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文档简介

1、酶活性高通量分析的有力工具近日，南京大学鞠?合妊芯孔樵谥势壮上穹治觎 矫媛弥卮虫矍?展，相关成果maldims patterning of caspase activities and its application in the assessment of drug resistance n 于 4 月 21 日在线发表于 angew. chem. int. ed., doi： 10.1002/anie.201601096o质谱技术由于高通量和免标记的优势，在酶活性 分析中得到广泛关注。然而，由于生物样品的成分复 杂，组分丰度的分布差异大，其应用常被复杂的样品 前处理所限制。为简化繁琐的样品

2、前处理和数据分析 过程，鞠?合妊芯孔棒（沽酥势壮上穹治鲂录际酰?实 现了对多种酶活性的便捷可视化分析。该工作首先需 攻克质谱成像分析尤其是通常maldims检测存在的 难题，大幅度提高质谱信号与信噪比，从而通过逐点 扫描，获得清晰的质谱图像。该课题组以磷脂分子修 饰多肽底物，利用具有两亲特性的磷脂分子保证其在 疏水玻片表面的有序组装，构建模拟生物膜，从而增 强maldi芯片的表面生物相容性，以使分析对象酶更 易接近其底物，大幅度提高了质谱信号；同时这一设 计增加了酶反应产物的分子量，可以避免基质与生物样品中杂质的干扰，改善了检测信噪比与质谱分辨能 力。他们以含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶家族(

3、caspasel, 2,3和8)为模型，将相应多肽底物分别与磷脂骨架的分子连接并组装嵌插于疏水玻片表 面，制备出用于酶活性检测的阵列芯片；在目标酶的 作用下，底物被剪切产生质量位移，各酶的活性通过 酶切产物的质荷比进行颜色编码，实现了多种酶活性 的可视化与高通量定量检测(图1)。这一方法已成功 用于细胞内水解酶家族的抑制剂筛选和化疗过程癌细 胞中caspases酶活性演化的监测，为耐药性细胞鉴别 及抗癌药物筛选提供了有力工具，并可方便地扩展应 用于其它酶系统，为探究更多过程中酶的作用机制提 供了新途径。鞠?合冉淌谖?解决实际问题于2000年开始质谱 研究，建立了海洛因及其代谢物的lc/ms分析方法及 鼠药的gc/ms快速检测方法等。2010年后，随着生 命分析化学国家重点实验室的建立与生命科学研究的 需求，该研究组将纳米技术、化学衍生及化学生物学 与传统质谱分析方法结合，通过功能化碳纳米角、磁 性碳纳米管等纳米材料，提出低丰度生物小分子(chem. eur. j.,2013,19：102-108)与蛋白集手段，建立了无需另加基质的maldims检测方法。 特别是，针对阻碍maldims定量分析的瓶颈，该课题 组利用分子标记实现了 maldi定量(anal.chem., 2014,86：8275-8280； anal. chem.,

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