电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素的影响

1、电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素的 影响功能性消化不良（functional dyspepsia ,论文代发FD是慢性持续 或反复发作的上腹痛或不适、腹胀、嗳气、早饱、厌食、恶心、呕吐、烧心、 胸骨后隐痛或反胃等，病程超过12 周以上，经各项检查排除器质性疾病的一组消化内科的临床症候群 1。现代医学多采用促动力药、质子泵抑制剂、粘膜 保护剂和抗抑郁剂等药物治疗2，中医药多施以针灸和调理脾胃的方药，如调和脾胃之代表方剂半夏泻心汤。本研究观察了电针和半夏泻心汤单用及合用 对FD模型大鼠血浆、胃窦及下丘脑组织中胃动素（motilin , MTL含量的影 响，现报道如下。1材料与方法1.1动

2、物与分组 健康成年SD大鼠，共60只，体质量为180 250g,雌雄不拘，由安徽省全椒安立实验动物有限公司提供，实验动物生产许 可证：SCXK（苏）2002-0002。大鼠随机分为6组，每组10只，即正常对照组 （常规饲养，未作任何处理）、模型组（夹尾刺激处理造模）、西药组（造模后给予2.82g kg-1 d-1枸檬酸莫沙必利水溶液灌胃治疗，连续 7 d）、电 针组（造模后给予电针治疗）、中药组（造模后给予中药灌胃治疗）、电针加中药组（造模后给予电针及中药灌胃治疗）。 1.2 药品与仪器氨基甲酸乙酯（乌拉坦），批号960101,由上海化学试剂采购供应站提供；PCES控电针治 疗仪，由安徽中医学

3、院针灸经络研究所研制；MTLM免药盒，由解放军总医院科技开发中心放免所（原北京东亚免疫技术研究所）提供。 1.3 FD 模型复制 参照文献 3介绍的方法，采用夹尾刺激引发大鼠打斗。结果大鼠出现紧张、 焦虑反应，进食量明显减少，毛色变暗、枯黄、不顺，与上述文献报道基本一 致，说明造模成功。 1.4 中药制备 半夏泻心汤水煎剂所用中药购自安徽中医 学院第一附属医院中药房，经安徽中医学院药学院中药教研室鉴定，均为正 品。生药剂量比例按原方根据文献4方法换算，取人用剂量（3.3g/kg ）的10倍。药物以蒸储水煎煮30min,提取2次，合并煎液并过滤，水浴加热蒸发 浓缩为1g/mL,贮于冰箱中备用。造

4、模后以33g kg-1 d-1剂量开始给药，每 日 1 次灌胃，连续7 d 。 1.5 电针处理 造模后，将大鼠放置于特制的固定器内，动物保持清醒安静状态，根据" 大鼠穴位图谱" （江苏省中医药研究所华兴帮研究员等用模拟骨度法绘制而成），选取大鼠双侧"足三里"穴（ST36）为针刺穴位。实验开始时将大鼠左右后肢膝关节外下方（即腓骨小头下方）体毛除去，确定穴位（腓骨小头下方5mmt）后用苦味酸作标记，1寸毫针刺入。以 电针仪给予电刺激，频率为20100 Hz的疏密波混频刺激，输出电压 46 V,以大鼠下肢轻微颤抖为度，持续电针20min,每日1次，连续7 d

5、。1.6取材 禁食24 h ,取材前用氨基甲酸乙酯（乌拉坦）1.0g kg-1腹腔注射麻醉大 鼠后，进行标本采集。 广州中医药大学学报2007 年第 24 卷第 5 期方正清，等.电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素的影响 1.6.1 血液采集 打开 腹腔，由腹主动脉采血；取血1.5 mL 置于含 100g/L 乙二胺四乙酸二钠（ EDTA-2Nsj） 30和抑肽酶30试管中混匀，室温放置 20min, 4C、3 500r/min 离心20min,取血浆-20C保存，用于测定血浆 MTLB含量。1.6.2 胃、肠组 织采集 取近幽门部胃窦组织，用电子天平迅速称质量后以m胃组织：V生理盐水

6、二1 ： 5的比例放入煮沸的生理盐水中继续煮沸3min,加入1mol/L冰醋酸0.5mL于匀浆器中制成匀浆，放置12h,再用相应体积的1mol/L NaHCO3中 和，4C、3 000r/min离心30min,取上清液，-20C保存，用于测定胃窦组织 中MTL的含量。取空肠起始段近端肠组织，迅速称质量后制成匀浆（方法同胃 窦组织），4C、3 000r/min离心30min,取上清液，-20C保存，用于测定肠 组织中MTL的含量。1.6.3 脑组织采集快速剥离大鼠脑组织，按照文献5 所标记的相应位置，在冰盘上切取大鼠下丘脑，迅速称质量后制成匀浆（方法 同胃窦组织），于4C、3 000r/min离

