多种方法校准血液分析仪结果比较与分析

1、.多种方法校准血液分析仪结果比较与分析【摘要】目的探讨血液分析仪校准的正确方法。方法分别用配套校准物、非配套校准物和质控物在4台不同类型的血液分析仪上进行仪器校准后，再比较新鲜血用各仪器测定全血细胞计数结果的可比性和偏差。结果用配套校准物校准的3台仪器测定新鲜血的全血细胞计数结果非常接近，无配套校准物的一台仪器测定新鲜血血小板时结果明显偏低。用非配套校准物或质控物校准仪器后，新鲜血的白细胞、血小板和血细胞比容的偏差明显增大。结论血液分析仪的校准应使用配套的校准物或可靠定值的新鲜血。为了了解用不同方法校准血液分析仪后新鲜血在不同仪器上测定结果的差别，探讨血液分析仪校准的正确方法，我们用配套校准物

2、、非配套校准物和质控物分别对仪器进行校准后比较新鲜血在不同血液分析仪上测定结果的差别。材料和方法一、材料1.仪器及试剂：Sysmex F-820血液分析仪及进口配套试剂；Abbott CD-3500血液分析仪及进口配套试剂；Coulter JT血液分析仪及进口配套试剂；MEK-6318血液分析仪及进口配套试剂。2.校准物及质控物：Sysmex F-820血液分析仪的配套校准物SCS-1000，日本Sysmex公司生产，批号90820525；Abbott CD-3500血液分析仪的配套校准物CELL-DYN 3000系列校准物，美国Abbott公司生产，批号CD3054；Coulter JT血液

3、分析仪的配套校准物S-CAL，美国Coulter公司生产，批号5736；MEK-6318血液分析仪配套质控物，日本光电公司生产，批号BO29W；JT血液分析仪的配套4C质控物，美国Coulter公司生产，批号0075900。3. EDTA-K3真空抗凝管，美国BD公司生产，批号8E832。二、方法1.用1份正常人依地酸(EDTA)抗凝的新鲜血在各台仪器上连续测定20次，分别计算血红蛋白(Hb)、RBC、WBC、血小板(PLT)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）和平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）8个参数20次重复测定结果的变异系数。2.分别用配套

4、的校准物对F-820、JT和CD-3500仪器进行校准，用MEK-6318仪器配套的质控物对该仪器进行校准(MEK-6318仪器无配套校准物)，按厂家规定用其配套质控物进行仪器校准。3.取5份正常人EDTA抗凝的新鲜血，分别在校准后的各台仪器上进行测定，每份标本测定4次，计算出各台仪器5份标本20次测定结果的均值和标准差。以F-820、JT和CD-3500 3台仪器(使用配套校准物的仪器)测定结果的均值为靶值，计算各仪器测定结果与靶值的偏差。4.用S-Cal校准物分别对上述各台仪器进行校准，计算出各台仪器5份标本20次测定结果的均值。以JT仪器测定结果的均值为靶值，计算其他3台仪器测定结果与靶

5、值的偏差。5.用SCS-1000校准物分别对上述各台仪器进行校准，计算出各台仪器5份标本20次测定结果的均值。以F-820仪器测定结果的均值为靶值，计算其他3台仪器测定结果与靶值的偏差。6.用4C质控物分别对上述各台仪器进行校准，计算出各台仪器5份标本20次测定结果的均值。以JT仪器测定结果的均值为靶值，计算其他3台仪器测定结果与靶值的偏差。结果对测定结果进行比较时，我们用A、B、C、D分别代表所用的4种仪器。一、各仪器测定结果的重复性比较结果见表1。 表1各仪器重复测定结果的变异系数（%）仪器WBC RBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA1.61.21.11.20.30.70.62.7

6、B2.51.00.81.10.51.21.22.5C1.60.70.61.20.80.71.13.3D0.90.90.50.90.31.21.21.9二、各仪器测定结果的可比性1.用配套校准物校准后(D仪器除外)，5份不同含量新鲜血测定结果的均值及标准差见表2。 表25份不同含量的正常新鲜血测定结果（±S）仪器WBC (×109/L)RBC (×1012/L) Hb (g/L) HCT (%)A 6.0±1.4 4.6±0.4 144.1±10.9 40.7±3.2B 6.2±1.4 4.6±0.5 14

7、0.2±11.8 40.2±3.6C 6.3±1.6 4.5±0.5 138.4±12.2 41.5±3.7D 6.2±1.6 4.5±0.5 138.3±11.8 41.6±3.7仪器MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)A89.0±3.031.4±1.235.3±0.4259.1±86.6B87.8±3.130.6±1.334.9±0.7251.4±74.2C93.3

8、77;3.331.0±1.433.3±0.5258.2±91.6D92.1±3.431.0±1.433.3±0.5217.2±75.62.用配套校准物进行校准后(D仪器除外)，各仪器新鲜血测定结果与A、B、C 3台仪器测定均值的偏差见表3。 表3用配套校准物校准后的偏差（%）仪器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA-2.50.82.3-0.3-1.11.32.31.2B0.21.0-0.5-1.5-2.5-1.31.2-2.0C2.3-1.8-1.91.73.6-0.03-3.50.8D-0.3-0.3-1.9

