血液细菌培养仪操作sop

1、实验室主题文件编号W25血液细菌培养仪 操作规范第129页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：LABSTAR 50自动血液细菌培养仪操作规范一、基本原理LABSTAR 50采用均质荧光增强检测技术。培养瓶底部的荧光传感器 受细菌产生的代谢物质激发产生荧光，荧光强度随着细菌数量的增加而不 断增强。系统根据荧光变化趋势判断有无微生物生长。仪器瓶位内的探测 器探测到该荧光信号的变化并经一组运算公式的运算，得出荧光信号变化 的各种参数，从而判断培养瓶内是否有微生物生长。LABSTAR 50设定瓶位探测器检测与计算时间间隔为每10分钟一次， 并根据运算结果提供生长曲线。二、开机前的准备

2、工作：1. 检查电源系统：与LABSTAR 50相连的输出电压220±2；2. 本仪器为24小时开机，无特殊情况不关机。三、开机后检查工作：1. 仪器自检：不报警继续；2. 检查温度 35°C±1.5°Co四、样本培养与检测置入血培养瓶：培养瓶准备完毕后；1.撕下培养瓶上的双条码之一，贴于送检报告，以备查询1）使用读码器置瓶：点击仪器控制程序中的“开门”键，并把仪器门打开；然后点击“置入”键, 仪器自动弹出对话框，使用读码器读取血培养瓶上的条形码，仪器自动给出将要 放置血培养瓶的位置号，将此培养瓶按照给出的位置号放入仪器，点击“确认” 键（同时主程序界面

3、上的培养瓶位置号上显示为黄色），关上仪器门，仪器将30 秒钟后自动恢复运行。2）人工输入条形码置瓶：操作步骤同使用读码器置瓶，区别在于人工将培养瓶上的条形码编号输入对 话框中。提示：置完培养瓶后，请及时将仪器门关上，避免仪器内温度不足！3）病人信息录入、査询和统计打开仪器控制程序，点击“数据管理”键，出现对话框界面，可进行信息录 入、标本查询和综合统计。4、培养血培养瓶放入仪器后，血培养仪将自动旋转对血培养瓶进行培养。温度保持 35°C±1.5°C,转盘以26转/分钟的转速匀速旋转。起草人操作人批准人生效日期实验室主题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培

4、养仪 操作规范第130页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：5、检测仪器以10分钟为周期对培养瓶进行动态检测。血培养瓶激发产生的荧光通过 光电检测器和A/D转换系统传送给系统计算机分析程序。6、报警系统对检测信号进行分析，发现阳性瓶及时报警，报警后在主程序界面上的培 养瓶位置号上显示为红色，可以取出培养瓶，转种培养皿，进行其它分析实验。 持续培养5天后未发现微生物生长的血培养瓶，将报告为阴性瓶并报警，主程序 界面上的培养瓶位置号上显示为草绿色，可以取出培养瓶。屏幕培养瓶位置上的颜色说明：黄色为在检瓶位；红色为阳性瓶位；草绿色为阴性瓶位；蓝色为问题瓶位。7、取出培养瓶1）使用读

5、码器取瓶点击仪器控制程序中的“开门”键，并把仪器门打开；将主程序界面上的培养 瓶位置号上显示为草绿色或红色的培养瓶取出，然后点击“取出”键，仪器自动 弹出对话框，并使用读码器读取血培养瓶标签上的条形码，同时主程序界面上的 培养瓶位置号上显示为白色，表示培养瓶已取出。2）人工输入条形码取瓶操作步骤同使用读码器取瓶，区别在于人工将培养瓶上的条形码编号输入对话 框中o提示：取完培养瓶后，请及时将仪器门关上,避免仪器内温度不足！注：详情请参考LABSTAR 50自动血液细菌培养仪使用说明书。注意：本培养瓶为一次性产品，使用后应按医疗废物管理条例的规定高压 灭菌后再进行处理。8、系统参数的设置1）培养时

6、间系统默认为120小时，如有特殊要求，应在置入瓶子时将屏幕上显示的时间参 数予以修改。2）培养温度培养温度设置恒定为35±1.5°C,不能修改。3）科室设置打开仪器控制程序，点击“系统设置”键，出现对话框界面，点击“科室”, 直接科室名称，然后按键盘上向下的坐标键即可；系统复位打开仪器控制程序，点击“系统设置”键，出现对话框界面，点击“系统 复位”，点击“清除所有瓶位”。起草人操作人批准人生效日期实验室主题文件编号W25检验科临床微生物室血液细菌培养仪 操作规范第131页共180页第1版第0次修改撰写日期：提示：系统复位仅在仪器出现较严重故障后，或停电超过1小时后，才能使用

