莪术油注射液静脉滴注用药时的细菌内毒素检查

1、莪术油注射液静脉滴注用药时的细菌内毒素检杳作者：孟丽丽，刘军，叶琳，龚文明，赵珊珊【关键词】莪术油注射液，:,静脉滴注；，细菌内毒素，；, 干扰实验摘要：目的建立莪术油注射液静脉滴注用药时细菌内毒素的检查 方法。方法根据中国药典2005年版ii部收载的细菌内毒素检查法 的要求进行实验。结果莪术油注射液的内毒素限值应定为 4. 38eu・ml-l,该药稀释至 1. 25mg・ml-l 浓度时对细菌 内毒素检查无干扰，用标示灵敏度为05eu・nh-1的卷试剂进 行细菌内毒素检查是有效的。结论卷试剂可用于莪术油注射液静脉滴 注用药时的

2、细菌内毒素检查。关键词：莪术油注射液；静脉滴注；细菌内毒素；干扰实验bacterialendotoxinstestofzedorayturmerico订injectionfori ntravenousinjectionabstract:objecti vetoestabli shatestmethodforbacteri alendotoxinsinzedoaryturmericoi1injectionforintravenousinjectionmethodstheexperimentwasimplementedaccordingtotheloacterialte stendotoxinsi

3、nchinapharmacopoeia(ii , 2005ed)。resultsthedelimitationofbacterialendotoxinsofthismedicaments houldbefi xedlessthan4. 38eu・ml-1. theconcentrati onl. 25m g・ml-lofzedoaryturmericoilinjectionforintravenousinje ctionshouldnotinterferethetest, andbeeffectivethatthebaterial endotoxin

4、scouldbetestedbyamebocytelysatewithaccuracyof0 5eum 1_1oconclusionthebacterialendotoxinstestcanbeusedforzedoaryturme ricoillnjectionozedorayturmericoillnjection:bacterialendotoxinskeywords:intravenousinjectioninterferenceexperiment莪术油注射液(zedorayturmericoillnjection,简称 zto)是从 姜科植物蓬莪术、温郁金、广西莪术中提取的挥发油，

5、其主要成分为 多种倍半砧类，具有多种药理作用及广泛的临床应用，可抑制多种细 菌生长，并对一些病毒有直接灭活作用。本文根据静脉用药时细菌内 毒素总限量來确定zto细菌内毒素限值，建立zto静脉用药时的细菌 内毒索检查方法。1器材1. 1 试药賞试剂（tal）：灵敏度 0. 5eu・ml-l,规格：0. lml/ 支,批号：050515,厦门蛍试剂厂；灵敏度0. 5eu・ml-l,规 格：0. lml/支，批号：050720,湛江安度斯生物有限公司。细菌内毒 素工作标准品:10eu/支,批号:050411,厦门蛍试剂厂。细菌内毒素 检查用水（bet水）：

6、加1/支，批号：050110,厦门蛍试剂厂。zt0： 0. 2g/20ml,批号:051201, 051008, 051123,黑龙江瑞格制药有限公 司。5%葡萄糖注射液：250ml： 12. 5g,批号：051009, 051112, 051118, 四川科伦药业有限公司。1. 2仪器电热恒温水浴箱（江苏沙洲医疗器械厂）；旋涡混合器（上 海沪西分析仪器厂）。实验用玻璃器川i经180°c烘烤2h以上。2方法与结果12. 1样品细菌内毒素理论限值确定2. 1. 1按人用最人剂量确定2参照zt0药品说明书规定的用法 用量，静脉用药时zt0 一次应用最大剂量为400mg&#1253

7、9; (60kg)-l・h-l ,即一次应用最大剂量为 40ml・ (60kg)-l・h-l。根据公式 l =kf・m,其 中k二50eu・ (kg・h)-1,它是细菌内毒素的致热阈;m 为成人每kg体重每h最大剂量；f为安全系数，取值范围310,本 法取6。经计算得细菌内毒素理论限值l'为1.25eu・ml-lo2. 1.2按静脉用药吋内毒素总限量确定按400mg样品即40mlzt0 与250ml输液静滴作为lh最大剂量计算，人每公

