临床实验室安全理二

1、临床实验室安全管理（二）第二节 实验室安全设备和用品中南大学湘雅三医院检验科中南大学湘雅三医院检验科 彭怀燕教授彭怀燕教授 按照按照病原微生物实验室生物安全管病原微生物实验室生物安全管理条例理条例所规定：所规定：具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备。具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员。具有有效地防止病原微生物扩散和感染。具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。 一一. . 生物安全柜生物安全柜一一. .生物安全柜的工作原理和分类生物安全柜的工作原理和分类(一一)、生物安全柜的基本工作原理、生物安全柜的基本工作原理 生物安全柜生物安全柜（biosafety ca

2、binet；biological safety cabinet）是防止操作处理）是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置生物安全柜的基本设计的两个重要改进：生物安全柜的基本设计的两个重要改进： 1、hepa过滤器 2、hepa过滤器+层流技术n生物安全柜的生物安全柜的工作原理工作原理主要是将柜内空气向外主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器；外界空气经高效空气

3、过滤器（high-efficiency particulate air filter, hepa filter）过滤后进入安全柜内，以）过滤后进入安全柜内，以避免避免处理样品被污染处理样品被污染；柜内的空气也需经过；柜内的空气也需经过hepa过滤器过滤后再排放到大气中，以过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。保护环境。 生物安全柜的工作原理生物安全柜的工作原理气流示意图气流示意图(二二)、生物安全柜的分类、生物安全柜的分类v生物安全柜领域执行的最重要的标准是生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准欧洲标准en12469和美国国家卫生基金会的第和美国国家卫生基金会的第49号标准号标准（nsf

4、49）vnsf49在上世纪在上世纪70年代就已经出现，被公认为目前生物年代就已经出现，被公认为目前生物安全柜领域最完善的标准。安全柜领域最完善的标准。2002年，年，nsf49正式获得正式获得了美国国家标准学会（了美国国家标准学会（ansi）的认可，成为美国生物安）的认可，成为美国生物安全柜的统一标准全柜的统一标准v欧洲标准化委员会（欧洲标准化委员会（cen）于）于2000年年5月颁布了生物安月颁布了生物安全柜欧洲标准全柜欧洲标准en12469:2000，成为欧盟区域内生物安，成为欧盟区域内生物安全柜的统一标准全柜的统一标准v这两个标准对这两个标准对生物安全柜的分类、性能和检测生物安全柜的分类

5、、性能和检测均有明确均有明确规定规定(二二)、生物安全柜的分类、生物安全柜的分类v根据防护程度的不同，通常将根据防护程度的不同，通常将生物安全柜分为生物安全柜分为、级级，可，可适用于不同生物安全等级的媒质的操作适用于不同生物安全等级的媒质的操作v按照美国按照美国1992年版年版nsf49标准标准生物安全等级生物安全等级1级（级（p1）的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物物生物安全等级生物安全等级2级（级（p2）的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物微生物生物安全等级生物安全等级3级（级（p3）的媒质是指烈性的媒质是指烈性/致

6、命细菌、病毒等微致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈生物，但感染后可治愈生物安全等级生物安全等级4级（级（p4）的媒质是指烈性的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈生物，感染后不可治愈 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是指用于保护操作人员级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜安全柜v适用于适用于对处理样品安全性无要求对处理样品安全性无要求且生物且生物危险度等级为危险度等级为1、2、3的媒质的操作的媒质的操作 级级生物安全柜结构示意图生物安全柜结构示意图 无手套型无手套型 有手套型有手套

7、型级生物安全柜级生物安全柜v因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染，故因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染，故对进入柜内对进入柜内的空气洁净度要求不高的空气洁净度要求不高v空气的流动为空气的流动为单向、非循环式单向、非循环式，空气流经，空气流经hepa过滤器后进入柜过滤器后进入柜内，通过工作台面后又被过滤、经排气口排出内，通过工作台面后又被过滤、经排气口排出v为为保护操作人员安全保护操作人员安全，其向内的非循环吸入气流必须远离操作者，其向内的非循环吸入气流必须远离操作者，故要求在使用前方有操作窗口、无手套的故要求在使用前方有操作窗口、无手套的级生物安全柜时，避级生物安全柜时，避免人员