7、。在 仪器正常使用时不能用，否则会出现所有在检数据丢失！ ！9、结果解释）阴性结果可以理解为两种结果：无菌血症；有临床症状而未被检出，原因如下：局部感染苛养菌、衣原体、L型菌标本釆集时机不对检查之前使用了抗菌药物治疗。周期性菌血症对的处理措施：重新釆集标本检测2）阳性结果1）一次阳性：致病菌：布鲁氏菌，沙门氏等菌血症腐生菌：丙酸菌,表皮葡萄球菌污染2）数次阳性：相同细菌：脑膜炎、心内膜炎、菌血症不同细菌（原因为免疫抑制）：烧伤、菌血症五、报警及错误处理错误种类故障种类可能原因解决方案瓶位变蓝Al、Bl、C1被误放入培 养瓶，或者瓶位放置不 对应。检查确认并排除人为因素数据线松动拔下数据线重新安

8、装，并紧固其他原因请联系厂家授权工程师维 修系统提示：温度过高或过 低，血培养瓶检测过程中 系统死机数据线接触不良拔下数据线重新安装，并紧固。其他原因请联系厂家授权工程师维 修起草人操作人批准人生效日期实验室主题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培养仪 操作规范第132页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：1、前门正常打开未关闭 时，系统自动进入“AUT0 MOVE”状态；2、前门关闭后，系统状态 始终显示：“OPEN DOOR”。数据线接触不良拔下数据线重新安装，并紧固其他原因请联系厂家授权工程师维 修系统温度出现：数据线接触不良拔下数据线重新安装，并紧固其他原因

9、请联系厂家授权工程师维 修温度报警培养箱温度过高1、减少开门时间2、清洁过滤网3、检查实验室温度培养箱温度过低转子转速超限转子转速减慢1、确认培养瓶放置无误2、去除阻碍原因3、所有培养瓶进行接种转子停止转动电压过高或过低1、检查稳压电源和UPS2、重新开机。检测停止30分钟仪器如开门或停电超过30分钟， 所有的培养瓶传代接种。数据破坏1、将数据拷贝，与工程师联系2、所有培养瓶传代接种。培养瓶错误1、培养瓶未放好。2、培养瓶随意取出。3、培养瓶位置错误。4、瓶位硬件错误。1、将培养瓶放好2、将丢失的培养瓶找回。3、强行将出错位置终止复活。4、将损坏的瓶位关闭。电源错误检查电源是否匹配。起草人操作

10、人批准人生效日期实验室i-.题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培养仪 操作规范第133页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：仪器己满仪器最多可同时检测50 个瓶子。取出己达到培养时间的瓶子。血培养仪电源灯不亮，主 机不工作电源线接触不良检查电源插头与插座是否接插 良好电源线损坏更换电源线其他请联系厂家授权工程师维 修工控机开机报警内存条接触不良关掉工控机主机电源，打开机 箱，拔下内存条重新安装并紧固其他请联系厂家授权工程师维 修工控机开机，屏幕不显不显小器信号线接触不良检查并紧固显示器信号线其他请联系厂家授权工程师维 修工控机无法开机请联系厂家授权工程师维 修工控

11、机开机后，显示黑屏 白字信息，系统软件无法 启动请联系厂家授权工程师维 修六、日常维护注意：在对仪器进行以下维护操作前必须断开所有内部电源。1、一般性维护：每隔一星期用潮湿的抹布清洁仪器仪器后面的三个空气换气孔表面灰尘。每隔一个月清洁仪器四周的灰尘，除去仪器表面的杂物。每半年检查稳压电源的输出电压是否正常。请保持房间的温度，保持实验室干燥和洁净，少开窗户，随手关门。如遇停电，请将仪器电源开关关闭，等來电后，再重新开启仪器。如遇特殊故障报警，请将仪器电源关闭，三分钟后重新开启仪器即可。2、清除溢出物：、如有可能，建议实验室按以下步骤清除溢出物：1）为了防止可能含有结核分支杆菌的溢出物，必须穿上适

12、当保护装备包括起草人操作人批准人生效日期实验室主题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培养仪 操作规范第134页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：2） HEPA过滤口罩、手套、眼睛保护罩和外套，此外，在某些情况必须穿上 全身包围的保护及或鞋罩避免衣物受污染。2）用纸巾将有溢出物的地方轻轻覆盖。3）用10%漂白液或EPA登记的结核分支杆菌消毒剂，将所有溢出物可能接触 到的表面弄湿。4）在清除溢出物之前，允许物体表面与漂白液有足够的接触时间，一般为 1530分钟。5）所有在清除过程中用过的材料都应视为生物危害废弃物处理。3、溢出物的消毒：任何血液或试验标本溢出时，必须用

