植物总多酚常用的含量测定方法有Folin

1、植物总多酚常用的含量测定方法有Folin-Folin- CiocalteuCiocalteu 法, ,洒石酸业铁法, ,普鲁士蓝法和高铤酸钾法等。1.福林试液的配制：取鸨酸钠10g与钳酸钠2.5g,加水70ml、85%磷酸5ml与盐酸10ml，置200ml烧瓶中，缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂15g、水5ml与漠滴定液1滴 煮沸约15分钟，至漠除尽，放冷至室温，加水使成100ml。滤过,滤液作为贮备 液。置棕色瓶中，于冰箱中保存。临用前，取贮备液2.5ml，加水稀释至10ml,摇匀，即得。用10mL乙醇溶液溶解0.5000g没食子酸， 定容至100mL,分别移取3.0mL到100mL容

2、量瓶中，用蒸僻水定容。加入福林一薛卡多(Folin-Ciocalteu)试剂 显色，在765nm波长下测定吸光度。每个浓度做三个平行试验，取平均值，根 据标准曲线。取样品溶液1mL,按照上述的制作方法，测定其吸光度，每个样品做三个平 行试验，取平均值，计算样品中的多酚含量。反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将鸨钳酸还原，生成蓝色的化合 物，颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关，在波长760 nm左右有最大吸收。2.洒石酸业铁比色法。其测定原理是茶多酚类物质能与业铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法 测定其含量。茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为

3、每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL)。茶多酚的含量。茶多酚标准曲线的绘制。分别吸取茶多酚标准溶液1.0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL于4个50mL容量瓶中，各加水至10mL,再加洒石酸 业铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度，混匀后用1 cm比色皿.，以空 白试剂作参比，于波长540nm处测定吸光度(A)，绘制出标准曲线。实验十七食品中多酚类物质的提取与含量测定一、实验原理多酚类物质包括花宵苜、黄酮苜、单宁等，具体乂可分为若十种。多酚类物质含有酚羟基，有的还含有毯基，届于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按

4、比例组成的复合溶剂。由以上溶剂直接提取的多酚物质，实质为各种多酚的混合物(总多酚提取液)，不同的原料中所含酚类物质的种类不同，需要进一步的分离鉴定。常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有：洒石酸业铁比色法、FD法、FC法、普鲁士蓝法等。其中洒石酸业铁分光光度比色法应用较多。洒石酸业铁分光光度比色法的原理：过量的洒石酸业铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。测定总多酚 时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定，比如测定茶叶中茶多酚含量时，儿茶酚能较好地代表茶多酚，则以儿茶酚作标准物；而测定藤茶多酚时，则以没食子酸作标准物较合适。二、实

5、验材料、试剂与仪器材料：茶叶；仪器：水浴锅，分光光度计，三角瓶，容量瓶，吸管等；试剂：(1)洒石酸业铁溶液：称取1.00g硫酸业铁(FeSO4 7H2O)和5.00g洒石酸钾钠(C4H4O6NaK 4H2O )，混合后加蒸僻水溶解，定容到1000mL ;(2) pH 7.5磷酸盐缓冲液：称取60.20g Na2HPO4 12H2O和5.00g NaH2PO4 12H2O ,混合后加蒸僻水溶解，定容到1000mL。三、操作步骤(一)标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用标准曲线的制作参照GB-8313-87茶一茶多酚测定方法。为简化操作，可用在一定操作条件下 吸光度值为1.00时，供试液中茶多酚的浓 度为7.826 mg/mL”这一经验值，直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。（二）样品总多酚的提取准确称取1.0g磨碎并混匀的茶叶样品于200mL三角瓶中，加入80mL沸水，并 在沸水浴中保温浸提30min ,然后过滤、洗涤滤渣，将滤液合并、冷却、加蒸僻水定容 至100mL。（二）样品多酚提取液的多酚总量测定吸取1mL样品多酚提取液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸僻水和5mL洒石 酸业铁溶液，摇匀，再用pH 7.5磷酸盐缓冲液稀释至刻度，混匀。同是以蒸僻水代替 样品提取液，加入与样品测定同样的试剂作空白，用0.5cm比色也在540nm波长处测 定吸光度。四、计算式中：A