亲子鉴定技术标准和质量控制探讨

1、    亲子鉴定技术标准和质量控制探讨    许玲利 张静 杜祎铭 王若楠 郑伟森摘要：亲子鉴定不但用于各种刑事案件，越来越多的民事案件也需要亲子鉴定技术来解决。现代的亲子鉴定主要经历了三个阶段：第一阶段是采用血型测试;第二阶段是20世纪80年代开创的染色体多态性鉴定技术;第三阶段则是目前利用dna遗传标记来进行的dna分型鉴定技术dna分型技术作为亲子鉴定的主要方法，对鉴定工作具有重大意义。目前用于亲子鉴定的dna遗传标记，主要包括常染色体str、x染色体str、y染色体str和线粒体str等。本文主要讨论dna遗传标记及其在亲子鉴定中的应用。关键词：

2、亲子鉴定;dna遗传标记;strr817.9 a 1673-9026（2021）02-203-02亲子鉴定paternity testing，是指用医学及人类学等学科的理论和技术来判断有争议的父母与子女，特别是父子之间是否存在亲生血缘关系，因其常与财产继承权或子女抚养责任有关故称为亲子鉴定。目前，亲子鉴定鉴定结论在审判实践中得到越来越广泛的应用，主要有夫妻在子女血缘方面的疑虑、非婚生子女生父生母认定、离婚引发的子女抚养纠纷、违反计划生育政策超生及婚外超生子女认定、认领被解救的拐卖儿童、新的户籍登记、出境定居、涉外移民等等。1.dna逮传标记常用的dna遗传标记有rflp、str以及s

3、np。str基因座的pcr分型是国内外法医个人识别和亲子鉴定最主要的技术。欧盟法医dna分型标准化委员会认为，虽然新技术与新遗传标记不断涌现，但在今后相当长时间内，str将仍然是最主要的常染色体遗传标记。1.1常染色体一str孟德尔遗传的分离律是判定亲生关系的理论依据。按照这一规律，在配子细胞形成时，成对的等位基因彼此分离，分别进入各自的配子细胞。精、卵细胞受精形成子代，孩子的两个基因组一个来自母亲，一个来自父亲;因此同对的等位基因也就是一个来自母亲，一个来自父亲。鉴定结果如果符合该规律，则不排除亲生关系，若不符合，则排除亲生关系（变异情况除外）。孩子的每对同源染色体都是一条来自父亲，一条来自

4、母亲。因此，在生母确定的情况下，从母、子基因型的对比中，可以确定孩子基因中可能来自父亲的基因。然后观察假设父亲的基因型，如果不具有生父基因，则可排除假设父与孩子的亲生关系。若假设父也具有生父基因，结果就不能排除假设父的亲生关系。1.1.1常用的astr遗传标记和试剂盒亲子鉴定中常用的常染色体str试剂盒有powerplextm16，sinofiler，identifilertm，goldeneyetm20a。其中，goideneyetm20a采用了19个str基因座和1个性别基因座，包含了目前国内外各个生产商所采用的全部基因座。在codl813个核心基因座fvwa、d21s11，d18s51、

5、d5s818、d78820、d138317，d168539、fga、d8s1179、d3s1358、csfipo、th01、tpox）的基础上，增加了基因座pentae、pentad、d2s1338、d198433、d12s391、d6s1043，采用五色荧光标记技术，一次性扩增19个str基因座和一个性别基因座，兼容了当前dna身份鉴定主流试剂盒的全部8tr基因座，提供了历史数据的最大兼容性和最高精确度，提供了更多的信息量，具有更高的非父排除率和个体识别率。1.1.2使用标准在具体的亲子鉴定案件中，突变事件时有发生。甚至存在有2个或3个位点突变的情况，所有目前亲子鉴定对试剂盒的系统效能有了更

6、高的要求。广泛认可的亲子鉴定标准是：在三联体亲子鉴定中，若未发现违反遗传规律的基因座，检测的str基因座需要达到15个，若出现1个违反遗传规律的基因座，检测的str基因座需要增加到19个;在单亲亲子鉴定中，若未发现违反遗传规律的基因座，检测的8tr基因座需要达到18个。1.2x-str1.2.1x-str基本特点1991年，edwards等刚最早报道了humar基因，这是较早应用于法医学中的x-str基因座。在以后的研究中，不断有新的x-str被发现，目前常用于法医学中的有50多个，如humara、humhprt、dxs6799、dx86840、dxs7132、dxs6807等。1.2.2x-

