4485玉米种子活力测定加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法

1、Q/LB.XXXXX-XXXXICS 65.020.20CCS B 21 37山东省地方标准DB 37/T 44852021玉米种子活力测定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法Maize seed vigour test by accelerated ageing test, cold test, cold soaking test, rupture test2021 - 12 - 29发布2022 - 01 - 29实施山东省市场监督管理局发布DB 37/T 44852021目次前言III1 范围12 规范性引用文件13 术语和定义14 缩略语25 测定原理25.1 加速老化法25.2 抗冷

2、法25.3 冷浸法25.4 破裂法36 测定方案36.1 总则36.2 样品36.3 测定平台36.4 测定条件37 试材和设备37.1 试材37.2 设备38 试验步骤48.1 加速老化法48.2 抗冷法58.3 冷浸法68.4 破裂法79 试验数据处理89.1 加速老化法89.2 抗冷法89.3 冷浸法89.4 破裂法99.5 重新试验910 结果计算和表示1010.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法1010.2 破裂法1111 结果报告11附录A（资料性） 玉米种子活力测定（加速老化法、抗冷法、冷浸法）发芽试验原始记录表12附录B（资料性） 玉米种子活力测定（破裂法）发芽试验原始记录表13附

3、录C（资料性） 玉米种子活力测定结果报告单14参考文献1516前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业分技术委员会归口。玉米种子活力测定 加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法1 范围本文件规定了玉米(Zea mays L.)种子活力测定加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法的测定原则、测定方案、测定程序和结果报告。本文件适用于普通玉米品种的种子活力测定，亦可作为特用玉米品种的种子活力测定

4、推荐方法。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T 3543.4农作物种子检验规程发芽试验GB/T 8170数值修约规则与极限数值的表示与判定GB/T 26462种子发芽纸3 术语和定义GB/T 3543.2界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 种子活力 seed vigour在广泛的田间条件下，决定种子迅速整齐出苗和长成正常幼苗潜在能力的总称。3.2 种子批 seed lo

5、t同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。来源：GB/T 3543.21995，3.1 3.3 送验样品 submitted sample送到种子检验机构检验、规定数量的样品。来源：GB/T 3543.21995，3.4 3.4 试验样品（简称“试样”） working sample在实验室中从送验样品中分出的部分样品，供测定某一检验项目之用。来源：GB/T 3543.21995，3.5 3.5 加速老化测定 accelerated aging test将试样置于高温高湿条件下进行人工老化处理，处理后进行标准发芽试验，统计正常幼苗数，计算发芽率。3.6

6、抗冷测定cold test将试样低温发芽一定时间后转适温发芽试验，定期统计正常幼苗数，计算发芽率。3.7 冷浸测定 cold soaking test将试样低温水浴处理后进行标准发芽试验，统计正常幼苗数，计算发芽率。3.8 破裂测定 rupture test在特定发芽温度下，定时统计试样种子已发生果种皮破裂和胚根鞘破裂的种子粒数，计算破裂率，包括果种皮破裂率、胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。4 缩略语下列缩略语适用于本文件。AAT: 加速老化测定（Accelerated Ageing Test）CT: 抗冷测定（Cold Test）CST: 冷浸测定（Cold Soaking

7、 Test）RT: 破裂测定（Rupture Test）TR: 果种皮破裂（Testa-pericarp Rupture）CR: 胚根鞘破裂（coleorhiza Rupture）TU: 果种皮破裂（Testa-pericarp Unrupture）TRP: 果种皮破裂率（Testa-pericarp Rupture Percentage）CRP: 胚根鞘破裂率（Coleorhiza Rupture Percentage）TRCRP：果种皮胚根鞘破裂率（(Testa-pericarp Rupture+Coleorhiza rupture) Percentage） TUP：果种皮未破裂率（Tes

