3～5细胞融合技术·干细胞工程·克隆技术

1、第三五节 细胞融合技术干细胞工程克隆技术 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体1.1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 原原理理 细胞膜的流动性、细胞细胞膜的流动性、细胞的全能性的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 过过程程植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合 相相关关酶酶融融合合方方法法结结果果意意义义纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶物理法物理法: :离心、电激、振动；离心、电激、

2、振动；化学法化学法: :聚乙二醇等试剂诱导聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导可以用灭活的病毒诱导杂种植株杂种植株杂交细胞杂交细胞克服了远缘杂交的不亲和性克服了远缘杂交的不亲和性, ,获得杂种植株获得杂种植株突破了有性杂交方法的突破了有性杂交方法的局限局限, ,使远缘杂交成为可使远缘杂交成为可能能2.2.单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备(1)(1)制备过程：制备过程：注射特定抗原注射特定抗原的免疫小鼠的免疫小鼠骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B B淋巴细胞淋巴细胞杂交细胞杂交细胞专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性筛选培养筛选培养克隆上述克隆上述杂交细胞杂交细胞专一抗

3、体专一抗体检验阳性检验阳性单克隆抗体单克隆抗体将不同杂交将不同杂交细胞分开细胞分开, ,并克隆专一抗体，并克隆专一抗体，检验阳性细胞检验阳性细胞体外培养体外培养体内培养体内培养从培养液从培养液中提取中提取从小鼠腹水从小鼠腹水中提取中提取(2)(2)关键环节：关键环节：取相应取相应B B淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆抗体。抗体。细胞融合后需经二次筛选：细胞融合后需经二次筛选：第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞(B(B淋巴细淋巴细胞和骨髓瘤细胞胞和骨髓瘤细胞) )和融合的

4、具有同种核的细胞和融合的具有同种核的细胞(BB(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞、瘤瘤融合细胞融合细胞) )都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长。其特点是既能迅都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长。其特点是既能迅速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。第二次：经选择培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细第二次：经选择培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞胞( (很多种杂交瘤细胞很多种杂交瘤细胞) )，需经克隆化培养和抗体检测，经筛选后，需经克隆化培养和抗体检测，经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。【高考警示钟高

5、考警示钟】1.1.植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间质。酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间质。2.2.灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。3.3.植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。的全能性不能表达。 比较三种造血干细胞移植的优点和缺点比较三种造血干细胞移植的优点和缺点优优 点点缺缺 点点骨髓移植骨髓移植外周血干外周血干细胞移植细胞

6、移植是经典的移植方法，效是经典的移植方法，效果可靠果可靠寻找配型相同的骨髓难，寻找配型相同的骨髓难，捐献者和患者都要遭受很捐献者和患者都要遭受很大的痛苦大的痛苦方法比较简单，对供者方法比较简单，对供者安全，影响小，几乎无安全，影响小，几乎无不适反应不适反应外周血干细胞数量采集困外周血干细胞数量采集困难，不能满足移植所需数难，不能满足移植所需数量；收集的外周血干细胞量；收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞；费可能混杂有肿瘤细胞；费用较高用较高优优 点点缺缺 点点脐带血干脐带血干细胞移植细胞移植脐带血资源丰富、采脐带血资源丰富、采集简单；异体间排斥集简单；异体间排斥反应小，再生能力强；反应小，再生

7、能力强；纯度高；配型相合的纯度高；配型相合的要求相对较低，可扩要求相对较低，可扩大供者范围；成功率大供者范围；成功率高高目前不适用于高体重成目前不适用于高体重成人，另外，血小板恢复人，另外，血小板恢复较慢较慢 动物体细胞核移植与克隆动物动物体细胞核移植与克隆动物1.1.原理：动物体细胞核具有全能性原理：动物体细胞核具有全能性2.2.过程过程【高考警示钟高考警示钟】1.1.供体细胞：取优良动物的体细胞培养，一般选用传代供体细胞：取优良动物的体细胞培养，一般选用传代1010代以内代以内的细胞，这样可以保证正常的二倍体核型。的细胞，这样可以保证正常的二倍体核型。2.2.动物体细胞核移植是一种无性繁殖

8、技术，用核移植的方法得到动物体细胞核移植是一种无性繁殖技术，用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。的动物称为克隆动物。 动物细胞融合和单克隆抗体制备动物细胞融合和单克隆抗体制备【典例训练典例训练1 1】有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：融合的简略过程，据图回答相关问题：(1)(1)若若a a