7、心30min,取上清液，-20C保存，用于 测定下丘脑组织中MTL含量。1.7检测方法 采用放射免疫法检测，严格按照 试剂盒说明书方法进行。1.8统计学处理 采用SPSS for Windows 11.0软件 分析。2结果 表1结果显示，模型组血浆、胃窦组织、空肠组织、下丘脑组 织中的MTL含量下降，与正常对照组比较，差异有显著性意义（ P<0.05或P< 0.01 ）;各治疗组与模型组比较，血浆、胃窦组织、空肠组织及下丘脑组织 MTL含量均显著性升高（P<0.01 ）;电针组胃窦组织 MTL量及电针组、中药 组下丘脑组织MTL含量与电针加中药组比较，差异均有显著性意义（P&

8、lt; 0.01 ）。3 讨论FD发病机制较复杂，可能与胃动力障碍、胃感觉异常、胃肠电节律紊乱和社会 心理功能障碍等胃源性因素关系密切，其发病机制的研究焦点是胃肠动力学。 尽管FD可能为一组异常情况下的症状表现，但动力紊乱在其病理生理中具有重 要的意义。表1各组FD大鼠血浆和胃窦、空力及下丘脑组织中MTL量的比较FD患者中约50%伴有胃肠动力紊乱，有餐后胃排空迟缓和胃动力低下，或 下食管括约肌（LES压力减低，胃肌电异常（节律障碍），幽门机能不协调， 并有肠道运动或胆道运动障碍等。胃肠运动障碍在FD中的发病作用已得到肯定。研究发现在大多数哺乳动物的胃肠道壁粘膜内分泌细胞及中枢、外周和胃 肠道壁

9、内神经系统中存在MTL MTL是由22个氨基酸组成的多肽，其生理功能 是促进消化道运动，加速胃排空，对胃肠运动尤其对消化间期移g复合运动（inter digestive migrating motor complex , MMC有重要调节作用， MTL 常在MMC相达到高峰，参与 MMC相收缩，被认为是一种消化间期激素6- 8。中医学将FD归入"痞满"、"胃痛"、"嘈杂"、"胃缓”等范畴。临床上以肝 胃不和多见，故本实验选择此类模型。董建华教授9认为FD应从肝脾胃论 治，脾虚是发病的基础，肝郁是发病的条件，胃气不降是引发诸症

10、的原因。健 脾、疏肝、降胃为基本治则。半夏泻心汤是伤寒论中重要的和解方之一， 由七味药物组成，其中"半夏、干姜辛开而温，以散脾气之寒；黄苓、黄连苦泻 而寒，以降胃气之热；人参、甘草、大枣甘温调补，和脾胃，补中气，以复中 焦升降功能，此即辛开苦降甘补之法”，具有和胃降逆、开结除痞的功能，广泛 用于胃肠道疾病的治疗10。李蕙等11在实验中发现，肝胃不和型 FD 大鼠不仅存在独立的胃肠动力障碍，胃窦、十二指肠协调收缩次数也显著降 低，与胃窦、十二指肠收缩变化不一致有关，是肝胃不和型FD一个重要的影响因素，并推测胃肠MMC相异常、胃肠协调运动障碍可能是肝胃不和型FD的发病机制之一。本研究结果

11、表明，模型组大鼠血浆和下丘脑及胃肠组织内MTL含量较正常对照组显著性降低（P< 0.05或P< 0.01 ）,提示模型组大鼠胃动力障 碍，胃节律紊乱，胃动力低下；由于结肠功能紊乱，动力障碍，可表现腹泻或 便秘样结肠动力传输改变12,与李惠等的结论基本一致。电针刺激足三里 穴、中药复方半夏泻心汤灌胃可改善 FD大鼠胃肠电节律，增强FD大鼠的胃电活动，有效地改善胃、结肠动力，协调胃、结肠运动12。而电针加中药联合干预组下丘脑组织MTL含量显著性高于中药和电针单因素干预组，提示电针 和中药对FD大鼠下丘脑组织MTL的调节有协同作用。各组FD大鼠血浆和下丘 脑及胃肠组织内MTL含量的变化，