8、在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从免人员在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从柜内抽出柜内抽出v为为保护环境，保护环境，安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过hepa过滤器过滤过滤器过滤 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜样品安全与环境安全的通风安全柜v通常适用于生物危险度等级为通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的媒质的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用于微生物研究或制药的添加

9、物时，应使用专为于微生物研究或制药的添加物时，应使用专为此目的设计制造的此目的设计制造的ii级生物安全柜级生物安全柜 级生物安全柜为级生物安全柜为临床生物防护中应用最普遍临床生物防护中应用最普遍的一类生物的一类生物安全柜安全柜临临床中床中处理高浓度或大容量感染性材料处理高浓度或大容量感染性材料时，以时，以级生物安级生物安全柜应用最多全柜应用最多 v级生物安全柜至少需装置一个级生物安全柜至少需装置一个hepahepa空气过滤器对外空气过滤器对外排气体进行净化，排气体进行净化，工作空间为经工作空间为经hepahepa过滤器净化的无过滤器净化的无涡流的单向流垂直空气涡流的单向流垂直空气v工作时正面玻

10、璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下工作时正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口部为操作窗口v由于外排风机将安全柜内空气不断地向外抽吸，使由于外排风机将安全柜内空气不断地向外抽吸，使柜柜内保持负压状态内保持负压状态，故操作窗口处虽然处于开放状态，故操作窗口处虽然处于开放状态，外部空气只可能经操作窗口被吸入，而柜内的空气不外部空气只可能经操作窗口被吸入，而柜内的空气不可能由操作窗口逸出，避免了气溶胶污染，保护了操可能由操作窗口逸出，避免了气溶胶污染，保护了操作人员的安全作人员的安全 v操作窗口操作窗口内侧垂直气流和外部吸入气流交汇点的平衡内侧垂直气流和外部吸入气流交汇点的平衡是生物安

11、全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强，是生物安全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强，此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染操作平台；若垂直气流过强，则有可能使柜内含有微操作平台；若垂直气流过强，则有可能使柜内含有微生物的空气逸出生物的空气逸出v级生物安全柜分为级生物安全柜分为a1 、a2（原（原b3） 、b1、b2四四个类型个类型级生物安全柜级生物安全柜-a1型生物安全柜型生物安全柜a1型生物安全柜型生物安全柜结构示意图结构示意图a1型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速（计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸

12、入口风速（计算或测量值）为或测量值）为0.38m/s(75ft/min)v由静压箱送出的，经由静压箱送出的，经hepa过滤器过滤的垂直气流是过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分（即垂直气流和吸入气流混合后的一部分（即柜内柜内70%气气体通过体通过hepa过滤器再循环至工作区，过滤器再循环至工作区，30%的气体通的气体通过排气口过排气口hepa过滤器过滤排除过滤器过滤排除） v允许经排出口允许经排出口hepa过滤器过滤后的气流返回实验室过滤器过滤后的气流返回实验室v允许有正压的污染风道和静压箱允许有正压的污染风道和静压箱 级生物安全柜级生物安全柜- a2型生物安全柜型生物安全柜

13、级级a2型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图a2型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速（计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速（计算或测量值）为或测量值）为0.5m/s（100ft/min） v经经hepa过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分（即垂直气流和吸入气流混合后的一部分（即柜内柜内30%气气体通过排气口体通过排气口hepa过滤器排除，过滤器排除，70%的气体通过供的气体通过供气口气口hepa过滤器再循环至工作区过滤器再循环至工作区）v必须经必须经hepa过滤器过滤后，所有废

14、气才能排到室外，过滤器过滤后，所有废气才能排到室外，但但废气不可再进入安全柜循环或返回实验室废气不可再进入安全柜循环或返回实验室v所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围压的风道和静压箱包围 级生物安全柜级生物安全柜- b1型生物安全柜型生物安全柜当使用微量挥发性有毒化学当使用微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素用于物质和痕量放射性核素用于微生物学研究时，可采用微生物学研究时，可采用b1b1型生物安全柜，但是对这些型生物安全柜，但是对这些化学物质和放射性核素的处化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区理应在安全柜