8、ta-pericarp Unrupture Percentage） 5 测定原理5.1 加速老化法采用高温高湿处理种子，加速种子老化，其劣变程度在几天内相当于数月或数年之久的自然劣变程度。高活力种子经一定条件的老化处理后仍能正常发芽，低活力种子则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此，加速老化法能较好地预测田间出苗率和种子耐贮藏性。5.2 抗冷法玉米为春播喜温作物，将种子置于低温潮湿环境中处理一定时间后，移至适宜环境下生长，模拟早春田间逆境条件，观察种子发芽成苗的能力。高活力种子经一定条件的低温处理后仍能形成正常幼苗，而低活力种子则不能形成正常幼苗甚至丧失生活力。因此，抗冷法能较好地预测田间出苗率

9、。5.3 冷浸法玉米春播常遇冷害、快速吸胀及缺氧伤害等逆境胁迫。将种子浸泡在低温水中处理一定时间后，移至适宜环境下生长，模拟早春田间逆境条件，观察种子发芽成苗的能力。高活力种子由于抗逆性强仍能保持发芽力，形成正常幼苗，而低活力种子则不能形成正常幼苗甚至丧失生活力。因此，冷浸法能较好地预测田间出苗率。5.4 破裂法玉米种子发芽中伴随着果种皮破裂（胚根鞘伸长突破果种皮）和胚根鞘破裂（胚根伸长突破胚根鞘）两个连续萌发质变事件。高活力种子萌发事件发生速率快，而低活力种子发生速率慢甚至不能完成上述萌发事件。因此，破裂法能快速反映种子活力状况，较好地预测田间出苗率。6 测定方案6.1 总则在严格控制条件下

10、，对试样按模拟逆境处理、标准发芽、数据分析的程序（加速老化测定、抗冷测定、冷浸测定）和低温发芽、萌发事件统计、数据分析的程序（破裂测定）进行测定。按规定要求填报测定结果，测定报告应注明测定方案所规定的条件。6.2 样品送验样品为玉米种子，重量应不低于1000g。6.3 测定平台人工气候箱、光照培养箱、发芽室或其它能够精准控温的发芽环境。6.4 测定条件种子活力测定应在有利于正确实施测定的控制条件下进行，包括但不限于下列条件： 种子检验员具备熟悉所使用测定方法的知识和技能； 所有仪器与使用的技术相适应，并已经过定期维护、验证和校准。7 试材和设备7.1 试材7.1.1 老化盒：100mm

11、5;100mm×30mm等规格。7.1.2 尼龙网袋：150mm×100mm、400mm×150mm等规格。7.1.3 置种板：可辅助玉米种子置床，每次可平行或交错置种50粒或100粒。7.1.4 数种板：可辅助数取一定数目的玉米种子。7.1.5 塑料框架：外边框尺寸为350mm×250mm，内边框尺寸为300mm×200mm，厚为5mm，辅助砂床铺设。7.1.6 自封袋：12号（450mm×340mm）等规格。7.1.7 发芽盒（盘）：450mm×300mm×90mm等规格。7.1.8 发芽纸：GB/T 2646

12、2，380mm×255mm等规格。7.1.9 试剂药品：次氯酸钠溶液等。7.1.10 其它：其它发芽装置、温湿度计、玻璃棒、三角瓶、镊子、蒸馏水、标签纸、纱布、油性记号笔、酒精、砂子、喷壶等。7.2 设备7.2.1 人工老化处理设备：种子老化箱等。7.2.2 发芽设备：人工气候箱、光照培养箱、发芽室、恒温循环槽或其它能够精准控温发芽的设备。7.2.3 消毒干燥设备：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。8 试验步骤8.1 加速老化法8.1.1 试样准备启封后，随机数取试样净种子100粒，4次重复，共400粒。种子老化处理前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒10min，消毒后用无菌蒸馏水冲