9、2.02.30.1-3.5-15.2三、用非配套校准物或质控物校准仪器后，各项目测定结果的偏差比较1.用S-CAL校准非配套仪器后，3台仪器新鲜血测定结果与JT仪器测定值的偏差见表4。表4用S-CAL校准后的偏差（%）仪器WBCRBCHbHCTMCVPLTA1.41.101.90.9-15.1B56.30.90-4.1-5.3-15.9C-2.40.4-0.7-4.3-4.6-20.92.用SCS-1000校准非配套仪器后，3台仪器新鲜血测定结果与F-820仪器测定值的偏差见表5。表5用SCS-1000校准后的偏差（%）仪器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA-7.9-1.5-2

10、.8-12.3-3.5-1.02.8-7.7B-5.1-1.1-2.8-5.93.3-1.9-4.510.4C-6.6-2.0-2.8-13.5-4.50.34.0-13.13.用4C质控物校准仪器后，新鲜血测定结果与JT仪器测定值的偏差见表6。表6用4C质控物校准后的偏差（%）仪器WBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCPLTA3.90.90.71.20.3-0.6-1.2-7.9B56.13.01.5-4.7-7.1-1.36.2-6.0C-4.9-0.9-0.7-6.6-5.51.35.9-17.9四、分别用配套校准物和质控物校准仪器后的结果比较以S-CAL校准仪器后JT仪器测定新鲜血

11、结果的均值为靶值，计算用4C质控物校准JT仪器后新鲜血测定结果与靶值的偏差，各测定项目的偏差为WBC -3.8%，RBC -1.3%，Hb -1.4%，HCT1.7%，MCV 2.8%，MCH 0，MCHC -2.7%，PLT 2.3%。讨论血细胞计数自动化程度的不断提高为临床提供了更多更可靠的实验室指标，也大大提高了工作效率，但一部分实验室在使用血液分析仪时仍存在一些问题，影响了测定结果的准确性。在开展全国血液学室间质量评价活动的过程中，我们了解到血液分析仪校准方面存在的问题较为突出1，主要表现在一些实验室未用任何方式校准过仪器或使用非配套的校准物、质控物校准仪器，一些仪器本身就没有配套的校

12、准物致使使用者不知用何种方法校准仪器，为了说明用不同方法校准仪器后新鲜血测定结果的差别，与同道们共同探讨血液分析仪校准的正确方法，我们进行了本次实验。表1的数据表明，本次实验所用的4台仪器测定新鲜血结果的重复性良好，具备了进行仪器校准的前提条件。在比较各仪器测定结果的可比性时，表2和表3的数据表明，使用配套校准物进行校准的3台仪器，测定新鲜血8个参数的结果非常接近，而无配套校准物的1台仪器，在测定血小板时结果明显偏低。用Coulter配套校准物校准其他3台仪器时，有1台仪器的WBC测定结果急剧增大，偏差达56.3%，3台仪器PLT测定结果的偏差均有明显增大。用Sysmex仪器的配套校准物校准其

13、他3台仪器时，HCT、WBC和PLT测定结果的偏差均有明显增大，其中以HCT测定结果的偏差增大最为明显。用Coulter 4C质控物校准除JT以外的其他3台仪器时，其中1台仪器的WBC测定结果的偏差达56.1%，PLT和HCT测定结果的偏差也有明显增大。JT仪器用4C质控物校准后的新鲜血测定结果与配套校准物校准后的测定结果比较存在一定的差别，但偏差在可接受的范围内。可见在使用配套试剂和开展室内质控的前提下，用配套校准物校准仪器能保证新鲜血测定结果的可靠性。用非配套的校准物或质控物进行校准时，新鲜血测定结果的偏差增大，主要表现在WBC、PLT和HCT参数的偏差增大，不同的校准物导致不同仪器和参数

14、偏差增大的程度不同，这主要是由于仪器的测定原理与校准物的特性不匹配造成的。故在校准血液分析仪时，我们建议有条件的实验室，用仪器生产厂家推荐使用的配套校准物进行仪器校准，或取新鲜血直接用参考方法即氰化高铁Hb分光光度法，校准血红蛋白参数2，用微量压积离心法进行压积的校准3。对于使用无配套校准物仪器的实验室，可取新鲜血用经配套校准物校准后的仪器（最好是使用配套试剂，正确开展室内质控的仪器）定值后，将定值的新鲜血作为校准物进行仪器校准。国际公认的质量较好的仪器生产厂家提供的质控物有一个相对可靠的定值范围，但质控物与校准物仍是有差别的，校准物的特性更接近新鲜血，且配套系列的不同型号仪器所用的靶值是不一

15、定相同的。用Coulter 4C质控物或国产的所谓定值质控物(厂家提供一种靶值用于各种仪器的校准)校准各种不同系列不同型号仪器的校准方法是不正确的。我们相信随着各实验室管理和操作者认识水平的不断提高，血液分析仪测定结果的可比性和可靠性将得到较大提高。参考文献1.Mingting PENG， Xiaolin GU， Wei WANG， et al. External quality assessment survey for hematological laboratories in china. Sysmex Journal International， 1998，8: 79-81.2.ICSH. Recommendations for reference method for haemoglobinometry in human blood (ICSH standard 1995) and