9、、b b分别是基因型为分别是基因型为HhrrHhrr、hhRrhhRr两个烟草品种的花粉，且这两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯合基因两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯合基因( (rrrr或或hhhh) )的作用，在光照强度大于的作用，在光照强度大于800lx800lx时都不能生长。要想从融时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为合细胞的培养液中分离出基因型为HhRrHhRr的杂种细胞，较为简便的的杂种细胞，较为简便的筛选方法是筛选方法是_。(2)(2)若若a a、b b表示两种植物体细胞，则由表示两种植物体细胞，则由d d细

10、胞形成杂种植株的原理细胞形成杂种植株的原理是是_，这种育种方法的优点是，这种育种方法的优点是_。(3)(3)若若a a、b b分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞，则淋巴细胞，则d d细胞特点是细胞特点是_。由由d d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_的的特点。特点。生产上一般不能通过直接培养生产上一般不能通过直接培养B B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是主要原因是_。(4)(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图

11、解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：_。【解题指南解题指南】1.1.考查实质：植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。考查实质：植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。2.2.解题关键：解题关键：(1)hr(1)hr是是a a、b b产生配子中相同的配子，另外两种配子分别是产生配子中相同的配子，另外两种配子分别是HrHr、hRhR。(2)(2)两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。(3)(3)骨髓瘤细胞特点、骨髓瘤细胞特点、B B淋巴细胞特点与融合后的细胞具备的特点之淋巴细胞特点与融合后的细胞具备的特点之

12、间的关系。间的关系。(4)(4)单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分组单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分组成。成。【解析解析】(1)a(1)a的花粉基因型为的花粉基因型为HrHr和和hrhr，b b的花粉基因型为的花粉基因型为hRhR和和hrhr，只有只有HhRrHhRr的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细胞的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细胞HhRrHhRr能在光照强度大于能在光照强度大于800lx800lx时生长。时生长。(2)(2)植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克服了植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克服了自

13、然条件下物种之间的生殖隔离。自然条件下物种之间的生殖隔离。(3)(3)在单克隆抗体产生过程中细胞在单克隆抗体产生过程中细胞d d是杂交瘤细胞，具备了融合前是杂交瘤细胞，具备了融合前两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛选的两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛选的细胞细胞d d产生的抗体品质优良。产生的抗体品质优良。B B淋巴细胞能产生特定抗体，但不能淋巴细胞能产生特定抗体，但不能无限增殖，无法得到大量的抗体。无限增殖，无法得到大量的抗体。(4)(4)只能注射特定抗原后才能得到特定的只能注射特定抗原后才能得到特定的B B淋巴细胞，再与骨髓瘤淋巴细胞，再与骨髓瘤细胞融

14、合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆细胞融合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆抗体。抗体。答案答案: :(1)(1)给予大于给予大于800lx800lx的光照的光照(2)(2)植物细胞的全能性植物细胞的全能性克服了远缘杂交不亲和的障碍克服了远缘杂交不亲和的障碍(3)(3)既能无限增殖，又能产生特定抗体既能无限增殖，又能产生特定抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一特异性强、灵敏度高、化学性质单一B B淋巴细胞不能无限增殖淋巴细胞不能无限增殖(4)(4) 【互动探究互动探究】(1)(1)若若a a、b b表示两种植物体细胞，则融合前需进行什表示两种植物体细胞，则融合前需

15、进行什么操作？么操作？提示：提示：利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。分析：分析：细胞融合是利用细胞膜的流动性，细胞壁如果存在无法进细胞融合是利用细胞膜的流动性，细胞壁如果存在无法进行融合。行融合。(2)(2)植物体细胞杂交与单克隆抗体产生过程中，植物体细胞杂交与单克隆抗体产生过程中，a a、b b融合的方法相融合的方法相同吗？同吗？提示：提示：植物细胞可用物理法如电激等，化学法如用植物细胞可用物理法如电激等，化学法如用PEGPEG诱导；动物诱导；动物细胞除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导。细胞除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导。 植物体细胞融合植物体细

16、胞融合【典例训练典例训练2 2】通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势势( (甲耐盐、乙高产甲耐盐、乙高产) )，培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实，培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：验流程并回答问题：(1)A(1)A是是_酶，酶，B B是是_，D D是具有是具有_优良性状的幼芽。优良性状的幼芽。D D长长成的幼苗需要选择的原因是成的幼苗需要选择的原因是_。(2)(2)由由C C形成植株的过程利用了形成植株的过程利用了_技术，形成愈伤组织需要经过技术，形成愈伤组织需要经过_过程，愈伤组织形成过程，愈伤组织形成D D需要经