12、提示电车+和平夏泻心汤对FD大鼠胃肠电的调整作用可能是通过刺激中枢和（或）外周释放 MTL而MTL乍为调节因子可传 递信息。针刺足三里穴后，针感传入到下丘脑特定结构中的胃动素能神经元以 及相关肽能神经和神经递质，再激活外周肠神经系统胃动素能神经元，启动胃 肠运动，改善协调胃肠运动。电针足三里穴和中药复方半夏泻心汤可调整血浆、胃肠及下丘脑组织中MTLTK平，改善胃运动功能，具确切机制有待进一步 探讨。 1 Gschossmann J M， Hanag S， Holtmann G.Epidemiological trends of functional gastrointestinal disor

13、dersJ .Dig Dis Sci ， 2001， 19（ 3）：189. 2中华医学会消化病分会胃肠动力学组. 我国消化不良的诊治流程和指南 J . 中华消化杂志，2000， 20（ 4）：264. 3郭海军，林洁，李国成，等. 功能性消化不良的动物模型研究 J . 中国中西医结合消化杂志，2001， 9（3）：141. 4徐叔云 . 药理实验方法学M . 第 2 版.北京：人民卫生出版社， 1991： 1136. 5包新民，舒斯云.大鼠脑立体定位图谱M .北京：人民卫生出版社， 1991： 83. 6 Malagelada J R.Functionaldyspepsia.Insights

14、 on mechanisms and management strategiesJ .Gastroenterol Clin North Am ， 1996， 25（1）： 103. 7 Berstad A， Hausken T， Gilja O H ， et al.Ultrasonography of the human stomachJ .Scand J Gastrointerol ， 1996， 220（Suppl） ： 75. 8周吕，柯美云胃肠动力学M . 北京：科学出版社， 1999： 51. 9王长洪 . 著名中医学家董建华教授学术经验系列之一：功能性消化不良的论治经验J . 辽宁

15、中医杂志，1999， 26（ 7）：289. 10刘渡舟. 伤寒论诠解M . 天津：天津科学技术出版社，1983： 96. 11李蕙，李国成. 肝胃不和型功能性消化不良大鼠胃动素和 p 物质的表达及中药情志舒的干预作用 J . 中国中西医结合消化杂志， 2003， 11（1）： 12. 12方正清，申国明，徐颖，等. 电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃肠电图的影响 J . 安徽中医学院学报，2005， 24（ 1）： 14.功能性消化不良（functional dyspepsia , FD）是慢性持续或反复发作的上腹 痛或不适、腹胀、嗳气、早饱、厌食、恶心、呕吐、烧心、胸骨后隐痛或反胃等，

16、病程超过12 周以上，经各项检查排除器质性疾病的一组消化内科的临床症候群 1。现代医学多采用促动力药、质子泵抑制剂、粘膜保护剂和抗抑郁剂等药物治疗2，中医药多施以针灸和调理脾胃的方药，如调和脾胃之代表方剂半夏泻心汤。本研究观察了电针和半夏泻心汤单用及合用对FD模型大鼠血浆、胃窦及下丘脑组织中胃动素（motilin , MTL含量的影响，现报道如下。1材料与方法1.1动物与分组 健康成年SD大鼠，共60只，体质量为180 250g,雌雄不拘，由安徽省全椒安立实验动物有限公司提供，实验动物生产许 可证：SCXK（苏）2002-0002。大鼠随机分为6组，每组10只，即正常对照组 （常规饲养，未作任

17、何处理）、模型组（夹尾刺激处理造模）、西药组（造模后给予2.82g kg-1 d-1枸檬酸莫沙必利水溶液灌胃治疗，连续 7 d）、电 针组（造模后给予电针治疗）、中药组（造模后给予中药灌胃治疗）、电针加中药组（造模后给予电针及中药灌胃治疗）。 1.2 药品与仪器氨基甲酸乙酯（乌拉坦），批号960101,由上海化学试剂采购供应站提供；PCES控电针治 疗仪，由安徽中医学院针灸经络研究所研制；MTLM免药盒，由解放军总医院科技开发中心放免所（原北京东亚免疫技术研究所）提供。 1.3 FD 模型复制 参照文献3介绍的方法，采用夹尾刺激引发大鼠打斗。结果大鼠出现紧张、焦虑反应，进食量明显减少，毛色变暗

18、、枯黄、不顺，与上述文献报道基本一致，说明造模成功。 1.4 中药制备 半夏泻心汤水煎剂所用中药购自安徽中医学院第一附属医院中药房，经安徽中医学院药学院中药教研室鉴定，均为正品。生药剂量比例按原方根据文献4方法换算，取人用剂量（3.3g/kg ）的10倍。药物以蒸储水煎煮30min,提取2次，合并煎液并过滤，水浴加热蒸发 浓缩为1g/mL,贮于冰箱中备用。造模后以33g kg-1 d-1剂量开始给药，每 日 1 次灌胃，连续7 d 。 1.5 电针处理 造模后，将大鼠放置于特制的固定器内，动物保持清醒安静状态，根据" 大鼠穴位图谱" （江苏省中医药研究所华兴帮研究员等用模拟

