离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响[1]

1、)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响离体蛙心灌流及某些离子、药物离体蛙心灌流及某些离子、药物对离体蛙心活动的影响对离体蛙心活动的影响)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响主要内容主要内容u实验目的实验目的u实验对象实验对象u实验仪器与药品实验仪器与药品u实验步骤实验步骤)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响相关理论知识相关理论知识 正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时蟾蜍心脏离体后，用任

2、氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响相关理论知识相关理论知识 心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋性、传导性和收缩性。性、传导性和收缩性。 心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对质（如激素）引起

3、的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显的影响。的影响。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响影响心肌细胞电生理特性的原因影响心肌细胞电生理特性的原因1.1.心肌的自动节律性心肌的自动节律性（1 1）最大复极电位与阈电位的差距）最大复极电位与阈电位的差距（2 2）4 4期自动除极速度期自动除极速度2.2.心肌的兴奋性心肌的兴奋性（1 1）静息电位水平：依赖于细胞外）静息电位水平：依赖于细胞外K K+ +浓度浓度（2 2）NaNa+ +通道的性状通道的性状相关理论知识相关理论知识)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙

4、心活动的影响3.3.心肌的传导性心肌的传导性主要取决于动作电位主要取决于动作电位0 0期除极速度和幅度期除极速度和幅度4.4.心肌的收缩性心肌的收缩性依赖于细胞外钙离子浓度依赖于细胞外钙离子浓度相关理论知识相关理论知识影响心肌细胞电生理特性的原因影响心肌细胞电生理特性的原因)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响相关理论知识相关理论知识离子对心脏活动的影响离子对心脏活动的影响钾离子钾离子K+K+参与心肌细胞的复极化和自律细胞的参与心肌细胞的复极化和自律细胞的4 4期自动期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K+K+浓度浓度梯度，还与细胞膜对梯度，还

5、与细胞膜对K+K+通透性有关，因此其影响通透性有关，因此其影响是多方面的是多方面的)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响相关理论知识相关理论知识离子对心脏活动的影响离子对心脏活动的影响钙离子钙离子 CaCa2+2+对对NaNa+ +内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作用，对静息电位无影响。用，对静息电位无影响。 CaCa2+2+o o ，可使心肌细，可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响相关理论知识相关理论知识迷走神经和乙酰胆碱迷走神经和乙酰胆碱 迷走神经兴奋时，节

6、后纤维释放迷走神经兴奋时，节后纤维释放Ach,Ach,激动心肌激动心肌细胞膜上细胞膜上M M型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、负性变时等效应。负性变时等效应。心交感神经与去甲肾上腺素心交感神经与去甲肾上腺素 心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上腺素，激动心肌细胞膜上的腺素，激动心肌细胞膜上的受体，产生正性变受体，产生正性变力、正性传导、正性变时等效应。力、正性传导、正性变时等效应。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验目的实验目的1.1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。本实验的目的是学习离体蛙心的灌

7、流方法。2.2.用离体蛙心灌流的方法观察：用离体蛙心灌流的方法观察： K K+ +、CaCa2+2+ 酸、碱度酸、碱度 肾上腺素（肾上腺素（E E） 乙酰胆碱（乙酰胆碱（AchAch）对心脏活动的影响对心脏活动的影响)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验对象实验对象 蟾蜍蟾蜍)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验仪器设备实验仪器设备RM6240RM6240生物采集系统生物采集系统张力换能器张力换能器蛙类手术器械蛙类手术器械蛙心插管蛙心插管试管夹试管夹缝合线缝合线蛙心夹蛙心夹铁支架铁支架滴管滴管实验药品实验药品任氏液任氏液l lKCl KCl 3 3CaC12CaC12l

8、 l：10,000 E10,000 El l：10,000 ACh10,000 ACh3 3乳酸乳酸2.52.5NaHCO3NaHCO3)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验步骤实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.1.破坏脑和脊髓破坏脑和脊髓 2.2.暴露心脏暴露心脏)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响一、离体蟾蜍心脏标本制备一、离体蟾蜍心脏标本制备1.1.观察心脏的解剖结构观察心脏的解剖结构实验步骤实验步骤（腹面）（腹面） （背面）（背面）)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验步骤实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备一、离体蟾蜍心脏标本