13、以下步骤立即去除：1）当处理血液、含血液物质及血液污染材料时必须穿上保护手套。警告：处理的标本和接种过的培养瓶应视为传染源处理。所有接种过的培养 瓶、接种针和血液注射器等在丢弃之前必须高压灭菌。2）按照实验室制定的去污染步骤或根据最新CLSI指导手册Protection of Laboratory works from instrument Biohazards and Infections Disease Transmitted by blood, Body fluids and TissueM29-1 文件描写的步骤清除 溢出物。4、进入仪器中溢出物的消毒步骤：如果发现可能含有结核分支杆菌

14、的溢出物，只有戴着手套、HEPA过滤口罩等 保护衣物的人才可留在房间中，任何培养瓶的溢出物必须立即移去，受污染的地 方必须用下列步骤处理：1）查看漏出或溢出的程度，看看是否一个或多个架子被污染了。2）尽可能地将漏出瓶移掉。注意：如果培养瓶卡在单元中，请同厂家售后服务联系，不要强行操作。3）取出受溢出物影响的培养瓶，在对受影响单元和培养瓶进行消毒之后再 重新置瓶。4）对于受污染的单元，用10%漂白液按如下步骤进行消毒： 插入纱布将单元中多余的液体去除，小心地将纱布丢弃在生物废物筒中。 用纱布醮取10%漂白液清洗单元的内壁，并将其丢弃在生物废物筒中。 在单元中插入若干层在10%漂白液中浸泡过的纱布

15、，并放置1530分钟 进行消毒。 将纱布取出，丢弃在生物废物筒中。起草人批准人生效口期实验室主题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培养仪 操作规范第135页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：七、样本采集与处理1、血标本采集指征一般患者出现以下一种或多种体征时可作为采血的重要指征 发热（M38°C）或低温（W36°C）、寒战、白细胞增多（计数大于10.0X107L, 特别有“核左移”时）、皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、C反应 蛋白升高及呼吸加快、血液病患者出现粒细胞减少、血小板减少等2、采集部位和时间一般应在病人发热初期或高峰时采集。

16、怀疑为细菌性心内膜炎病人应作3次血培养分离病原菌，并在24h内不少于每小 时一次的方式分别采血。如果病人在培养前12周己用过抗菌药物治疗，则于以后1天内再作23次血 培养。每次在2-3个部位各釆1份标本。在24小时内釆集2-3次标本。3、采血量成人每瓶釆血量为5-10ml儿童每瓶釆血量为1 -5ml4、皮肤消毒程序（1）75%的酒精擦拭静脉穿刺部位30秒。（2）碘酊30秒或碘伏60秒。（3）75%酒精脱碘。（4）待酒精挥发干燥后穿刺采血。5、培养瓶的消毒程序（1）75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。（2）用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精。（3）将标本注入培养瓶内。注意：1）培养瓶内

17、疑有污染或瓶体破裂均禁止使用。2）培养瓶仅限于体外诊断使用。6、标本的贮运（1）釆血后，立即送到实验室上机。（2）如不能立即送检，可置于室温下或温箱（35-37°C）保存，切勿冷藏。（3）延迟上机时间不能超过20小时。7、接收标准肉眼观察无混浊、菌膜、菌苔、凝固等细菌生长迹象。釆血适量。检查培养瓶无渗漏、破裂或明显污染。培养瓶上的标签与申请单相符，患者的资料齐全。起草人操作人批准人生效日期实验室主题文件编号W25XXXXXXXX 医院血液细菌培养仪 操作规范第136页共180页检验科临床微生物室第1版第0次修改撰写日期：8、对于不合格的血培养标本的处理拒收培养瓶：血培养瓶与化验申请单

18、不符，培养瓶破裂或明显污染。补作培养瓶：采集后放置超过12小时，培养瓶类型选择不当，培养瓶过期，采 血量不足等。八、对于生长状况的质量控制可使用标准菌株如大肠埃希菌ATCC25922等作为质控菌株，向测试瓶中接种,接种量大约50CFU/瓶，对于每种类型的培养瓶都作此测试，步骤如下：1、向培养瓶中加入12ml无菌血液。2、使用在固体培养基上生长了 1824小时的已知菌，以无菌生理盐水配制 浓度为0.5MCF的悬浮液。3、对此悬浮液进行以下连续稀释： 稀释1:100：从步骤2）中吸取0. 1ml的悬浮液，加入9.9ml无菌生理盐水中。 稀释1:100：从步骤 中吸取0. 1ml的悬浮液，加入9. 9ml无菌生理盐水