19、骨度法绘制而成），选取大鼠双侧"足三里"穴（ST36）为针刺穴位。实验开始时将大鼠左右后肢膝关节外下方（即腓骨小头下方）体毛除去，确定穴位（腓骨小头下方5mmt）后用苦味酸作标记，1寸毫针刺入。以 电针仪给予电刺激，频率为20100 Hz的疏密波混频刺激，输出电压 46 V,以大鼠下肢轻微颤抖为度，持续电针20min,每日1次，连续7 d。1.6取材禁食24 h ,取材前用氨基甲酸乙酯（乌拉坦）1.0g kg-1腹腔注射麻醉大鼠 后，进行标本采集。 广州中医药大学学报2007 年第 24 卷第 5 期方正清，等.电针和半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃动素的影响 1.6.1

20、血液采集 打开 腹腔，由腹主动脉采血；取血1.5 mL 置于含 100g/L 乙二胺四乙酸二钠（ EDTA-2Naj） 30和抑肽酶30试管中混匀，室温放置 20min, 4C、3 500r/min 离心20min,取血浆-20C保存，用于测定血浆 MTLB含量。1.6.2 胃、肠组 织采集 取近幽门部胃窦组织，用电子天平迅速称质量后以m胃组织：V生理盐水二1 ： 5的比例放入煮沸的生理盐水中继续煮沸3min,加入1mol/L冰醋酸0.5mL于匀浆器中制成匀浆，放置12h,再用相应体积的1mol/L NaHCO3中 和，4C、3 000r/min离心30min,取上清液，-20C保存，用于测定

21、胃窦组织 中MTL的含量。取空肠起始段近端肠组织，迅速称质量后制成匀浆（方法同胃 窦组织），4C、3 000r/min离心30min,取上清液，-20C保存，用于测定肠 组织中MTL的含量。1.6.3 脑组织采集快速剥离大鼠脑组织，按照文献5 所标记的相应位置，在冰盘上切取大鼠下丘脑，迅速称质量后制成匀浆（方法同胃窦组织），于4C、3 000r/min离心30min,取上清液，-20C保存，用于 测定下丘脑组织中MTL含量。1.7检测方法 采用放射免疫法检测，严格按照 试剂盒说明书方法进行。 1.8 统计学处理采用 SPSS for Windows 11.0 软件分析。 2 结果 表 1 结果

22、显示，模型组血浆、胃窦组织、空肠组织、下丘脑组织中的MTL含量下降，与正常对照组比较，差异有显著性意义（P<0.05或P<0.01 ）；各治疗组与模型组比较，血浆、胃窦组织、空肠组织及下丘脑组织MTL含量均显著性升高（P<0.01 ）;电针组胃窦组织 MTL量及电针组、中药 组下丘脑组织MTL含量与电针加中药组比较，差异均有显著性意义（P< 0.01 ）。3 讨论 FD 发病机制较复杂，可能与胃动力障碍、胃感觉异常、胃肠电节律紊乱和社会心理功能障碍等胃源性因素关系密切，其发病机制的研究焦点是胃肠动力学。尽管FD可能为一组异常情况下的症状表现，但动力紊乱在其病理生理中具有

23、重要的意义。表1各组FD大鼠血浆和胃窦、空肠及下丘脑组 织中MTL含量的比较FD患者中约50%伴有胃肠动力紊乱，有餐后胃排空迟缓 和胃动力低下，或下食管括约肌（LES压力减低，胃肌电异常（节律障碍）， 幽门机能不协调，并有肠道运动或胆道运动障碍等。胃肠运动障碍在 FD中的发 病作用已得到肯定。研究发现在大多数哺乳动物的胃肠道壁粘膜内分泌细胞及 中枢、外周和胃肠道壁内神经系统中存在 MTL MTL是由22个氨基酸组成的多 肽，其生理功能是促进消化道运动，加速胃排空，对胃肠运动尤其对消化间期 移行复合运动（inter digestive migrating motor complex , MMC 有重要 调节作用，MTL常在MMC相达到高峰，参与 MMC相收缩，被认为是一种消化 问期激素6-8。中医学将FD归入"痞满"、"胃痛"、"嘈杂"、"胃缓”等范 畴。临床上以肝胃不和多见，故本实验选择此类模型。董建华教授9认为FD应从肝脾胃论治，脾虚是发病的基础，肝郁是发病的条件，胃气不降是引发 诸症的原因。健脾、疏肝、降胃为基本治则。半夏泻