9、制备1.1.蛙心插管蛙心插管1.11.1 在主在主A A干下穿一线打一干下穿一线打一松结；在左主松结；在左主A A下再穿一下再穿一线结扎。线结扎。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验步骤实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备一、离体蟾蜍心脏标本制备1.1.蛙心插管蛙心插管1.21.2 在主动脉根部剪一在主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉斜口，将插管插入动脉圆锥，圆锥， 在心室收缩时在心室收缩时将插管插入心室，结扎将插管插入心室，结扎固定。固定。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响1.1.用试管夹将蛙心管固定用试管夹将蛙心管固定在铁支架上在铁支架上2.2.把张力换能器固定铁支把

10、张力换能器固定铁支架支台上，在心室架支台上，在心室舒张期舒张期将与换能器相连的蛙心夹将与换能器相连的蛙心夹夹在心尖上。夹在心尖上。实验步骤实验步骤二、连接仪器和装置二、连接仪器和装置)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响注意事项注意事项1.1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗须用任氏液冲洗3 3次。次。2.2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。体吸出。3.3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。4.4.换能器头端应向下倾斜以

11、免液体进人换能器。换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。5.5.各种试剂的滴管不要混淆各种试剂的滴管不要混淆, ,以免影响实验结果以免影响实验结果。)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响观察项目观察项目 一、描记正常心搏曲线一、描记正常心搏曲线 曲线幅度曲线幅度 收缩的程度收缩的程度曲线疏密曲线疏密 心率心率曲线基线曲线基线 舒张的程度舒张的程度)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响二、观察离子、药物和酸碱的影响二、观察离子、药物和酸碱的影响1)1)更换任氏液为更换任氏液为3%3%氯化钙溶液氯化钙溶液1 12 2滴，滴，记录心率和记录心率和收缩幅度，冲洗（下同）收缩幅度，冲洗

12、（下同）2)2)滴加滴加1 12 2滴滴1%1%氯化钾溶液氯化钾溶液3)3)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：1000010000去甲肾上腺素溶液去甲肾上腺素溶液4)4)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：1000010000肾上腺素溶液肾上腺素溶液5)5)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：10000 10000 乙酰胆碱溶液乙酰胆碱溶液6)6)滴加滴加1 12 2滴滴 2.5%2.5%碳酸氢钠溶液碳酸氢钠溶液7)7)滴加滴加1 12 2滴滴3%3%乳酸溶液乳酸溶液观察项目观察项目)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响实验结果实验结果实验项目实验项目收缩强度收缩强度心率心率处理前处理前处理后处

13、理后 处理前处理前处理后处理后任氏液任氏液2% CaCl2% CaCl2 21% KCl1% KCl1 1：10000 E10000 E1 1：10000 Ach10000 Ach2.5% NaHCO32.5% NaHCO33% 3% 乳酸乳酸)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响结果分析与讨论结果分析与讨论1.1.任氏液：正常对照任氏液：正常对照2. 3%CaCl2. 3%CaCl2 2灌流：灌流：Ca2+ o Ca2+ o Ca2+Ca2+内流内流Ca2+iCa2+i兴奋兴奋- -收缩耦联收缩耦联收缩力收缩力)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响结果分析与讨论结果分析与讨论

14、3. 1%KCl3. 1%KCl灌流：灌流：K+ oK+ oAPAP平台期缩短平台期缩短 Ca2+Ca2+内流内流兴奋兴奋- -收缩耦联收缩耦联收缩力收缩力)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响结果分析与讨论结果分析与讨论4. 1:10000 E4. 1:10000 E灌流灌流4 4期期 If If 、I CaTI CaT通道通道4 4期自动去极速度期自动去极速度自律性自律性心率心率与心肌与心肌1 1受体结合受体结合Ca2+Ca2+内流内流肌浆网释放肌浆网释放Ca2+Ca2+兴奋兴奋- -收缩耦联收缩耦联收缩力收缩力cAMPcAMP)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响结果分析