8、斤体重每小时接受细 菌内毒素可能达到的理论总量 k '为 2. 91eu・ (kg・h)-l。kz 值小于标准1给定内毒素阈 剂量5. 0eu&#12539： (kg・h)-l,故在静脉用药时应按混合液内 毒素总量"与人用阈剂量k值之间关系,來确定样品的内毒素限值， 即(40ml x l+250ml x 0. 5eu&#12539: ml-1) /60kg・hwk,其 中0. 5eu・ml-l为葡萄糖注射液的细菌内毒素限值，计算得样 品在静脉滴注用药时

9、的细菌内毒素理论限值l w 4. 38eu・ml-lo2. 2样品最大有效稀释倍数的确定市售tal常用灵敏度(入)在 0. 50. 03eu・ml-1 范围内,根据 mvd二入 /l 得 mvd0. 5 为 8 倍, mvd0. 03 为 146 倍,相应 zto 的 c0.5 为 1. 25mg&#12539 ;ml-l, co. 03 为 0. 068mg・ml-lo 实验拟选用 0 5eu・ml-1 的 tal。2. 3tal灵敏度复核实验按中国药典2005年版ii部附录操作, 对标示灵敏度为

10、o. 5eu・ml-l的两批tal进行复核。结果见表 lo表1tal灵敏度复核结果（略）表1结果表明，两批tal灵敏度复核结果入c均在0. 5-2. 0x（即0.251.0eu・ml-l）间，符合规定，可用于实验。2. 4样品干扰预实验以样品（批号：051201）原液为起点，用bet 水等倍稀释成 1 ： 1, 1 ： 2, 1 : 4, 1 : 8 即 10, 5, 2.5, 1. 25mg・ml-l共4种浓度，用其将内毒素工作标准品制成2. 0, 1.0, 0. 5, 0. 25 x 4 个浓度的溶液;用 tal （入二0.

11、 5eu・ml-1, 批号：050515, 050720）按“2, 3”法进行实验。结果见表2。表2样品干扰预实验结果（略）表2结果表明，将样品稀释8倍，浓度为l25mg・ml-1 使用入二0. 5eu・ml-l的tal进行实验无干扰。2. 5样品干扰实验经预试，本品1. 25mg・ml-l对实验无干 扰作用，故以1. 25mg・ml-l样品稀释液进行干扰实验。本实验 采用2个厂家的tal,观察3批样品对实验有无干扰作用。按标准1 规定，用bet水和1.25mg・

12、ml-l的样品稀释液将同一支细菌内 毒素工作标准品分別制成含细菌内毒素2.0, 1.0, 0.5, 0. 25 x 4种浓 度的内毒素溶液，分别用上述两个厂家的tal观察样品在 1. 25mg・ml-l浓度时对实验的干扰情况，每一浓度平行做4管, 同时另取bet水和浓度为1. 25mg・ml-l样品稀释液各做两支阴 性对照。实验结果见表3。表3样品（1. 25mg&#12539：ml-l）干扰实验结果（略）表3结果表明，es, et均在0.5-2. 0x范围内且es与et的比值 在0.5-2. 0范围内，说明3批样品经8倍稀释浓度在 1. 2

13、5mg・ml-l对不同厂家的tal均无于扰作用。2.6模拟样晶静滴状态时的细菌内毒素检查选用标示灵敏度为 0. 5eu・ml-ltal （批 号：050515 ,050720 ）, 取样品1.25mg・ml-l 浓度的稀释液（批号：051201, 051008, 051123）、 5%葡萄糖注射液（批号:051009051112051118）,样品葡萄糖溶液（通 过一次性输液器后的滤液），分别进行内毒素检查，结果均为阴性。3讨论本实验充分考虑了药物在使用过程中内毒索叠加（溶解介质、输 液管道)作用，确定zto在静脉滴注用药吋内毒素限值为 4. 38eu・ml-lo药物能否采用细菌内毒素检查的先决条件是证 明其在满足限度检查要求浓度下对细菌内毒素不产生干扰作用。如果 药品在高浓度对细菌内毒素实验无干扰，则在低浓度时也不会产生干 扰3。实验结果表明，将zto稀释8倍,浓度为1.25mg・ml-l 对进