EP5自动生化分析仪精密度性能的评价

1、自动生化分析仪精密度性能的评价1.仪器熟悉阶段 在评价实验正式启动前，仪器应当在实验室运行一段时间，以便实验者能掌握好仪器的日常使用、维护和保养、样品准备、定标等操作。在本阶段，仪器可以分析质控品、混合血清等适合仪器分析的任何其他样品，但实验者不应当收集精密度评价实验的数据，只需记录仪器在日常工作中发生的问题，包括错误标志、错误修正、校准等。本阶段一般为5天，直到实验者确信可操作仪器为止，也可根据仪器的简单或复杂程度，适当增减。2.文件熟悉阶段 本阶段要求实验者熟悉 EP5-A文件关于临床化学设备精密度评价的内容。为了避免在精密度评价实验过程中遇到不熟悉步骤，实验者必须进行预实验。预实验时，仪

2、器可以分析实验室常规使用的测试样品和质控品，在预实验数据收集完成后，实验者应根据预实验时的日常室内质控结果计算实验控制限；此外，在本阶段结束或即将结束时，实验者还应对仪器进行初步批内精密度评价实验，具体方法是取低值、高值血清各一份，分别测定20次，计算标准差（SD）和变异系数（CV）。实验者应该把预实验得到的实验控制限和初步批内精密度评价实验得到的SD、CV值与仪器生产商提供的预期值进行比较，如果实验控制限或SD、CV值与仪器生产商提供的预期值严重不符，则应联系仪器生产商寻找问题的原因，在解决问题后再开始下一步的实验。 在实验者无操作困难情况下，本阶段至少应持续5个工作日，如有必要，对于复杂仪

3、器可适当延长时间。如果在预实验过程中使用了精密度评价实验样品，且无明确异常情况发生，上述5个工作日（或更长时间）内收集的数据可与评价实验时收集的数据合并使用，但是所有数据应符合质量控制可接受性检查。3.实验评价阶段 总精密度是仪器在一段不确定时间内的变异性，影响仪器总精密度的因素很多，校准物、试剂批号、操作者等都是很重要的影响因素，但是EP5-A文件介绍的精密度评价实验过程中这些因素都是保持恒定的，所以实验者得到的结果并不反映上述因素对仪器总精密度的影响，这一点在解释结果的时候应该说明。 推荐精密度评价实验样品应采用稳定的、以蛋白质为基质、可模拟临床标本特性的产品，必要时可采用稳定的混合冰冻血

4、清。推荐使用两个浓度水平，选择的浓度应尽量跨越仪器可测范围内有意义的部分，如果使用两个以上的浓度水平时，增加的浓度应尽可能地接近实验室使用的医学决定水平。精密度评价实验需要有足够的数据，为了使实验结果能反应仪器的真实精密度，因此本试验至少需要20个可接受的工作日。在每个工作日，实验者应完成以下工作：1）分析2批实验样品，每批间隔时间应该大于2小时，每批实验的实验样品作双份测定，如有1批数据因质控规则或其他原因必须舍弃时，在分析原因并采取相应措施后应增加1批；2）每批实验均应包含日常室内质控品，以判断这批数据或某个工作日的可接受性，并且在不同的批次或不同的工作日，应随机改变实验样品和日常室内质控

5、品的分析顺序；3）可以模拟实际操作，如果条件允许，在每批实验之间可以加入10个甚至更多的病人标本。 正常的质量控制应贯穿整个评价实验，每批实验中至少有一个适当浓度的日常室内质控品，如果是使用两个或两个以上浓度的日常室内质控品时，整个评价实验都应坚持这种质控方法。从文件熟悉阶段开始，实验者就应该开始建立仪器的统计质控图：首先根据最初得到的数据计算中心线、警戒限、失控限，并在质控图上描出所有的质控数据，如果有任何一点失控，应分析原因并重做该批；在每收集5天的数据后，即由所有可接受数据重新计算每个图的中心线、警戒限、失控限，如果原来可接受的结果现在不能被接受，则继续精密度实验直到获得适当的天数。此外

6、，在数据收集过程中，还必须对获得的数据进行离群点的检测，因为实验中收集到的每批数据均是成对的，当某一对数据的差值>5.5倍初步批内精密度实验SD时，此对数据应作废，在查找原因后再重复此批。4.精密度的计算4.1仪器批内精密度的计算计算公式为： I 实验总天数；j 1天内的实验批数（通常为2批）；Xij1第i天第j批重复测定第1次的结果；Xij2第i天第j批重复测定第2次的结果。用此公式需要每天2批测试共4个结果，如果某天只有1批可用，该批就不能用上述公式。4.2仪器总精密度的计算计算仪器总精密度需要先求出批均数标准差（A）和日均数标准差（B）： ； I=实验总天数；第i天第1批的平均值(

7、重复2次的均值)；第i天第2批的平均值(重复2次的均值)；第i天所有结果的均值；所有结果的均值。再计算S2dd和S2rr：；（如为负数则定为0）。仪器总精密度即为：5. 与仪器生产商提供的数据作统计学比较 计算得到的批内精密度值和总精密度值须通过卡方（）检验与仪器生产商提供的数据进行统计学比较，但值得注意的是，评价批内精密度和评价总精密度时的自由度计算公式不一样。批内精密度的自由度（R）与用于计算它的数据对的数目一样，因此它就等于可接受的工作日天数×2；总精密度的自由度（T）要涉及复杂的计算，公式如下：ME=(批内均方)；MR=2A2（批均方）；MD=4B2（日均方）（取与计算值最接

8、近的整数作为总精密度的自由度）在计算出自由度后，再分别计算批内精密度、总精密度评价的检验统计量。批内精密度评价的检验统计量：式中：=仪器生产商提供的批内精密度的平方。总精密度评价的检验统计量：式中：仪器生产商提供的总精密度的平方。计算的检验统计量应当与界限值相比较才能加以判断，如果<0.05（），则P>0.05，即实验得到的批内精密度或总精密度评估值与仪器生产商提供的数据无显著性差异；反之，如果>0.05（），则P<0.05，即实验得到的批内精密度或总精密度评估值与仪器生产商提供的数据有显著性差异，应联系仪器生产商，寻找仪器批内精密度或总精密度不合格的原因。 传统的批内精密度评价方法就是单批测试某样品若干次（一般为20次），通过计算这些数据的CV值间接反映仪器的批内精密度，但是该实验过程中的操作条件与日常工作中的情况有明显差异，因此传统方法得到的CV值不能真实地反映仪器的批内精密度。而对于总精密度，传统方法是选择要评估的临床项目的两个浓度（有医学决定水平的正常和异常值），每天做室内质量控制，然后计算总精密度（通常被误称为日间精密度），这种方法有很严重的缺陷。EP5-A文件推荐总精密度评价方法尽管需要一些繁琐的计算，但是该文件计算出的总精密度合并了批内精密度、批间精密度和日间精密度等组成因素，并