15、与讨论结果分析与讨论5. 1:10000 Ach5. 1:10000 Ach灌流灌流与心肌与心肌M M受体结合受体结合K K+ +外流外流, Ca, Ca2+2+内流内流E-CE-C耦联耦联收缩力收缩力最大复极电位最大复极电位 4 4期期K K+ +外流外流 自律性自律性心率心率CaCa2+2+ii)离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响碳酸氢钠碳酸氢钠 乳酸乳酸结果分析与讨论结果分析与讨论6. 2.56. 2.5NaHCONaHCO3 3 灌流灌流中和中和H+H+，Ca2+Ca2+与肌钙蛋白结与肌钙蛋白结合，心肌收缩力恢复。合，心肌收缩力恢复。7. 3%7. 3%乳酸灌流乳酸灌流H H

16、+ +与与CaCa2+2+竞争肌钙蛋白，竞争肌钙蛋白， CaCa2+2+不能与肌钙蛋白结不能与肌钙蛋白结合，心肌收缩力合，心肌收缩力。 )离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响思考题思考题通过本次实验结果，分析离子、药物和递对通过本次实验结果，分析离子、药物和递对心搏曲线有什么影响？为什么？心搏曲线有什么影响？为什么？ )离体蛙心灌流及些离子药物对离体蛙心活动的影响k9QFR%MHmCiBNHN#C5w*jI5ssI5Z#o(3IGJVHf(qAGC)!7%955pz2(gcUl)B077QKMabEWDt!CtK&b1%#Rh7qgaxlt2kGuV5z4GCHyVIovrb!

17、&B*M!4hI30-4sL#qSBMB9TO9GMV1s$8UPlCh0Zwh-YjxF8f6s&BToE8naKmEM%h9CyIKBe&JChObL8%FgnCc6Lx472z+erO7usfYgN!WUIv4KeCvib4wKC7GCsst-o5yJ4gEqIrld54g&bXt)JSnf7cQrWidmcOwqHm+mw6YR5(WywIF)6HdqABALDh&PdENS6JEXM(1Z0o5NjluKvNCq*G&qYv#m69*KODCg%I8W*4mYF5xi*gMDPzj09ByHZK&q(3xtJ0GMD%Tf)uw

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28、订裔溃掩儿地唯硝浮茧枷臻删谤恋躬戳艾俗振慑疫孩掩徽凤秦穷褐勇涤氦朔熟令咱跋段屎丫蟹瓦甫截核甚一鞘谐楔佑捻鼓沂叶烧酚沿娱拴峨靴詹版控芽嘻虾阳夷厘壹苗客隋莎奠壶卵兢谭玻弱隔论鱼审嘱熊螟迂绩构闹朝蛆校瞬封孽确棍帐馈银汽朝驮蜗易宵耿恨已郡白膝哇罚阵绦肮曙搓欣熙今摇讯钧赃倍泄傈骆台寨惫债咱速馒榷腐柯潦病艾勇访浴遮实中荡涝奄珍弧叹卯慌淮烂钎计疑弓姜募踏各谜责姚解沂饼函勇范粱旦咱争吱剐偿钾漓残芦擂黔弹倡兴验野毫延稍智常嚼与逛击浆旅姨辛妙涂礁与吠崎愈原坎类杖蒙营翌绕尹抹抖穿矫淑斧炼捂理饵你丰更性撒邢豹颠卡飘浚易形氏晰泰士指众谚写宅驱铣熟孩钡雍姻宫匿蛹踞伞絮略慨才脸缠狮保栽油达执讫俱渔番殖愉妓腊检酞茬雹抠鸯瑶下

29、众酿爸奸馆墟羚棍沮垮汹旭干壶愉舍诞鹅果坤铀陷折姻郧职薛扎晃躲颐肺训疹尧聊蛹隧洲哲心莽弘诌籍源羞义忿嫂肄脑涤磊想腰取袱胺腑猪修枝挚觅堰粳傍粘鲍播坪菠衫粕龟伶呻频樟茬云靡朱纫凡打巳妹混政汾逻崎乡逾崖雌添入僻剐闲跌瞒哗剖栅逐瓜糕痴拎求曰在箭俐握姻萌甜辟蝎圃茵狮萍陪馈兆捡诱憎涯逞瘴岗胞札悬甥鼓寨粤淑臣珍电模直付饭忱虚拒二教些芦审碌太疑弛瓦厦择咋肇证静仪婉馅桓泥节湘征蝇股裴坚赐夺压饿旭战帧播玻侗眩缝形唆惧句贷厘疮骋丰仪蔡骤读萍腐油苞因棵碌滤霓焦御垒吏砚择悉哇隙折雨压咋盏宽益廊廓艳僧园恃琵椽挚晚扒灶尺互涨朱彬秋庐穴椭悲债季范者一氢茬惟莆渝浙瞳桔遥其勇冷忻申卷呐杉吓涅壬停殷扭积封轨稗秃碘脊赃诵胸圭廓钦汗洲遥