17、过需要经过_过程。整个培养过程要过程。整个培养过程要在在_条件下进行。条件下进行。(3)(3)植物体细胞融合成功的标志是植物体细胞融合成功的标志是_。目前植物体细胞杂交还。目前植物体细胞杂交还存在许多问题没有解决，如存在许多问题没有解决，如_，尽管如此，这项新技术在，尽管如此，这项新技术在_等方面取得的重大突破还是震撼人心的。等方面取得的重大突破还是震撼人心的。【解题指南解题指南】1.1.知识储备：植物体细胞杂交过程和植物组织培养过程。知识储备：植物体细胞杂交过程和植物组织培养过程。2.2.解题关键：解题关键：(1)(1)明确诱导原生质体融合后产生的杂种细胞有多种，明确诱导原生质体融合后产生的

18、杂种细胞有多种，需经筛选。需经筛选。(2)(2)注意流程图中关键字眼：注意流程图中关键字眼：“用钠盐浓度为用钠盐浓度为0.6%0.6%的固体培养基培的固体培养基培养养”，即筛选掉了不耐盐的愈伤组织。，即筛选掉了不耐盐的愈伤组织。【解析解析】植物细胞经纤维素酶和果胶酶处理后，去除细胞壁，得植物细胞经纤维素酶和果胶酶处理后，去除细胞壁，得到原生质体。两个原生质体经到原生质体。两个原生质体经PEGPEG诱导后融合，再生出细胞壁后变诱导后融合，再生出细胞壁后变成杂种细胞，利用植物组织培养技术可得到愈伤组织、丛芽结构成杂种细胞，利用植物组织培养技术可得到愈伤组织、丛芽结构和试管苗，并非每个细胞都能表达出

19、耐盐性状，需要利用含盐培和试管苗，并非每个细胞都能表达出耐盐性状，需要利用含盐培养基进行选择。养基进行选择。(2)C(2)C细胞是杂种细胞，形成植株需要植物组织培养过程，经历了细胞是杂种细胞，形成植株需要植物组织培养过程，经历了细胞的脱分化和再分化过程。该过程涉及到培养基培养过程，所细胞的脱分化和再分化过程。该过程涉及到培养基培养过程，所以无菌操作非常重要。以无菌操作非常重要。(3)(3)植物细胞融合时，核质都应该进行融合，当细胞壁再生时，植物细胞融合时，核质都应该进行融合，当细胞壁再生时，说明融合后的细胞核与细胞质进行正常的新陈代谢了，即融合说明融合后的细胞核与细胞质进行正常的新陈代谢了，即

20、融合成功。植物体细胞杂交虽然克服了远缘杂交不亲和的障碍，但成功。植物体细胞杂交虽然克服了远缘杂交不亲和的障碍，但让杂合体表达出两种植物的优良性状有时还比较困难。让杂合体表达出两种植物的优良性状有时还比较困难。答案：答案：(1)(1)纤维素酶和果胶纤维素酶和果胶 融合的原生质体融合的原生质体 耐盐耐盐有耐盐高产和耐盐不高产两种有耐盐高产和耐盐不高产两种(2)(2)植物组织培养植物组织培养 脱分化脱分化 再分化再分化 无菌无菌(3)(3)再生出新的细胞壁再生出新的细胞壁 不能按照人的意愿表达两个亲本的性状不能按照人的意愿表达两个亲本的性状克服远缘杂交不亲和的障碍克服远缘杂交不亲和的障碍1.1.如图

21、表示高等动、植物细胞融合的部分过程，请据图回答：如图表示高等动、植物细胞融合的部分过程，请据图回答：(1)(1)若上图表示植物体细胞杂交的部分过程，欲将丁细胞培育成若上图表示植物体细胞杂交的部分过程，欲将丁细胞培育成植株，可选用植株，可选用_技术，这一技术的两个关键步骤是技术，这一技术的两个关键步骤是_和和_。(2)(2)若上图表示制备单克隆抗体的部分过程，甲细胞为小鼠的骨若上图表示制备单克隆抗体的部分过程，甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，则乙细胞为髓瘤细胞，则乙细胞为_。在分离乙细胞之前，应对小鼠进。在分离乙细胞之前，应对小鼠进行的处理是行的处理是_。过程区别于植物细胞常用的诱导方法是。过程区别于

