遗传学第六章病毒的遗传分析ppt课件

1、 第六章 病毒的遗传分析一、病毒的形状构造与基因组一、病毒的形状构造与基因组 P184二、噬菌体的增殖与突变型二、噬菌体的增殖与突变型一噬菌体的增殖一噬菌体的增殖 P186二噬菌体的突变型二噬菌体的突变型1、条件致死突变、条件致死突变 在某些条件下，导致某些突变型致死，在某些条件下，导致某些突变型致死，而另而另 外一些条件下仍能增殖外一些条件下仍能增殖 。致死条件为限制。致死条件为限制条件条件restrictive condition)。 增殖条件为增殖条件为答应条件答应条件permissive condition)。1 1温度敏感突变温度敏感突变 热敏感突变热敏感突变 冷敏感突变冷敏感突变2

2、 2抑制因子敏感突变抑制因子敏感突变sussus突变突变 sussus突变突变 su+su+突变：宿主菌含有抑制基因突变：宿主菌含有抑制基因su+su+， sussus突变噬菌体感染此类菌时能产生后代。突变噬菌体感染此类菌时能产生后代。 2、噬菌斑形状突变、噬菌斑形状突变1T4噬菌体简介噬菌体简介 T4噬菌体为噬菌体为T-偶列噬菌体之一，基因组为偶列噬菌体之一，基因组为165Kb的双链的双链DNA分子，包括分子，包括160个基因，个基因，宿主为宿主为E.coli。 形状特征形状特征 环状遗传学图环状遗传学图2 T4野生型和突变型侵染野生型和突变型侵染E.coli B 和E.coli K(噬菌斑

3、的变化 快速裂解rapid lysis，r突变：r-，构成大噬菌斑；r+，缓慢裂解，构成小噬菌斑。 P191表8-4 T4 野生型和突变型的区别 类型 表型 B K( 野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 r 大噬菌斑 无噬菌斑 3 3、宿主范围突变型、宿主范围突变型 宿主范围宿主范围(host range(host range，h)h)：h-h-表示表示可同时感染两种不同的可同时感染两种不同的E.coliE.coli菌株菌株B B，B-2B-2，噬菌斑透明。，噬菌斑透明。h+h+表示只感染菌株表示只感染菌株B B，噬菌斑半透明。，噬菌斑半透明。三、噬菌体突变型的重组检验三、噬菌体突变型的重组检验一一B

4、enzer的重组检验和基因的的重组检验和基因的 精细构造分析精细构造分析实验：实验：T4 r区两种突变型区两种突变型r63， r12同同时侵时侵 染染E.coli B 和和E.coli K(，结果如，结果如下：下： 重组率重组率=2野生型噬菌斑数野生型噬菌斑数 100% 噬菌斑总数噬菌斑总数 重组检验：确定突变基因间的空间关系。重组检验：确定突变基因间的空间关系。 二二T2突变型的两点测交与作图突变型的两点测交与作图%100总噬菌斑数重组噬菌斑数重组值%100总噬菌斑数rhrh三三噬菌体的基因重组与作图噬菌体的基因重组与作图四四T4突变型的三点测交与作图突变型的三点测交与作图四、噬菌体突变型的

5、互补检验四、噬菌体突变型的互补检验一互补检验与顺反子一互补检验与顺反子互补检验：确定突变基因间的功能关系。互补检验：确定突变基因间的功能关系。 判别两个突变是位于同一个基因内的突变，判别两个突变是位于同一个基因内的突变，还是两个基因间的突变。还是两个基因间的突变。互补：一种突变型能弥补另一种突变型不具互补：一种突变型能弥补另一种突变型不具有的功能。这两种突变就称为彼此互补。有的功能。这两种突变就称为彼此互补。顺式陈列，反式陈列。顺式陈列，反式陈列。 斑点测试法斑点测试法spot test) P196 用一种用一种r突变型以突变型以0.1的感染比噬的感染比噬菌体菌体1:细菌细菌10感染大肠杆菌感

6、染大肠杆菌K(，噬菌，噬菌体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一定位置，再在上面滴加含另一种定位置，再在上面滴加含另一种r突变型突变型的培育基。在这一滴培育基范围内，一些的培育基。在这一滴培育基范围内，一些菌被两种噬菌体感染，如这范围内构成噬菌被两种噬菌体感染，如这范围内构成噬菌斑，就证明这两种突变型互补，相反那菌斑，就证明这两种突变型互补，相反那么不互补。么不互补。 在一个培育基上可做在一个培育基上可做68个斑点实验。个斑点实验。 在反式检验中，如两个突变之间能互补，那么阐明两个突变是位

7、于两个基因顺反子内的突变。如两个突变之间不能互补，那么阐明两个突变是位于同一个基因内的突变。 顺反子：一个不同突变之间没有互补的顺反子：一个不同突变之间没有互补的 功能区称为顺反子功能区称为顺反子cistron)。二基因内互补二基因内互补 例外情况。如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢例外情况。如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶 基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因。基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因。1、基因内互补和基因间互补的区别、基因内互补和基因间互补的区别 P2002、基因内互补的作用机制、基因内互补的作用机制 P202图图8-14五、噬菌体五、

8、噬菌体T4 r缺失突变与作图缺失突变与作图一缺失作图的原理一缺失作图的原理 缺失突变deletion mutation：一个顺反子内缺失一段核苷酸的突变。 点突变point mutation：一个顺反子内单个核苷酸发生的改动。 当同一顺反子内的缺失突变和点突变重叠时，不能产生基因内重组, 因此无野生型噬菌体。二缺失作图的方法二缺失作图的方法利用重叠缺失定位未知的r突变： 根据能否产生野生型噬菌体，系列将r突变定于A5片段；系列将r突变定于A5c区；系列将其定于A5c3区 。 rr基因座基因座A A、B B顺反子的部分突变图，每个正方顺反子的部分突变图，每个正方形代表一个独立分别的突变形代表一个独立分别的突变六、六、噬菌体的基因组与位点专注性重组噬菌体的基因组与位点专注性重组一一 噬菌体的基因组噬菌体的基因组 (