13、洗3遍，拭去种子表面浮水，备用。包衣种子可先柔性清洗后消毒，或无须消毒处理。8.1.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸121±1高压蒸汽灭菌20min后，烘干备用；发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.1.3 加速老化测定按将种子放入老化盒或尼龙网袋中，置于种子老化箱内，控制温度在45±0.3、相对湿度不低于98%条件下，加速老化处理72h，取出，薄摊，回干（自然晾干或在不高于60的条件下烘干），备用。盖纸发芽：取2张发芽纸（380mm×255 mm），叠放入发芽盒（盘）（450 mm×300 mm×9

14、0 mm）内，加入蒸馏水，充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助平行置种，纸边距2cm2.5cm。种子置床后，加盖1张润湿的发芽纸，盖上发芽盒（盘）盖，贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息，放入人工气候箱。按照GB/T 3543.4，25±0.5标准发芽7d统计正常幼苗数，计算发芽率。卷纸发芽：用75%的酒精溶液消毒操作台，将2张发芽纸（380mm×255 mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），如：样品名称、重复编号等。发芽纸用蒸馏水充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡

15、后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5 cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好（朝向一致），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱（纸卷种孔端朝下）。按照GB/T 3543.4，25±0.5标准发芽7d统计正常幼苗数，计算发芽率。同时按照GB/T 3543.4，对未老化处理种子进行标准发芽测定，25±0.5标准发芽7 d统计正常幼苗数，计算发芽率。8.1.4 检查管理在种子老化处理和发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有老化处理及发芽条件。老化36

16、h和发芽4d时分别检查1次老化和发芽环境，若有问题及时进行相应维护。老化处理：温度和湿度检测；温度保持在45±0.3范围，相对湿度不低于98%。发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：温度保持在25±0.5范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。8.1.5 数据记录按照GB/T 3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.2 抗冷法8.2.1 试样准备启封后，随机数取试样净

17、种子100粒，4次重复，共400粒。种子低温发芽前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒10min，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣后消毒，或无须消毒处理。8.2.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸121±1高压蒸汽灭菌20min后，烘干备用。发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。砂子：砂子清洗后，平铺于搪瓷盘内放入电热鼓风干燥箱130±3高温烘干灭菌4 h，冷却后用孔径2.0mm筛子过筛，除杂质，备用。8.2.3 抗冷测定按采取卷纸、纸砂上或纸砂间置床方式对玉米种子进行抗冷测定。卷纸发芽：

18、用75%的酒精溶液消毒操作台，将2张发芽纸（380mm×255 mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），如：样品名称、重复编号等。用蒸馏水充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5 cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）疏松卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好（朝向一致），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱中（纸卷种孔端朝下），10±0.5避光发芽7d后，转25±0.5发芽4d（12h光暗交

19、替）统计正常幼苗数，计算发芽率。纸砂上：取2张发芽纸（380mm×255mm），叠放入发芽盒（盘）（450mm×300mm×90 mm）内，加入蒸馏水，充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，塑料框架辅助砂床铺设（取湿砂置塑料框架内，整平床面），床厚5mm，置种板辅助平行置种，种胚与砂床紧密接触，种孔朝向一致，纸边距5 cm，种子置床后加盖湿砂，整平床面，盖上发芽盒（盘）盖，放入人工气候箱，10±0.5避光发芽7d后，转25±0.5发芽4d（12h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。纸砂间：用75%的酒精溶液消毒操作台，将2张发芽

20、纸（380mm×255 mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），用蒸馏水充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，塑料框架辅助砂床铺设（取湿砂置塑料框架内，整平床面），床厚5mm，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）疏松卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好（朝向一致），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱中（纸卷种孔端朝下），10 ±0.5避光发芽7d后，转25±0.5发芽4d（1

21、2h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。8.2.4 检查管理在种子发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有发芽条件。10±0.5发芽4 d和25±0.5发芽2d分别检查1次发芽环境，若有问题及时进行相应维护。发芽床检查：发芽床始终保持发芽床湿润。发芽温度检查：低温发芽温度保持在10±0.5范围内，适温发芽温度保持在25±0.5范围内。种子检查：适温发芽期间发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5 %时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响检测结果。如发现腐烂死亡种子，应及时去除并做好相应记载。8.2.5 数据记录按照GB/T 3543.4中正常幼苗、

