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文档简介
1、实验三 线粒体和液泡系的 超活染色与察看一 实验目的1 察看动、植物活细胞内线粒体、液泡的 形状、数量和分布2 了解细胞和细胞器的超活染色技术。二 实验原理n活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒的一种染色方法。n活体染色可用来研讨生活形状下的细胞形状构造和生理、病理形状。n根据染色剂性质和染色方法不同,分为体内活染和体外活染。n活体染色之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分,主要是染料的“电化学特性起重要作用。碱性燃料的胶粒外表带阳离子,酸性染料的胶粒外表带有阴离子,而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子,这样,他们彼此就发生了吸引作用。但不是任何染料都可以作为活体染色剂之用,
2、应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料,而且总要配成稀淡的溶液来运用。普通是以碱性染料最为适用,能够由于它具有溶解在类脂质的特性,易于被细胞吸收,Janus green B和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料,对于线粒体和液泡系的染色各有专注性。n詹纳斯绿可专注性地对对线粒体进展活染,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料一直坚持氧化形状(即有色形状),呈蓝绿色。n中性红对液泡系的染色具有专注性,将活细胞中的液泡系染成红色。三 实验用品n1 器材:n显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸n2 试剂:nRinger液、1/5000詹纳斯绿、
3、1/3000中性红n3 资料:n人口腔上皮细胞n洋葱鳞茎内表皮细胞n小麦或黄豆幼根根尖四 实验方法n一 线粒体的超活染色与察看n 詹纳斯绿B能专注对线粒体进展超活染色,呈蓝绿色。1 人口腔粘膜上皮细胞线粒体 的超活染色察看n载玻片 37水浴锅的金属板滴两滴詹纳斯绿B染液n牙签从口腔粘膜刮取上皮细胞放入载玻片染液染色10-15分钟盖上盖玻片察看n低倍镜平展的口腔上皮细胞高倍镜颗粒或短棒状线粒体洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的 超活染色n载玻片滴一滴詹纳斯绿B染液撕取一小片洋葱鳞茎内表皮染色10-15分钟n吸去染液加一滴Ringer液盖上盖玻片察看二 液泡系的超活染色与察看 n中性红对液泡系的染色具有专注性,将活细胞中的液泡系染成红色。小麦液泡系的超活染色与察看 n小麦根尖细胞液泡系的中性红染色察看n双面刀片小麦或黄豆幼苗根尖切一纵切面中性红染色5-10分钟n吸去染液加一滴Ringer液盖上盖玻片
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