15、的直接排风区内进行内进行级级b1型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图b1型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速（计算或测量值）为（计算或测量值）为0.5m/s（100ft/min） v经经hepa过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成（即分是由未污染的循环吸入气流组成（即柜内柜内70%气体通过排气口气体通过排气口hepa过滤器排除，过滤器排除，30%的气体通过供气口的气体通过供气口hepa过滤器再循环至过滤器再循环至工作区工作区） v经经hepa过滤器过滤后的大部

16、分污染的垂直气过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流，通过专用风道过滤后排入大气流，通过专用风道过滤后排入大气v所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压，所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压，或被负压的风道和静压箱包围或被负压的风道和静压箱包围 级级b2型生物安全柜（也称为型生物安全柜（也称为“全排全排”型）型） 级级b2型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合级级b2型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入

17、口风速（计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速（计算或测量值）为或测量值）为0.5m/s（100ft/min） v经经hepa过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的（即：空气送入的（即：安全柜中排出的气体不进入垂直气安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程流的循环过程） v所有的吸入气流和垂直气流经所有的吸入气流和垂直气流经hepa过滤器过滤后排过滤器过滤后排入大气，入大气，不再进入安全柜循环或返回实验室不再进入安全柜循环或返回实验室v所有污染的风道和静压箱应保持负压，或是被直接排所有污染的风道和静压箱应保持负压，或是被直接排风的风道和静

18、压箱包围风的风道和静压箱包围 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构完全密闭、不漏气结构的通的通风安全柜风安全柜v工作空间内为经工作空间内为经hepa过滤器净化的无涡流的过滤器净化的无涡流的单向流空气单向流空气v安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行的接的橡皮手套进行的级生物安全柜级生物安全柜v安全柜应维持至少安全柜应维持至少120pa的负压，方可确保人的负压，方可确保人体与柜内物品完全隔绝体与柜内物品完全隔绝v进入气流经

19、数个进入气流经数个hepa过滤器过滤后送入安全过滤器过滤后送入安全柜，排出气流应经双层柜，排出气流应经双层hepa过滤器过滤或通过滤器过滤或通过过hepa过滤器过滤和焚烧来处理过滤器过滤和焚烧来处理v级生物安全柜适用于生物危险度等级为级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和和4的媒质的操作的媒质的操作 ( (三三).).生物安全柜的应用生物安全柜的应用 ( (生物安全实验室选用生物安全柜的原则生物安全实验室选用生物安全柜的原则)实验室级实验室级别别生物安全柜选用原则生物安全柜选用原则一级一级一般一般无须使用无须使用生物安全柜，或使用生物安全柜，或使用级级生物安全柜生物安全柜二级二级当可能

20、产生微生物气溶胶或出现溅出的操作时，可使当可能产生微生物气溶胶或出现溅出的操作时，可使用用i级级生物安全柜；当处理感染性材料时，应使用部分生物安全柜；当处理感染性材料时，应使用部分或全部排风的或全部排风的级级生物安全柜；若涉及处理化学致癌生物安全柜；若涉及处理化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒，则只能使用剂、放射性物质和挥发性溶媒，则只能使用-b级全级全排风排风(b2型型)生物安全柜。生物安全柜。三级三级应使用应使用ii级或级或级级生物安全柜；所有涉及感染材料的生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，应使用操作，应使用全全排风型排风型-b级级(b2型型)或或级级生物安全生物安全柜。柜。四级四级应使

21、用应使用级级全排风生物安全柜。当人员穿着正压防护全排风生物安全柜。当人员穿着正压防护服时，可使用服时，可使用-b-b级级生物安全柜。生物安全柜。 小小 结结v生物安全柜生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置安全装置v 其其工作原理工作原理是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经hepa过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品过滤器过滤

22、后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过过滤器过滤后再排放到被污染；柜内的空气也需经过过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境大气中，以保护环境 小小 结结v目前世界上生物安全柜领域最重要的标目前世界上生物安全柜领域最重要的标准是准是欧洲欧洲en12469标准标准和和美国美国nsf49标准标准。根据防护程度的不同，通常将生。根据防护程度的不同，通常将生物安全柜分为物安全柜分为、级级 小小 结结v级生物安全柜级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜，适用于对处理样品安全性无要求且生物危品安全的通风安全柜，适用