22、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.3 冷浸法8.3.1 试样准备启封后，随机数取试样净种子100粒，4次重复，共400粒。种子冷浸处理前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒10 min，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或无须消毒处理。8.3.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸121±1高压蒸汽灭菌20min后，烘干备用。发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.3.3 冷浸测定采取纸间（卷纸）置床方式对玉米种子进行冷浸测定。可以

23、选择置床前冷浸或置床后冷浸。置床前冷浸处理：将试样装入尼龙网袋，并在信息牌上用油性记号笔标识信息后，放入恒温循环槽或塑料箱（加入足量蒸馏水提前放入人工气候箱）在4±0.5冷浸处理3 d。处理结束后取出，拭去种子表面浮水后，备用。将2张发芽纸（380mm×255mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），用蒸馏水充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）疏松卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好（朝向一致

24、），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱（纸卷种孔端朝下），25±0.5发芽7d（12h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。置床后冷浸处理：将2张发芽纸（380mm×255mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），用蒸馏水充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）疏松卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住，放入尼龙网袋中，封口放入恒温循环槽或塑料箱（加入足量蒸馏水提前放入人工气候箱）内4&#

25、177;0.5冷浸处理3 d。处理结束后，将纸卷除去余液后放入自封袋密封好（朝向一致），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱（纸卷种孔端朝下），25±0.5发芽7d（12h光暗交替）统计正常幼苗数，计算发芽率。8.3.4 检查管理在种子冷浸和发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有冷浸和发芽条件。冷浸1d和发芽4 d分别检查1次冷浸和发芽环境，若有问题及时进行相应维护。发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：冷浸温度保持在4±0.5范围内，发芽温度保持在25±0.5范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超

26、过5%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。8.3.5 数据记录按照GB/T 3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计，根据正常幼苗数，计算发芽率。8.4 破裂法8.4.1 试样准备启封后，随机数取试样净种子100粒，4次重复，共400粒。种子低温发芽前用1.0 %的次氯酸钠溶液浸泡消毒10min，消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍，拭去种子表面浮水后，备用。包衣种子可先柔性清洗表面包衣然后消毒，或无须消毒处理。8.4.2 试验材料准备发芽纸：将发芽纸121±1高压蒸汽灭菌20min后，烘

27、干备用；发芽盒（盘）：将发芽盒（盘）清洗干净后，用75%的酒精溶液擦拭消毒，风干备用。8.4.3 破裂测定采取纸间（盖纸和卷纸）置床方式对玉米种子进行破裂测定。破裂测定发芽温度：15±0.5或20±0.5。15：置床120h±15 min（5d±15min）统计果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数。20：置床72h±15 min（3d±15min）统计果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数。盖纸发芽：取2张发芽纸（380 mm×255 mm），叠放入发芽盒（盘）（450 mm×30

28、0 mm×90 mm）内，加入蒸馏水，充分润湿，用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助平行置种，纸边距2cm2.5cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，盖上发芽盒（盘）盖，贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息，放入人工气候箱，根据所选发芽温度，定时统计各重复果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数，计算果种皮破裂率、胚根鞘破裂率和果种皮胚根鞘破裂率。卷纸发芽：用75 %的酒精溶液消毒操作台，将2张发芽纸（380mm×255mm）叠放好，用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息（或备样品信息防水条），用蒸馏水充分润湿，

29、用无菌纱布轻拭床面，除去余液和纸间气泡后，置种板辅助交错置种，种孔朝向一致，纸边距5cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸，将纸床（或夹样品信息防水条）疏松卷起，纸卷两端整平，并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好（朝向一致），在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后，垂直放入人工气候箱（纸卷种孔端朝下），根据所选发芽温度，定时统计各重复果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数，计算果种皮破裂率、胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。8.4.4 检查管理在种子发芽期间，应进行适当的检查管理，以维持原有发芽条件。发芽2 d检查1次发芽环境，若有问题及时进行相应维护。