7、str分型系统为了满足法医学检验的要求，国内外陆续建立了许多个由多个str基因座联合使用的x-str复合扩增体系。常用的x-str分型系统为德国qiagen公司生产的investigatorargusx-12体系，包含12个x-str基因座，分别为dxsl0103，dxs8378，dxs7132，dxsl0134，dxsl0101，dxsl0135，dxs7423，dxsl0146，dxsl0079，hprtb和dxsl0148。1.3y染色体stry-str与常染色体str不同，具有以下幾个主要的遗传特性：第一，父系遗传，其群体遗传学标志只能由父亲传给儿子;第二，单倍型遗传，y-strs位于

8、y染色体上，不发生重组，呈连锁单倍型遗传;第三，不同的种族、民族和地域的人群之间，y-strs差异显著;第四，多态信息含量高。1.3.1常用的y-str遗传标记和试剂盒亲子鉴定中常用的y-str检验商用试剂盒有6个。包括promega公司的powerplexy（12）和powerplexy（23）：appliedbios ystems公司的lifetechyfiler：agcu18y;agcuy-plus24：goldeneye20y。powerplexy（12）包含以下dysl9，dys389i，dys389ii，dy$390，dy$391，dy$392，dy$393，dy$385a/b，d

9、y$438，dy$439，dy$437这13个str位点;lifetechyfi1er在powerplexy（12）的基础上添加了dys448，dys456，dys458，dys635，y-gata-h4这5个位点;powerplexy（23）在lifetechyfi1er的基础上再添加dy$576，dy$481，dys549，dys533，dys570，dys643这6个位点;ac-cu18y在lifetechyfiler的基础上再添加了dys447这个位点：agcuy-plus24在agcu18y基础上增加了dys388，dys449，dys444，dys522，dys527a/b这5个位

10、点;goldeneye20y是在agcu18y基础上增加了dys460，dys388这2个位点。2.dna遗传标记在亲子鉴定中的应用亲子鉴定应用可以分为司法和个人亲子鉴定的两种情况。司法鉴定包括遗产纠纷、强奸致孕的强奸犯认定、拐卖儿童的认领、非婚生子女入户、意外事故身份认证和抚养权纠纷等。个人亲子鉴定主要是怀疑子女非亲生，以及少数情况下的失散亲属认亲。2.1常染色体str因为str具有高度多态性、稳定性和杂合性，多个str位点共同分析，可以得到很高的累积个体识别率和非父排除率，通过公式转化，可以将非父排除率转变为父权指数。在不违反孟德尔遗传定律时，累积父权指数>i0000，即可认定亲生关

11、系。常染色体str可以应用于多数的常规三联体（母亲、孩子和争议父亲）、二联体（母子或者父子）案件的检测，也可以辅助祖孙关系和同胞关系认定的检测。2.2x-str通过x-str和常染色体str计算非父排除率的公式的比较，可以发现，在母一女一父三联体案件中，前者优于后者。由于父亲的x染色体只能传给女儿，所以在父女关系鉴定的二联体案件中，x-str是有效的;同时，同一父亲的姐妹（无论同母或者是异母）都拥有相同的父源x染色体。在双亲都缺如的情况下，检测x-8tr，如果两者之间没有相同的等位基因，可以作出兩者“不是同父所生”的结论。由此可知，在同胞或者半同胞关系鉴定中，x-str也有重要作用。x染色体一

12、条来自母亲，一条来自父亲的遗传特性，使得x-str在祖父母一外孙、姑一侄女、姨一外甥和舅一外甥等关系认定中，也发挥了至关重要的作用。2.3y-stry染色体父系遗传的特点，决定了它在亲子鉴定中只能应用于父系关系的鉴定。如父一子、祖一孙、同胞、叔一侄等关系。在这些案件中，y-str主要是作为常染色体str检测的补充手段而存在。根据目前的国际惯例，必须有两种以上独立的遗传标记同时排除才能否定有血缘关系，德国亲子鉴定专家证人协会认为y-str与常染色体的判断标准应该相同，即要3个以上的基因不同刁一能排除亲权。在排除突变的影响下，同一父系所以男性个体的y染色体都是一样的。所以y-str也广泛应用于大家系的鉴定案件中。值得重视的是，y-str在遗传过程中的变异。kayser曾报道，在4999例已通过dna分析证实亲子关系的父子中，发现父子间存在1个y-str分型突变率在o.28%，有两对父子存在2个y-str的变异。3.展望综上所述，亲子鉴定技术的发展可以说是科学的进步，它解决了以往困扰司法鉴定多年的父权问题，为亲子关系的确认提供了科学的方法。但也应该看到，亲子鉴定是一把双刃剑，滥用亲子鉴定也会带来负面影响，使家庭不睦，产生社会不安定因