袋栽百倍木耳实验方案

1、利用白酒糟生产食用菌正交试验方案实验目的1、 探索利用白酒糟生产食用菌的高产方法；2、 学习并掌握食用菌生产栽培的基本方法，理论联系实际，提高实验动手操作能力；3、 通过本次实验初步掌握白酒糟生产食用菌的基本操作过程，为以后进一步地研究白酒糟生产食用菌奠定坚实的基础；实验内容1、 白酒糟的预处理；2、 培养料的配制、装袋及灭菌；3、 接种和发菌管理；4、 出菇管理；实验原理一、白酒糟作为食用菌栽培的培养料随着人们生活水平的提高，对食用菌的需求量也日益增加。但近年来由于食用菌栽培原料价格的不断上涨，造成食用菌生产成本大幅度地提高。我们针对四川酒厂多、酿酒工业废料白酒糟也多的特点，进行食用菌栽培的

2、探索，充分而有效地对白酒糟加以综合利用，既降低了食用菌的生产成本，又变废为宝。这一方面是是酒厂综合利用资源，提高经济效益行之有效的方法；另一方面也为食用菌生产者提供了优质廉价的原材料。白酒糟营养丰富，其中含有多种有机化合物、纤维素 、蛋白质、B族维生素和18种氨基酸等，白酒糟中还含有丰富的磷、钾等无机元素及维生素等成分(见表1)。此外，还可能存在由微生物菌体产生的核糖核酸及嘌呤等微量有益成分。但是，白酒糟含水量较高，极易霉变和腐烂，而且白酒糟中含有对食用菌菌丝生长不利得醇类、醛类和有机酸类物质，使用前必须进行预处理。总的来说，酒糟作为食用菌栽培的原材料进行再利用具有很好的开发前景。2、 白背木

3、耳代料栽培一、生物学特性白背木耳属木腐类真菌。耳芽呈杯状，子实体为黄褐色，背面生长白绒毛。成熟后耳片胶质脆嫩，木耳的腹面为紫褐色，采摘晒干后变成黑色，背面绒毛变成纯白色，耳片直径8-13厘米。适宜栽培原料主要有阔叶类杂木屑，棉籽壳、玉米芯、甘蔗渣、稻草、麦麸、米糠等，人工栽培白背木耳，大多采用袋式栽培，即将培养料装在塑料袋中。在发菌期间，适宜菌丝生长的温度是25-28，空气相对湿度为75%左右;在出耳阶段，最合适的温度在l8-22之间，空气相对湿度在百分之八十五至九十之间，这两个时期的最佳原料基质含水量都是60左右。白背木耳是好氧性真菌，所以无论发菌期还是产耳期都应加强通风换气工作。白背木耳的

4、菌丝生长不需要光照，出耳阶段最合适光线强度为40-500勒克斯。三、正交试验设计正交试验设计也称正交设计（orthogonal design)，是用类科学地设计多因素试验的一种方法，它利用一套规格化的正交表（orthogonal table)安排试验，得到的试验结果再用数理统计方法进行处理，使之得出科学结论。正交试验设计的主要步骤包括以下几点：1、 明确试验目的，确定考核指标；试验目的，就是通过正交试验要向解决什么问题。考核指标，就是用什么衡量或考核试验效果的质量指标。试验指标一经确定，就应当把衡量和评定指标的原则、标准，测定试验指标的方法及所用的仪器等确定下来。2、 挑因素，选水平；影响指标

5、者称为因素。因素在试验中变化的各种状态，称为水平。因素的变化引起指标的变化，正交试验法适用于试验中能认为加以控制和调节的因素可控因素。选好的因素、水平通常可列成因素水平表。如表1所示。 3、 选择合适的正交表；总原则：能容纳所以考察因素，又使试验号最好。一般有一些几条规则：（1）、先看水平数；根据水平数选用相应的水平的正交表。（2）、其次看试验要求；如只考虑主效应，则可选择较小的表，如果还需考虑交互效应，那么就要选用较大的表。（3）、再看允许做试验的正交表的次数和有无重点因素要考察。4、 进行表头设计；所谓表头设计，就是将试验因素安排到所选正交表的各列中去的过程。主要有两种情况：（1）、只考虑

6、主效应，不考虑交互效应；（2）、考察交互作用的表头设计。5、 确定试验方案；在表头设计的基础上，将所选正交表中各列的不同数字换成对应因素的相应水平，便形成了试验方案。如表2所示。6、 试验结果分析；凡是用正交表设计的试验，都可用正交表分析试验的结果，正交试验的结果分离，有直观分析和方差分析2种方法。实验器材1. 药品：药品名称数量（类型）药品名称数量（类型）白酒糟25kg（大米型）过磷酸钙2kg阔叶木屑25kg硫酸镁1瓶麸皮15kg磷酸二氢钾1瓶蔗糖1瓶石膏1kg熟石灰（Ca(OH)2)2kg2.仪器：仪器名称数量（类型）仪器名称数量（类型）聚丙烯塑料袋100个（20*40）手提式高压灭菌锅3

7、台套环配套塞子100个精密pH试纸pH范围3.07.0烧杯3个（500mL）恒温恒湿培养箱1台量筒1000mL扎口绳子若干电热干燥箱1台实验步骤一、白酒糟栽培金针菇高产配方筛选试验方案1、白酒糟栽培金针菇高产配方筛选试验的因素水平表根据金针菇栽培的专业知识和相关文献的结论，并根据正交试验的特点，本实验选定了3个因素、每个因素3个水平，采用L9(34)正交试验表，列因素水平如表3所示。表3白酒糟栽培金针菇高产配方筛选试验的因素水平表水平因素新鲜酒糟添加量B木屑添加量/%C麸皮添加量/%15020526030103704015采用L9(34)正交试验表，每个配方用白酒糟补充至100%，其中定量因素