22、植物细胞常用的诱导方法是_，过程可利用，过程可利用_培养基进行筛选，筛选得到的丁细培养基进行筛选，筛选得到的丁细胞还需进行胞还需进行_和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述制备过程涉及到的生物技术有的能分泌所需抗体的细胞。上述制备过程涉及到的生物技术有_。【解析解析】(1)(1)将丁细胞培育成植株利用了植物组织培养的方法，将丁细胞培育成植株利用了植物组织培养的方法，包括脱分化和再分化过程，利用了细胞全能性原理。包括脱分化和再分化过程，利用了细胞全能性原理。(2)(2)甲细胞若为骨髓瘤细胞，则乙细胞为甲细胞若为骨髓瘤细胞，则乙

23、细胞为B B淋巴细胞，两者融合淋巴细胞，两者融合后会形成杂交瘤细胞，需要通过选择培养基将产生特定抗体的后会形成杂交瘤细胞，需要通过选择培养基将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来。动物细胞融合除植物细胞融合的物理法、杂交瘤细胞筛选出来。动物细胞融合除植物细胞融合的物理法、化学法外，还可以用灭活的病毒来诱导，细胞融合后，产生的化学法外，还可以用灭活的病毒来诱导，细胞融合后，产生的杂种细胞有多种，需经特定的选择培养基筛选。单克隆抗体制杂种细胞有多种，需经特定的选择培养基筛选。单克隆抗体制备过程中主要利用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。备过程中主要利用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。答案：答

24、案：(1)(1)植物组织培养植物组织培养 脱分化脱分化 再分化再分化(2)B(2)B淋巴细胞淋巴细胞 将抗原注射入小鼠体内将抗原注射入小鼠体内 用灭活的病毒诱导用灭活的病毒诱导 特定的选择特定的选择 克隆化培养克隆化培养 动物细胞融合技术、动物细胞培养动物细胞融合技术、动物细胞培养技术技术2.(20122.(2012哈尔滨模拟哈尔滨模拟) )如图是利用现代生物工程技术治疗遗传如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病性糖尿病( (基因缺陷导致胰岛基因缺陷导致胰岛B B细胞不能正常合成胰岛素细胞不能正常合成胰岛素) )的过程的过程设计图解，请据图回答：设计图解，请据图回答：(1)(1)图中、所示

25、的结构分别是图中、所示的结构分别是_、_，过程常，过程常用的方法是用的方法是_。(2)(2)图中、所示的生物工程技术分别是图中、所示的生物工程技术分别是_、_，利用利用_技术快速扩增健康胰岛技术快速扩增健康胰岛B B细胞基因的过程中，目的细胞基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在酶的作用下延伸形成基因受热形成单链并与引物结合，在酶的作用下延伸形成DNADNA，该酶的特点是该酶的特点是_。该技术的原理是。该技术的原理是_。(3)(3)过程通常用做受体细胞的原因是过程通常用做受体细胞的原因是_。(4)(4)图示治病的方法叫做图示治病的方法叫做_，与一般的异体移植相比最大，与一般的异体移

26、植相比最大的优点是的优点是_。【解析解析】(1)(1)是细胞核，是细胞核移植技术得到的胚胎干细是细胞核，是细胞核移植技术得到的胚胎干细胞，是重组载体导入受体细胞。胞，是重组载体导入受体细胞。(2)(2)是细胞核移植，是动物细胞培养得到早期胚胎。是细胞核移植，是动物细胞培养得到早期胚胎。PCRPCR技技术可快速扩增术可快速扩增DNADNA，该技术需要耐高温的，该技术需要耐高温的DNADNA聚合酶催化。聚合酶催化。(3)(3)转基因动物培养常用受精卵或早期全能胚胎干细胞作受体细转基因动物培养常用受精卵或早期全能胚胎干细胞作受体细胞。胞。(4)(4)该图为治疗性克隆，自身细胞细胞核移植后得到的克隆器

27、官该图为治疗性克隆，自身细胞细胞核移植后得到的克隆器官不会发生免疫排斥反应。不会发生免疫排斥反应。答案：答案：(1)(1)细胞核细胞核 内细胞团内细胞团( (或胚胎干细胞或胚胎干细胞) )显微注射法显微注射法(2)(2)核移植技术核移植技术 早期胚胎培养技术早期胚胎培养技术 PCR PCR 耐高温耐高温DNADNA双链复制双链复制(3)(3)这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官细胞、组织、器官(4)(4)体外基因治疗体外基因治疗 没有免疫排斥反应没有免疫排斥反应3.(20123.(2012深圳模拟深圳模拟) )

