岛津LC-20A使用及维护保养

1、岛津LC-20A型液相色谱系统的使用和维护一、系统配置系统组成：本系统由2个LC-20AT溶剂输送泵分为A,B泵、手动进样器、C18 填料色谱柱、SPD-20A紫外-可见检测器、N2010工作站等组成。二、准备工作流动相准备：使用前应待检样品的检验方法准备所需的流动相（水使用纯净水，其 他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L用合适的0.45 滤 膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，有机相用尼龙，水相用纤维素，超声 脱气20min以上待用。1、色谱柱准备:根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW流向2、样品溶液配置：配

2、置样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制，用合适0.45 m勺样品过滤器过滤后待用。如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。3、检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。三、开机、参数设定及平衡系统1、接通电源，依次开启稳压电源、A泵、B泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。2、排气泡或更换流动相的操作方法（操作时虑头必须全部浸入流动相中，否则，可能带入气泡。更换流动相时，须先把泵关掉,等柱压为零再拿出虑头更换2.1. 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2.2. 逆时针转动A/B泵的排液阀18

3、00,打开排液阀；2.3. 按A/B泵的purge键,pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗,3min（可设定后自动停止；2.4. 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。2.5. 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。2.6. 如按以上方法不能排尽气泡，从柱人口处拆下连接管，放入废液瓶 中设流速为5 ml/min,按pump键停泵，重新接上柱并将流速重设定 为规定值。3、参数设定3.1、波长设定:在检测器显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所 需波长值，按Enter键确认。按CE键退出到初始屏幕。3.2、流速设定:在A泵显示初始屏幕时，按func键，用数字键输入所需

4、 流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min,按Enter键确认。按CE 键退出。3.3、流动相比例设定:在 A泵显示初始屏幕时，按cone键,用数字键 输入流动相B的浓度百分数，按Enter键确认。按CE键退出。3.4、梯度设定3.4.1.在A泵显示初始屏幕时，按edit键,Enter键;342.用数字键输入时间,Enter键,重复按func键选择所需功能（FLOW设定流速,BCNC设定流动相B的浓度，按Enter键，用数字键输入设定值，按En ter键,3.4.3重复上一步设定其他时间步骤；3.4.4用数字键输入停止时间，重复按func键直至拼命显示STOP按Enter 键确认。按CE键退

5、出。4、平衡系统4.1.按N2010色谱数据工作站操作规程打开在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数。4.2等度洗脱方式4.2.1按A泵的pump键,A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定 的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。4.2.2. 检查各管路连接处是否漏夜，如漏夜应予以排除4.2.3. 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，进行气泡排除操作4.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移 <0.01mV/min,噪声为<0.001mV时，可为系统已经达到平衡状态，可以进样4.3.梯度洗脱方

6、式431以检查方法规定的梯度初始条件,按462项下方法平衡系统。4.3.2在进样前运行12次空白梯度。方法：按A泵的run键,prom.run指示灯 亮，梯度程序运行；程序停止时,prom.run指示灯灭。4.4如果使用前色谱柱只能中保存的流动相为纯甲醇或纯乙睛，而新流动相中含 有缓冲盐时，应先用纯水冲洗色谱柱十分钟左右再使用流动相，以免盐析出损坏系统。4.5.如系统为正相或反相交换使用，应先将所有管路用异丙醇清洗后再换新流动 相使用。四、检测1、进样前按检测器zero键调零2、用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。3、每次进样量要基本一致，进样针里不可有气泡，如有，及时赶去。4、 在进

7、样阀处于“Injec状态时，插入进样器，迅速旋转至load状态，注入样品，旋回inject位置，进样结束。5、至样品检测结束，在N2010色谱工作站软件上计算结果。五、清洗系统关机1、手动进样器清洗：用注射器吸20ml超纯水后套上冲洗头，将冲洗头轻轻顶在进样口上（不宜用力 过大,否则容易损坏进样口，使进样阀保持在load位置,慢慢将水推入，水将通过注射 针导入口、引导管和注射针密封圈，由样品溢出管排出。2、色谱柱清洗：继续以分析中使用流动相冲洗10分钟以上，待基线平稳后关闭检样器，冲洗色谱 柱。3、如果流动相不含缓冲盐，可以用甲醇:水 =70:30（或用纯甲醇直接冲洗30分钟以上后把流速设为零，然后关闭所有仪器设备，顺序为:先退出工作站软件，