8、为：1%蔗糖、1%过磷酸钙、1%石膏（硫酸钙）、1%熟石灰（Ca(OH)2）、0.1%0.2%磷酸二氢钾、0.030.05%硫酸镁。2、 白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验方案将各考察因素每列中的数字换成相应得水平的实际数值。排成如表4所示。表4白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验方案（正交试验表）试验号因素A新鲜酒糟添加量B木屑添加量/%C麸皮添加量/%12311（10）1（5）212（20）2（10）313（30）3（15）42（水洗后烘干）125223623173（直接晒干）1383219332从而得出试验的9个处理，即：111，122，133，212 ，223 ，231，313，321，

9、332。二、白酒糟的购买及预处理联系酒厂并购买白酒糟，酒糟类型为大米型；白酒糟预处理方法：1、不做任何处理，在新鲜湿酒糟中加入4%左右的石灰粉调节至pH=5.56.0；2、将白酒糟放于桶内，加满自来水浸泡12h，倒去上层清液，将下层的白酒糟摊放在水泥地上除去主要的水份，然后放于烘箱内烘干备用；3、直接将新鲜白酒糟摊放在水泥地上晒干备用；三、金针菇培养料配制、装袋灭菌及接种1、拌料、装袋 根据上述白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验方案准备好相关的培养料，粗略地计算培养料需要的总量（用空袋子装干料并称量记录，推算大概需要多少培养料），按试验配方称取木屑、麸皮、酒糟，并充分搅拌，在其中加入1%蔗糖、

10、1%过磷酸钙、1%石膏（硫酸钙）、1%熟石灰（Ca(OH)2）、0.1%0.2%磷酸二氢钾、0.030.05%硫酸镁（用水拌匀加入），（用4%石灰调pH = 5.56.0），料水比为1 : 1.2，培养料的含水量达65%。装袋时要保证松紧适度，若培养料装的太松，保水性差，培养过程中菌袋变形；太紧则透气性差，菌丝不易蔓延下伸。装袋后特别注意对料袋轻拿轻放，防止沙粒或杂物将袋刺破，引起污染。装完后，分别称量各个袋子的重量，保证每个袋子内的培养料重量一致，套上项圈，把空余部分向下反卷，用尖头木棒向料中打一孔，最后塞上塞子。装袋时注意事项：（1）、拌好的料堆，要边装边翻动，防止时间长水向下渗，使培养料

11、上干下湿；（2）、装好袋后要立即封口，平卧堆放，以防水分蒸发；（3）、当天装好的料袋，要当天灭菌，防止pH下降和杂菌滋生。2、灭菌、接种 塑料袋的体积大，装料多，灭菌时间比瓶子要长些。高压灭菌1.52h，常压灭菌100维持8-10h。无论是高压灭菌或常压灭菌，塑料袋应直立排放于锅内。灭菌完后置于超净工作台内，开启风机降温至室温。接种时，塑料袋口要靠近酒精火焰处，但要注意不能碰到火焰，以免把塑料袋烧熔。接种料要稍多些，一般每袋接3匙的菌种。接种时把少量的菌种接入洞内，大部分菌种分布在培养基表面，有利于整齐出菇。一瓶二级种大约接25-30个栽培袋。4、 发菌管理1、 培养菌丝 菌丝培养温度：24-

12、25，空气相对湿度70%-75%，黑暗条件下培养，要求在菌丝生长过程中经常检查，发现有污染的袋应及时剔除。2、 搔菌金针菇菌丝满带后应立即将袋转入出菇室，把封口物去掉，并将上端空余部分撑直，用搔菌匙将料表面醪菌皮块挖掉，把形成的菌膜划破，在袋口上端盖上报纸或粗布，将水喷洒在纸或布上。搔菌要视袋内菌丝生长的情况而定，菌丝满袋并在表面开始有浅黄色露珠状分泌物时，这时要立即搔菌，增加居室内和氧气接触面积，刺激菌蕾迅速行程。3、 催蕾经搔菌之后，栽培室内的温度要调至8-12，经低温刺激，料表面出现淡黄色露珠，接着幼嫩的菇蕾开始形成，此时要经常喷水，使空气相对湿度提高到85%90%，盖在袋口上的报纸也应

13、用喷雾器喷水，保藏纸表面湿润。催蕾阶段还要加强室内通风管理，增加通风次数和通气时间，每日早、中、晚各通气一次，每次20-30min。4、 抑菌金针菇子实体有易分枝的特征，如让其过多分枝会形成发状菇，影响其商品价值，为防止过多分枝应采取抑菌措施。即在现蕾3-5d后，菌盖仅有半个绿豆大小，菌柄刚伸长1-2cm时，应立即用下列方法进行抑菌。（1）、降低温度：5-8；（2）、降低湿度：停止喷水，使空气相对湿度降至80%以下；（3）、增加通风；（4）、延长光照：用40W日关灯进行光刺激。以上抑制措施维持2-3d，是金针菇正常生长速度放慢，其结果是抑大促小，是小菇追上大菇，达到均匀生长的目的。5、 出菇管理经过23d的抑制过程，恢复正常的出菇管理，环境温度为8-10，空气相对湿度为85%90%，加大通风量，促使其生长。结果讨论及分析1、 菌丝的生长速度在接种后待菌丝开始萌生至袋肩时，划线观察局势生长速度，以菌丝长满菌袋的时间来测定菌丝体的生长速度。2、白酒糟的生物转化率根据白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验方案，待菌丝长满袋子之后转入出菇室进行出菇管理，及时采收各试验号对应的金针菇子实体，并称重，对应地记录到白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验结果表中，表5如图所示。表5白酒糟栽培金针菇高产配方筛选的试验结