28、以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AAAA和和BBBB。据图分析回答：。据图分析回答：(1)(1)过程发生的化学变化是过程发生的化学变化是_。(2)(2)将若干将若干a a和和b b 等量混合后转移到培养基上培养，再经过和，等量混合后转移到培养基上培养，再经过和，c c的细胞类型有的细胞类型有_。(3)(3)在采用化学法进行过程时，一般是用在采用化学法进行过程时，一般是用_作为诱导剂。作为诱导剂。(4)(4)植物体细胞杂交与自然状况下的生殖细胞杂

29、交相比，前者的主植物体细胞杂交与自然状况下的生殖细胞杂交相比，前者的主要意义是要意义是_。【解析解析】准确理解植物体细胞杂交的过程是解题的关键。准确理解植物体细胞杂交的过程是解题的关键。(1)(1)植物体细胞杂交亦称为原生质体融合，是以植物的体细胞为材植物体细胞杂交亦称为原生质体融合，是以植物的体细胞为材料，经特殊的酶处理后，用去掉了细胞壁的裸细胞料，经特殊的酶处理后，用去掉了细胞壁的裸细胞原生质体原生质体为亲本进行融合的一种新型的生物技术。为亲本进行融合的一种新型的生物技术。(2)(2)将若干将若干a a和和b b 等量混合后转移到培养基上培养，经过细胞融合，等量混合后转移到培养基上培养，经

30、过细胞融合，c c的细胞类型包括没有融合的细胞、相同细胞的融合和不同细胞的的细胞类型包括没有融合的细胞、相同细胞的融合和不同细胞的融合，即融合，即AAAA、BBBB、AAAAAAAA、BBBBBBBB、AABBAABB。(3)(3)在采用化学法进行过程时，一般是用聚乙二醇在采用化学法进行过程时，一般是用聚乙二醇(PEG)(PEG)作为诱作为诱导剂。导剂。(4)(4)植物体细胞杂交的主要意义是克服了不同生物间远缘杂交不亲植物体细胞杂交的主要意义是克服了不同生物间远缘杂交不亲和的障碍。和的障碍。答案：答案：(1)(1)纤维素和果胶发生水解纤维素和果胶发生水解(2)AA(2)AA、BBBB、AAAA

31、AAAA、BBBBBBBB、AABBAABB(3)(3)聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(PEG)(4)(4)克服了不同生物间远缘杂交不亲和的障碍克服了不同生物间远缘杂交不亲和的障碍( (或扩大了可用于杂或扩大了可用于杂交的亲本基因组合的范围交的亲本基因组合的范围) )4.4.如图表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种如图表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种细胞的过程细胞的过程( (注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的) )。请回答下列问题：。

32、请回答下列问题：(1)(1)图中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有图中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有_ ( (至少写出两至少写出两种种) )，再用特定的，再用特定的_培养基进行筛选，得到杂种细胞。培养基进行筛选，得到杂种细胞。(2)(2)培养杂种细胞时，根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配培养杂种细胞时，根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基，此外经常会在培养基中加入制培养基，此外经常会在培养基中加入_。培养过程中细胞需。培养过程中细胞需置于含置于含COCO2 2的混合气体的培养箱中培养，的混合气体的培养箱中培养，COCO2 2的主要作用是维持培的主要作用是维持培养液的养液的_。(3

33、)(3)若只考虑人的成纤维细胞与鼠细胞两两融合形成的杂种细胞，若只考虑人的成纤维细胞与鼠细胞两两融合形成的杂种细胞，假如每种杂种细胞只保留了人的假如每种杂种细胞只保留了人的1 1条染色体，从染色体组成的角度条染色体，从染色体组成的角度考虑，杂种细胞可能有考虑，杂种细胞可能有_种。种。【解析解析】(1)(1)诱导动物细胞融合的方法包括物理方法诱导动物细胞融合的方法包括物理方法( (如电激如电激) )、化、化学方法学方法( (如聚乙二醇如聚乙二醇) )、生物方法、生物方法( (如灭活的病毒如灭活的病毒) )。通过选择培养。通过选择培养基将杂种细胞筛选出来。基将杂种细胞筛选出来。(2)(2)动物细胞培养液一般包括糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、动物细胞培养液一般包括糖类、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清、动物血浆。微量元素、动物血清、动物血浆。(3)(3)人体细胞中含有人体细胞中含有2424种染色体，分别是种染色体，分别是2222种常染色体和种常染色体和2 2种性染种性染色体色体( (即即X X染色体和染色体和Y Y染色体染色体) )。答案：答案：(1)PEG(1)PEG、灭活的病毒、电激、灭活的病毒、电激( (写出两种即可写出两种即可) )选择性选择性(2)(2)动物血清、血浆动物血清、血浆 pHpH(3)24(3)245.5.如图为制