30、发芽床检查：发芽床始终保持湿润。发芽温度检查：发芽温度保持在选定测定温度（15±0.5或20±0.5）范围内。种子检查：发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时，应更换发芽床，以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子，应及时去除并做好相应记载。8.4.5 数据记录按照表1玉米种子活力测定破裂法鉴定标准对果种皮破裂、胚根鞘破裂和果种皮未破裂事件进行鉴定，定时统计各重复果种皮破裂种子数、胚根鞘破裂种子数和果种皮未破裂种子数，计算果种皮破裂率、胚根鞘破裂率、果种皮胚根鞘破裂率和果种皮未破裂率。表1 玉米种子活力测定破裂法鉴定标准萌发事件类型表型果种皮破裂果种皮

31、发生破裂（主要归因于胚根鞘膨胀伸长生长，突破果种皮束缚）。胚根鞘破裂胚根鞘破裂和胚根伸出（主要归因于胚根鞘弱化或胚根伸长生长；胚根鞘侧面有明显V型开裂）。果种皮未破裂种子吸胀，伴随覆胚果种皮凸起，但果种皮未发生破裂。9 试验数据处理9.1 加速老化法分别计算加速老化测定各重复（100粒种子）的发芽率，按照GB/T 8170，求得四次重复的平均值，记为加速老化发芽率；标准发芽条件下未老化处理试样四次重复发芽率的平均值记为标准发芽率；加速老化发芽率与标准发芽率的比值记为加速老化相对发芽率。加速老化发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×100%标准发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）

32、15;100%加速老化相对发芽率=（加速老化发芽率/标准发芽率）×100%种子批的标准发芽率和加速老化相对发芽率均较高时，表明种子批的种子活力较高，耐贮藏能力强，反之则弱。依照加速老化相对发芽率大小可将玉米种子耐贮藏性分为耐（A）、中耐（B）、弱（C）、不耐（D）4个等级。玉米种子批耐贮藏性评价见表2。表2 玉米种子批耐贮藏性评价加速老化相对发芽率%耐贮藏性分级耐贮藏性等级85100耐A级6584中耐B级3064弱C级029不耐D级9.2 抗冷法分别计算抗冷测定各重复（100粒种子）的发芽率，按照GB/T 8170，求得四次重复的平均值，记为抗冷测定发芽率。抗冷测定发芽率=（正常幼苗

33、数/供检种子粒数）×100%9.3 冷浸法分别计算冷浸测定各重复（100粒种子）的发芽率，按照GB/T 8170，求得四次重复的平均值，记为冷浸发芽率。冷浸发芽率=（正常幼苗数/供检种子粒数）×100%9.4 破裂法分别计算破裂测定各重复（100粒种子）的果种皮破裂率（TRP）、胚根鞘破裂率（CRP）、（果种皮胚根鞘破裂率（TRCRP）和果种皮未破裂率（TUP），按照GB/T 8170，求得四次重复的平均值，通过CRP和TRCRP指标评价种子活力。果种皮破裂率=(果种皮破裂种子数/供检种子粒数)×100% 胚根鞘破裂率=(胚根鞘破裂种子数/供检种子粒数)×

34、;100%果种皮胚根鞘破裂率=(果种皮破裂种子数+胚根鞘破裂种子数)/供检种子总数×100%果种皮未破裂率=(果种皮未破裂种子数/供检种子粒数)×100%9.5 重新试验参考GB/T 3543.4，当试验出现下列情况时，应重新试验。由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可选择上述其他种子活力测定方法采用纸砂上或纸砂间进行重新试验。如有必要，应增加种子之间的距离。当正确鉴定幼苗数有困难时，可选择上述其他种子活力测定方法采用纸砂上或纸砂间进行重新试验。当发现实验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法进行重新试验。当一次试验的四次重复间的差距超过表3最大容许差距时，

