人细胞凋亡相关基因(BCL-2)ELISA试剂盒

1、人细胞凋亡相关基因(bcl-2)elisa试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心abc-elisa法。用抗人bcl-2 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的bcl-2与单抗结合，加入生物素化的抗人bcl-2 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在450nm 处测 od 值， bcl-2浓度与 od 值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中bcl-2 浓度。试剂盒组成（2-8保存）酶标板（ coated wells ）96孔酶标抗体工作液（ enzyme conjug

2、ate）12ml 10标本稀释液（sample buffer ）12ml 20浓缩洗涤液（ wash buffer ）50ml 标准品（ standards ）： 40ng/ 瓶2瓶底物工作液（ tmb solution ）12ml 第一抗体工作液 （biotinylated antibody ）12ml 终止液（ stop solution ）12ml 准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（edta、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8 保存 48 小时；更长时间须冷冻（-20 或 -70 ）保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作 1：5-10 稀释（取 4

3、0ul，加标本稀释液160ul, 稀释 5 倍） 。2.标准品液配制：使用前加入1ml 蒸馏水混匀，配成40ng/ml 的溶液。设标准管8 管，第一管加标本稀释液900ul ，第二至第八管加入标本稀释液500ul 。在第一管中加入40ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出500ul ，移至第二管。 如此反复作对倍稀释， 从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10标本稀释液用蒸馏水作1:10 倍稀释（示例： 1ml 浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。4. 洗涤液：用重蒸水1:20 稀释（示例： 1ml 浓缩洗涤液加入19ml 的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准

4、品或待测样品100ul ，将反应板充分混匀后置37120 分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6 次，向滤纸上印干。3.每孔中加入第一抗体工作液100ul 。将反应板充分混匀后置37 60 分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置3730 分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul ，置 37暗处反应15 分钟。8.每孔加入 100ul 终止液混匀。9.30 分钟内用酶标仪在450nm 处测吸光值。结果计算与判断1.所有 od 值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品 4000 、2000 、1000 、500、250 、125 、62.5 、

5、0 pg/ml 为横坐标， od 值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品 od 值在该曲线图上查出相应bcl-2 含量，再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1. 灵敏度：最小的bcl-2 检测浓度小于30pg/ml 。2.特异性：可同时检测重组或天然的人bcl-2 。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10。注意事项1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及od 值错误地升高。3. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥 。4. 本试剂盒宜置4oc 冰箱保存。5. 本试剂盒仅用于

6、科研，不能用于临床诊断！春天的风是有灵性的，依着风的眼眸，我看到了那一株株桃花读信的倩影，在桃林深处，紫色的青藤爬满那个小屋。我的小城，桃花已然开成海，像是一场粉色的春梦。是否，可以赴一场最美的相逢，如是，便不负曾经许下的约定。守住心底最美风景，是一种风度，一种期望。让心，随花儿轻舞，让梦，随蝶儿翩跹。等一缕柔风载满诗意，落满我的小院，好想，牵着你的手走在花开的路上，临摹又一个春的相遇，陌上绿色蔓延，让深情的诗句落在眉弯，打开灵魂的心门，写尽情意绵绵。春雨如丝，暖了一季寒凉露出温暖，碧水映蓝天，云朵儿似乎摸到嫩草尖尖。花香十里，暗香盈袖。我们微笑着，不说话，就十分美好。生命里，总会有一些人，渐

7、行渐远，偶尔想起，却只是停留在文字里，那一抹淡淡的回忆。唯有春天，总那么诗意明亮，始终晕染着眉心，让涩涩的往事随风，让一些温暖的记忆温润着心房。珍惜眼前的幸福，紧握手中的暖意，面向青山绿水，一路微笑，一路行走情暖山水间，盈一份诗意于心田，以云的飘逸轻盈过往，以花的姿态拥馨香满怀，以文字的杯盏邀约一曲细水长流。煮一壶春色，与时光对语。窗前，柳枝儿发芽，玉兰含苞，时光一直绕指馨香。心念如这徐徐春风，荡漾成一片流云。春落人间，一种别样的景致美了心境，所有的疲惫与忧愁也随风而去，微笑着面对生活，用内心的那份热情，那份纯真来经营生活，来创造幸福，何尝不是一种快乐？我的流年，风过，红尘入画；雨落，缠绵入心

8、。行走在春天里，眼里满是明丽与清澈，一树一树的花开，细碎而芬芳；一片一片的绿地，静美而清新。嗅着阳光的味道，把自己置身于大自然中，真好！只要心足够明媚，纵然有小小的阴霾也无妨。我们一路走来，沿途总会有美丽的风景。于喧嚣红尘中，守着心灵的一方山水。不乱于心，不困于情，不畏将来，不念过往。春水初生，耐人寻味。春雨如丝，丝如媚，绵绵的不着一点儿声息。踏春而去，不知是哪一处的红尘山水在心间已布满了雅致，心如花开，一朵娴雅的光阴，柔软着眼角的笑意，置身于安暖的春天，一抹浅喜，一怀深爱。一颗心，便在另一颗心的相随里静好。春光无限温柔地洒满山川，我愿，生命里所有的远方，都开满春天的芬芳，待一轮明月悄悄爬上西窗，归来的都是安详。三月，阳光明媚，草色青青，小鸟儿也灵动