23、于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为险度等级为1、2、3的媒质的操作的媒质的操作v级生物安全柜级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜，柜内保持负压状态，适用于生物危险度等级为全的通风安全柜，柜内保持负压状态，适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作的媒质的操作v级生物安全柜级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜，适用于是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜，适用于生物危险度等级为生物危险度等级为1、2、3和和4的媒质的操作的媒质的操作 小小 结结v级生物安全柜为级生物安全柜为临床生物防护中应用临床生物防护中应

24、用最普遍最普遍的一类生物安全柜的一类生物安全柜v临床中临床中处理高浓度或大容量感染性材料处理高浓度或大容量感染性材料时，以时，以级生物安全柜应用最多级生物安全柜应用最多v级生物安全柜划分为级生物安全柜划分为a1 、a2 、b1、b2四个类型四个类型 ，每一类型的性能指标不同，每一类型的性能指标不同（三）实验室生物安全防护水平（三）实验室生物安全防护水平危险危险度度安全安全水平水平实验室类型实验室类型实验操作实验操作安全设施安全设施4级级bsl4最高防护（最高防护（p4）实验室危险病实验室危险病原体研究原体研究bsl3 +气锁气锁入口、出口淋入口、出口淋浴浴+污染品特污染品特殊处理殊处理iii级

25、或级或ii级生物安全柜级生物安全柜+正正压服，双开门高压灭菌锅压服，双开门高压灭菌锅（穿过墙壁、墙体）、经过（穿过墙壁、墙体）、经过滤空气，人员安全监控滤空气，人员安全监控3级级bsl3防护（防护（p3）实）实验室专门特殊验室专门特殊的诊断研究的诊断研究bsl2+特殊防特殊防护服护服+准入制准入制度度+定向气流定向气流生物安全柜：密闭消毒；通生物安全柜：密闭消毒；通风系统；密闭消毒；通风系风系统；密闭消毒；通风系统；双门入口；人员安全监统；双门入口；人员安全监控。控。2级级bsl2基础（基础（p2）实）实验室初级卫生验室初级卫生服务，诊断研服务，诊断研究究微生物操作规微生物操作规范（范（gmt

26、）、）、防护服、生物防护服、生物危险标志危险标志开放实验台；生物安全柜；开放实验台；生物安全柜；（bsc）防护可能产生的气防护可能产生的气溶胶溶胶；现场高压灭菌锅；建；现场高压灭菌锅；建议向内气流通风系统议向内气流通风系统（hepa过滤排风）。过滤排风）。1级级bsl1基础（基础（p1）实）实验室基础教学、验室基础教学、研究研究gmt开放实验台；不需要安全设开放实验台；不需要安全设施。施。n基础实验室：一级生物安全防护水平（基础实验室：一级生物安全防护水平（bsl1）n实验室实例：基础教学实验室n微生物实例：枯草杆菌、大肠埃希氏杆菌r12n无须特殊选址，普通物即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物

27、入口的设计。n每个实验室应设有洗手池，宜设置靠近出口处n在实验室门口处应设挂衣装置，个人便 装应与实验室工作服分开设置n实验室墙壁、天花板和地面应平整，易洁净，不渗水，耐化学品和消毒水的腐蚀，地面应防滑，不得铺设地毯。n实验台面应防水、n基础实验室：二级生物安全水平（基础实验室：二级生物安全水平（bsl2）n实验室实例：初级卫生服务；诊断、研究、诊断和卫生保健实验室（以公共卫生、临床或医院为基础的）必须设计成二级或以上生物安全水平。n微生物实例：伤寒沙门氏菌、乙型肝炎病毒、结核分支杆菌、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。n开放实验室，有洗手池（靠近出口）n在生物安全柜中进行可能发生气溶胶颗粒操作程序

28、。n配有高压灭菌设备n必要时配备个人防护的机械密闭设备。n门可保持关闭，并贴上适当的危险标志。n有可靠稳定的应急供电系统。防护实验室：三级生物安全水平（bsl3）n实验室实例：专门特殊诊断，研究实验室，密闭型。实验室实例：专门特殊诊断，研究实验室，密闭型。n微生物实例：布鲁氏菌属、拉沙热病毒、荚膜组织胞微生物实例：布鲁氏菌属、拉沙热病毒、荚膜组织胞浆菌。浆菌。n选址：应在建筑物中自成隔离区（如出入控制），或选址：应在建筑物中自成隔离区（如出入控制），或为独立建筑物。为独立建筑物。n在在bsl2基础上增加特殊防护服，准入剂，定向气流。基础上增加特殊防护服，准入剂，定向气流。n配备配备ii级或级或