35、应采用同样的方法进行重新试验。如果第二次结果与第一次结果相一致，即其差异不超过表4中所示的容许差距，则将两次试验的平均数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合，其差异超过表4所示的容许差距，则采用同样的方法进行第三次试验，填报符合要求的结果平均数。表3 同一发芽试验四次重复间的最大容许差距（2.5%显著水平的两尾测定）平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下99259836974796589569939478109192910118990111212878813141384861517148183182015788021231673772428176772293418566635

36、45195155465020表4 同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间发芽试验的容许差距（2.5%显著水平的两尾测定）平均发芽率最大容许差距50%以上50%以下989923295974639194710485901116577841724660762541751594250810 结果计算和表示10.1 加速老化法、抗冷法、冷浸法按照GB/T 3543.4，对试样的测定结果进行填报。正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗、和死种子的百分率按四次重复平均数计算。正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗、和死种子的百分率总和必须为100（玉米种子活力测定种苗鉴定标准见表5），平均数百分率

37、修约到最近似的整数，修约0.5进入最大值中。表5 玉米种子活力测定种苗鉴定标准（简化版）类型组织器官表型正常幼苗1、根系初生根完整或带有轻微缺陷，如褪色、有坏死斑点、开裂已愈合；若初生根有缺陷，则次生根正常并有足够的数目。2、中胚轴完整或带有轻微缺陷，如褪色、有坏死斑点、开裂已愈合、稍有弯曲。3、芽鞘完整或带有轻微缺陷，如褪色、有坏死斑点、稍有弯曲、从顶端开裂少于或等于总长度的1/3。4、第一片叶完整、近芽鞘顶端伸出，至少达长度的1/2，或带有轻微缺陷，如褪色、有坏死斑点、轻微损伤。不正常幼苗1、根系初生根有缺陷，如停滞、缺失、收缩、由初生感染引起的腐烂。2、中胚轴形成环状、螺旋形、严重卷曲，

38、由初生感染引起的腐烂。3、芽鞘顶端损伤、缺失，形成环状或螺旋形，严重卷曲或弯曲，纤细、基部开裂，从顶端开裂并超过总长度的1/3。4、第一片叶叶片缺失，延伸长度不及芽鞘长度的1/2，撕裂或其他畸形。5、幼苗两株连生在一起，先长芽鞘后长根，由初生感染引起的腐烂。新鲜不发芽种子、硬实和死种子在测定末期，未产生发芽迹象的种子。10.2 破裂法参考GB/T 3543.4，对试样的测定结果进行填报。果种皮破裂种子、胚根鞘破裂种子和果种皮未破裂种子的百分率按四次重复平均数计算。基于果种皮破裂种子和胚根鞘破裂种子的百分率计算果种皮胚根鞘破裂种子的百分率。果种皮破裂种子、胚根鞘破裂种子和果种皮未破裂种子的百分率

39、总和必须为100（玉米种子活力测定破裂法鉴定标准见表1），平均数百分率修约到最近似的整数，修约0.5进入最大值中。11 结果报告11.1 种子活力测定结果报告应包含以下信息： 标题； 测定机构的名称与地址，进行测定的地点； 测定证书或报告的唯一性标识和每页及总页数的标识； 委托方的名称和地址； 被测定种子样品的说明和明确标识； 测定种子样品的特性和状态； 测定种子样品的接收和进行测定的日期； 对所采用测定方法的标识的明确说明； 涉及的扦样程序； 对测定方法的任何偏离、增加或减少以及其他任何与特定的检验有关的信息； 测定、检查和导出的结果，以及对结果失效的证明； 对估算的测定结果不确定度的说明； 对测定证书或报告内容负责人员的签字、职务或等效标识，以及签发日期； 委托测定，作出本结果仅对所测定样品有效的声明； 未经测定机构书面批准，不得复制测定证书或报告（完整复制除外）的声明。11.2 玉米种子活力测定（加速老化法、抗冷法、冷浸法）发芽试验原始记录表编写格式可参考附录A。填报测定结果时，须填报正常幼苗、新