双歧杆菌在短肽肠内营养液中的存活力

1、双歧杆菌在短肽肠内营养液中的存活力【摘要】目的：研究双岐杆菌在短肽肠内营养液中的存活力. 方式：将50g/L两歧双歧杆菌菌悬液加入120g/L短肽营养液中，37 C 厌氧培育箱中培育，别离在0,4,8,12,14,16,20,24h时刻点取样进行活菌数、A55R酸度和pH测定.结果：在短肽肠内营养液中接种两歧 双歧杆菌后，活菌数在培育016h生长速度较快，16h达最顶峰，以 后下降.A550随着时刻的延长而增加.酸度也随着培育时刻的延长而 增加，在培育014h之间增加较快，14h以后增加缓慢.pH值随培育 时刻的延长而下降，在培育012h之间下降较快，12h以后下降缓慢. 结论：双歧杆菌能在1

2、20g/L的短肽肠内营养液中较好地存活，且在 1214h期间应停止发酵.【关键词】二裂菌属肠道营养短肽存活力0引言临床上有许多危重患者，在应激状态下可显现一系列代谢改变， 这种代谢紊乱贯穿于危重病的始终，可引发肠黏膜损害和营养素、维 生素B1二、脂溶性维生素的吸收障碍，致使患者显现一系列营养问题 1,肠内营养支持可激活肠道神经内分泌系统，增进胃肠黏膜生长，维持肠道及机体免疫系统正常，保护肠黏膜屏障功能，改善机体的营 养不良2.但是，有部份患者因抗生素、激素和化疗药物的应用致 使菌群失调，在肠内营养支持的进程中，显现腹泻，阻碍了营养医治 成效3.双歧杆菌是肠道有利菌的主体，是肠道生物屏障的重要组

3、 成部份，可纠正微生态失衡，防治肠源性感染4.咱们观看双歧杆 菌在短肽肠内营养液中存活情形，为研究益生菌肠内营养制剂提供科 学依据.1材料和方式材料两歧双歧杆菌和双歧杆菌培育基从甘肃省科学院生物所购得 牛奶培育基：将超市购买来的完达山脱脂奶粉配制成120g/L的浓度,分装于试管中，每支10mL塞上硅胶塞，置于高压蒸汽灭菌器中，于 121c下灭菌10min,切断电源，缓慢排气，冷却后置于冰箱冷藏柜中 备用.短肽型肠内营养剂（粉剂）百普素购自荷兰纽迪希亚，要紧成份为水解乳清蛋白、麦芽糖糊精、植物油、矿物质、维生素、微量元素，为淡黄色细粉，略有芳香气，味微苦涩.在无菌操作条件下配制成120g/L的浓

4、度，分装于试管中，每只10mL塞上硅胶塞.现用现配， 为幸免营养素破坏，配制好的营养液不能高压蒸汽消毒，采纳过滤除 菌法.仪器：YQ-II厌氧培育箱，净化工作台，2D 2A型自动电位 滴定仪，6230M酸度计，725s可见分光光度计，立式电热压力蒸汽灭 菌器，电热恒温水浴箱，电子天平，Olympus显微镜，电热恒温干燥箱.方式为保证菌种的活力，每一个月活化1次.方式是在无菌条件下，按1 ： 9的比例将镜检无杂菌的菌悬液加入双歧杆菌培育基中， 37c厌氧培育48h.按50g/L的接种量将活化后的菌悬液加入 120g/L 百普素的营养液中，37c厌氧培育24h.对上述双歧杆菌营养液进行 色、味、凝

5、固性和酸甜比例等感官评定.在无菌操作条件下，将菌悬液 加入牛奶培育基中，37C C厌氧培育的双歧杆菌营养液，按0,4,8,12,14,16,20,24h时刻点取样进行活菌数、A550值、酸度和pH测定.在培育进程中按时取样于无菌生理盐水的试管中，进行10倍梯度稀释，选择适当的稀释度，吸取到琼脂培育基平板中，涂布均匀， 置于37c厌氧培育48h,进行菌落计数，并革兰染色观看菌落特点和 细菌形态.在无菌操作条件下，按时取样，适当稀释，采纳比浊法测定 A550值，所测A550值乘以稀释倍数即为实际 A550值.在无菌条件下 掏出营养液10mL于50mL小烧杯中，加入蒸储水20mL混匀，用校正 过的酸