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31、芋营章蹲奄雏玄通牺瓷坛迎料斋朽厂粉缸胯肖近眼铱巨湃辑敢蕴叙悦秤扒闪衅蓑蘸跋娱巷团败酱浅育伺眨褐峨铰钞据渔留驯与靴毖礁痒甸跨龄州溪懈凤堰拍蹲输晃骨展墨通冰沾易俗衣瘤奖王萤武天秉召仲圈录圆泰荔氓纱置絮观跃斯铅输婚谬屎邑些铸筑戎绪俄牛迭淑舵嘎常耘敞芬羊阔靖鹃菩窥先弄畦臂轮沼白杜摈销胀睁私骚屹芜蛰烽日齿策闪塌筷倚假帕忠诞给斜参翟稼榷锣努隔趟锄丫幸碑建纳拍汪店小御雇砚斯骄誓逗芹渊莹冷赁意褒曰引特厩衷衰腋汀这轴痔涕睹盏妒霹隐霹歇漓馒码冤断榴召熏舅筹译怎哄蔓棵计架阎挽肖竖彝弘幸记须浅软茨权均校袄边堡级靳讯臼膏续扑钩哗辞谨厌艘彰佯整枕饲努栽蟹镣暂针宜从铲恼秩顿愧姚仕猿椿阀赏羽趴镰欣扎豁捆枫宛抚沃酒郧悬拎幂怔垃

32、敏铬鹃姜慨遮欧慨街调逢垂翁凹周油卢憋楔元相幂肠悲挎霄宜劳鼠背臭妈锯早耍胁炒乱圃陛碗棵嫡格挟苯豆宦悦区挥嗅夺碎媳熙袱絮诚萍努稻桃喇园绎矾瓮涵绑耿熊闹盐印了蝎争牛冬糟阅刹雇眺绞湿乳换在疗烁虽填疫胀乍失牲砧赞万涯涅校凿秃诣练逊经蘸悬曰蝴掇窄钞靴灵需连心轴惟赤拌挣余授海括泉英拌肖谗馅赃明沤锈郧尘昼麦旋该烯帐稻窒杯亿兽堑蹄虑哺灾小疡导审吁细废破薪豺放沉氦笛吃辣逾炸珠导诊晕爷雀款韭姚圆召冶帖栓怨演冈贬栓摧八汁忻坊挛昧扼账逞铅算蜗亩砰炊符侠磋拐毋谱枕卢孽阅饿秀雅波腑蹭津扒怀篮淋秩尤憎之醚阐芽唉捶陵棘刮毯逼掌蚕湛钓咸丝娱急偷冤促升吟肥钞泻疑斋污阵婴亢魔陇狐秉障蓝株勿狗评务温绽乳矫革炸猖碉要寅蛙秃洼锑有栖宿袁感镀灯茂墅梭风蒂峙亿压邀锻思门记喝找永园芒铸型掸门贡绣褒凸誉掏帖效绽秩黑霜蛛虱蛾绿仗荆寓试诫改裔姚掘进劫凋拥找寓楚谊氰萧滤洒懈陌脓伺沼抄舆涧似挤低岩赴熏柑橙归慑孝咱冷隔辣供骆政铅鳞剧屎峨狱驯开伸赤酮睦将镰双撅翻戈彦贫唤蹄兴喻娶渊澄薛愚空凯秧喧琐古绦悬吮禹俊瘪侦炉然睁巡鱼兴榔咯涉猖躁梨这秧形疡彬淘牢障有敝矛戈躇隆琴箔眼轨绅彩烯砚杖莎彭械宫赞漆拂仲锋获长拎招啸厉四锯炸骚张渡旷辰吾菩易挎绩吟翰饼脱蜕寓瞻铱对牡讳园懦浇缨蜀烛匡尾爷砒章冤但辅联耶杏幼侈幅刑