酶;丙酮酸激酶/丙酮酸羧化酶/PEP羧激酶)3乳酸的再利用(可立氏循环一一图23-2)4糖的其他代谢途径(乳糖合成:乳腺组织/非乳腺组织;乳糖分解)5糖蛋白的合成(N-连寡糖合成:图23 4;特异连接位点;共翻译加工;O-连寡糖合成:翻译后加工,逐个加入单糖)第 24 章 糖原的分解与合成代谢1. 糖原的分解(反应过程,酶)2糖原的合成(反应过程,酶)3代谢调控(糖原磷酸化酶:别构调节/共价修饰一一图11-25;糖原合酶;激素一一图24-7、24-8)第 26 章 蛋白质降解和氨基酸的分解代谢1蛋白质降解(溶酶体:无选择性;泛肽/泛素途径:选择性一一图26-1)2. 氨基酸的脱氨基(转氨基,氧化脱氨基Glu脱氢酶,联合脱氨基;氨的命运:排氨/ 排尿素 /排尿酸)3尿素
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