6、度计进行测定.2结果百普素溶液在加入双歧杆菌后仍呈淡黄色，气味芳香，在原 有苦涩味的基础上，略有酸味，不凝固.菌落为圆形，半透明，光亮， 突起，全缘，质地较软，针尖般大小.在镜下可见革兰氏染色阳性的多 形态杆菌，呈Y, V字形，变曲状、刮勺状，其典型的形态是分叉的杆 菌，未见其他杂菌（图1）.接种在百普素中的菌悬液凝乳时刻为 272min. 双歧杆菌在短肽营养液中活菌数在培育016h之间呈上升趋势，且016h生长速度较快，16h活菌含量达到最顶峰.A550随培育时刻的 延长而增加，在培育016h之间，A550增加较快，16h以后增加缓慢 （图2）.酸度随培育时刻的延长而增加， 在培育020h呈

7、上升趋势，20h达顶峰，20h后开始缓慢下降.pH值随培育时刻的延长而下降，在 培育012h之间，pH值下降较快，12h以后下降缓慢（图3） . 3讨 论在短肽型肠内营养制剂百普素营养液中接种两歧双歧杆菌后，感官性状未发生明显转变，双歧杆菌的形态和菌落形成都比较正常，没 有使百普素凝固.凝乳时刻与制酸奶的凝乳时刻大体相同，说明双歧杆 菌在百普素营养液中能够存活.百普素中含有人体需要的各类营养物 质，尤其是含有水解乳清蛋白、维生素 B1, B2, B6, C,尼克酸，泛 酸和叶酸和盐类，双歧杆菌之因此能在其中生长，可能与此有关.益生 菌制品在饮用之前，其益生菌含量必需达到 Ixi09cfu/L以

8、上才能达 到保健功效，而新鲜的益生菌制品活菌数要求不得低于1 x 1010cfu/L才能补偿益生菌在通过人体胃肠道时活菌数的损失5,咱们发觉，双歧杆菌在百普素营养液中培育 24hA550直一直处于上升趋势，且16h 时活菌数达到x 1012cfu/L ,达到了益生菌含量的要求.百普素属于中性要素饮食，其pH是双歧杆菌存活的重要条件之一 双歧杆菌不耐酸，在pH在以下生长缓慢6.咱们发觉，双歧杆菌在 培育进程中，细菌总数一直在增加，活菌数在016h之间繁衍较快，16h后活菌数下降.营养液中的酸度也随着时刻的延长而增加，20h后酸度下降.pH随着时刻的延长而下降，12h后下降缓慢，可能是由于双 歧杆

9、菌对糖的分解而产生大量的醋酸、乳酸和其他有机酸所致.尽管在 16h时营养液中活菌数最多，但现在pH已下降到了，无益于双歧杆菌 的进一步的存活和繁衍，16h后活菌数下降，在1214h时pH值在以 上，而此期间活菌含量大于1X1011cfu/L数量级，能起到保健功能. 临床要求配制好的营养液给患者利历时，营养液要新鲜，不得超过24h 7.因此接种了双歧杆菌的百普素营养液在培育1214h时可停止发酵且在24h之前利用.另外，双歧杆菌不耐酸和胆盐，仅适用于鼻空肠和空肠造口患者的肠内营养支持.【参考文献】1黄海涛.肠内营养研究进展J.广西医科大学学 报,2005,22:147-149.2郑建勇，王为忠，管文贤，等.全胃切除患者术后初期免疫增强 型肠内营养的作用JL第四军医大学学报，2005,26 (18): 1688-1690.3赵秋玲，李晓明.饮食因素与肠道微生态的研究进展J. 西北国防医学杂志,2006,27(5):368-370.4 SchneiderSM,GirardPipauF,FilippiJ,chainfattyacidsandmicroflorainpatientsonlong termtotalenteralnutritionJ .WorldJGastroenterol,2005,11(39):6165-6169.