29、iii级生物安全柜，形成向内气流而且涉及级生物安全柜，形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜内进行。感染性材料的全部工作应在生物安全柜内进行。n生物安全柜旋转在远离污染区入口和频繁走动的位置。生物安全柜旋转在远离污染区入口和频繁走动的位置。n应有非手控水槽。应有非手控水槽。n实验室与公共通道分开，并通过缓冲间（双门入口或实验室与公共通道分开，并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。n处理废弃物前，实验室内先行高压灭菌，以清除污染。处理废弃物前，实验室内先行高压灭菌，以清除污染。最高防护实验室：四级生物安全水

30、平（bsl4）n危险病原体单位，高度密闭型。危险病原体单位，高度密闭型。n病原体实例：埃波拉病毒、口蹄疫病毒、病原体实例：埃波拉病毒、口蹄疫病毒、sars病毒。病毒。n选址：实验室应建造在独立物内或建筑物中独选址：实验室应建造在独立物内或建筑物中独立的完全隔离区域内，该建筑物应远离城区。立的完全隔离区域内，该建筑物应远离城区。n配备配备ii级或级或iii级生物安全柜、正压服级生物安全柜、正压服n形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜内进行。应在生物安全柜内进行。n处理废弃物前，实验室内先行高压灭菌以清除处理废弃物前，实验室内先行高压灭菌以

31、清除污染。污染。n应有非手控的水槽。应有非手控的水槽。二、超净工作台 超净工作台与生物安全柜无论是在工作原理超净工作台与生物安全柜无论是在工作原理上还是在实际的用途方面都有本质的区别，两种上还是在实际的用途方面都有本质的区别，两种设备工作时的气流模式截然不同，超净工作台的设备工作时的气流模式截然不同，超净工作台的气流是由外部径气流是由外部径hepa过滤后进入操作区，通过操过滤后进入操作区，通过操作区后由超净工作台前侧开口区流向操作者一侧作区后由超净工作台前侧开口区流向操作者一侧进入实验室。进入实验室。 生物安全柜除了能保护实验材料免受污染外，生物安全柜除了能保护实验材料免受污染外，还可以保护工

32、作人员及环境；而超净工作台只能还可以保护工作人员及环境；而超净工作台只能保护实验材料，不能保护人员及环境。保护实验材料，不能保护人员及环境。 超净工作台只适于无毒、无味、无刺激性挥超净工作台只适于无毒、无味、无刺激性挥发性气体以及无感染的实验材料操作。如微生物发性气体以及无感染的实验材料操作。如微生物倒培养基、分装试剂等。倒培养基、分装试剂等。三、通风柜 实验室特别在操作时往往会产生各种有害气体、臭气、湿气以及易燃、易爆、腐蚀性物质，为了防止污染物质向实验室扩散，保护工作人员安全在污染源附近要使用排风设备。通风柜可起到后备安全保障作用。四、消毒设施及用品 临床实验室生物安全防护工作中常用 的消

33、毒方法有三种： 化学消毒 高压消毒 焚烧可根据具体情况选 用不同的消毒方式（一）化学消毒 许多化学品可以用作消毒剂，在使用与储存时要特别在使用与储存时要特别注意：注意：1、化学杀菌剂的有效期：许多化学品在高温时其杀菌效果又快又好，但也要看到另一面好较高的温度能加速其挥发和降解而失效。2、许多化学杀菌剂对人和环境有害：所以一定要严格按厂商的说明小心进行选择、储存、操作、使用和废弃。操作时做好个人防护。3、实验室应提供消毒剂的配制方法，明确有效浓度、配制日期、配制尝试及有效期，相关人员均应掌握（采用操作卡）。4、配制、使用均应有记录。（二）高压消毒1、高压灭菌器的种类：、高压灭菌器的种类：（1）重

