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文档简介
1、实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的:掌握园艺产品中糖的测定方法。二、实验原理利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原 反应,而进行测定。非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸 腾环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。三' 试剂与材料1、斐林试剂甲:69.3g CuSO 4.5H2O加水溶解并定容至1000ml ;乙:346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml ;2、1%次甲基蓝,1g次甲基蓝加水溶解
2、并定容至100ml,棕色瓶保存;3、0.2%标准葡萄糖,2g 105 C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml ;4、碱式滴定管;5、电炉,各种玻璃器皿。四' 操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml ,从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升(约23ml ) o (量控制在后滴定时消耗葡萄糖在电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清 亮为终点止。记录耗用的葡萄糖量为Vo,必须在内完成。(注意:还原的次甲基蓝易被
3、空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必 须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。)2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴 1%次甲基蓝,用0.2%葡萄糖滴定至蓝色消失。记录耗用的葡萄糖量为W。3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(Vo-V 1) ml水,并从滴定管 中预先加入(Vi-1) ml 0.2%葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴 1%次甲基蓝,继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。五' 结果计算还原糖含量(以葡萄糖计)(g/ml) Gvov) xQ.002 xi/io >n式中:Vo斐林试剂标定值,mlV样品糖液测定值,ml0.002标准葡萄糖溶液浓度,g/mli0样品糖液体积,mln样品稀释倍数六、思考题:1、还原糖测定方法有哪些?2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项?学习课件
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