34、力置换式（“下排气式”）高压灭菌器蒸汽在压力作用下进入灭菌器，由上而下转换较重的空气并通过灭菌器的排气阀（装有hepa过滤器）排出。（2）预真空式高压灭菌器蒸汽进入前使空气从灭菌器通过装有hepa过滤器的排气阀排出。灭菌结束时，蒸汽自动排出。其特点：此高压灭菌器可在134下进行，灭菌周可缩短至3分钟。对于多孔性物品的灭菌很理想。不能用于液体的灭菌（要抽真空）（3）燃料加热压力锅式高压灭菌器：）燃料加热压力锅式高压灭菌器： 把要消毒灭菌的物品装载在顶部，通过燃气、电力或其他燃料来加热。通过加热窗口询问的水来产生蒸汽，由下而上转换空气并经排气孔排出。当所有的空气排出后，关闭排气孔的阀门，缓慢加热使

35、压力和温度上升到安全阀预置的水平。此时记为开始灭菌的时间。灭菌结束后停止加热，让温度下降到80 以下再打盖子。2、高压灭菌器使用注意事项、高压灭菌器使用注意事项（1）人员素质 应由受过培训的人员负责操作与日常维护。（2）预防性的维护：应包括由有资历人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。（3）应使用饱和蒸汽，其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品。（4）灭菌柜腔装载要松散，以便蒸汽可以均匀作用于被消毒物品，确保灭菌的效果。 （ 5）互锁安全装置一定要（因当灭菌器内部加压时，其）互锁安全装置一定要（因当灭菌器内部加压时，其可防止门被打开。），如果没有，必须关闭主要蒸汽可防止门被打开。

36、），如果没有，必须关闭主要蒸汽阀并待温度降到阀并待温度降到80 以下再打开。以下再打开。（6）当高压灭菌液体时应采用慢排式设置。（如插排气）当高压灭菌液体时应采用慢排式设置。（如插排气针等）。针等）。（7）操作者在打开高压灭菌器门时，即使温度下降到）操作者在打开高压灭菌器门时，即使温度下降到80 以下仍然要戴手套和面罩来进行防护。以下仍然要戴手套和面罩来进行防护。（8）灭菌效果的常规监测，生物指示剂或热电偶计应置）灭菌效果的常规监测，生物指示剂或热电偶计应置于每件高压灭菌物品的中心。于每件高压灭菌物品的中心。“最大最大”装载时，最好装载时，最好用热电偶计或记录仪进行定时监测，以确定灭菌程序用热

37、电偶计或记录仪进行定时监测，以确定灭菌程序是否恰当。是否恰当。（9）灭菌器的排水过滤器应每天拆下清洗；应保证安全）灭菌器的排水过滤器应每天拆下清洗；应保证安全阀不被堵塞。阀不被堵塞。（10）高压灭菌操作，效果的监测应及时观察并记录、）高压灭菌操作，效果的监测应及时观察并记录、妥善保存。妥善保存。（三）焚烧 是医疗废弃物消毒的终末环节。一般由其他部门完成。对于事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物，焚烧是一种有效方法。 理想的焚烧炉是：一级焚烧室的温度至少达800，二级焚烧室温度至少应达到1000 。 应提醒：焚烧炉的操作是否有效主要取决于对需要处理的废弃物中物品的正确混合。五

38、、安全防护用具 安全防护用具是避免操作人员暴露于气溶胶、喷溅物以及意外接种等危险的一个屏障。可根据工作的性质来选择。（一）实验服（一）实验服 实验服包括一般操作服即工作服、隔离衣、连体衣的防护效果较一般操作服好，因此更适用于在微生物学实验室以及生物安全柜中的操作。需进一步防护时应在实验服或隔离衣外面穿上围裙。注意这些防护服、裙不能穿离实验室区域。（二）护目镜和面罩（二）护目镜和面罩（三）手套（三）手套1、一次性手术用手套（用于实验室一般操作和处理感染性物质、血液、体液时）。2、替代加粉乳胶手套（用于可发生皮炎及速发型超敏反应等变态反应者）。3、不锈钢网孔手套（在进行尸体解剖等可能接触尖锐器械情况时）。（四）鞋（四）鞋 应防滑，从事可能出现液体材料漏出的工作应穿防水鞋。进入特殊区域（需防静电）或sbl3和sbl4实验室要求使用专用鞋。（一次性或橡胶鞋）第三节 安全操作规范n一、安全管理制度一、安全管理制度1.首先明确安全管理的目标。2、明确安全管理的范围及内容。3、制定标准操作程序。4