山茱萸炮制品探讨论文

1、编号：时间：2021年X月X日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟 页码：第1页共6页山茱萸炮制品探讨论文【摘要】目的比较山茱萸不同炮制品中马钱素含量。方法高效液相色谱 法。结果各炮制品中的马钱素含量相对于生品含量有所降低。结论不同的炮制方 法对山茱萸中的马钱素含量有明显影响。【关键词】山茱萸；炮制；马钱素；高效液相色谱法TheComparisonoftheContentsofLoganininFructusCornibyDifferentProcesses Keywords： FructusCorni;Process;Loganin;HPLC山茱萸具有补益肝肾、涩经固脱之功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸

2、痛、 阳痿遗精、遗尿、尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症，是成药六味地黄 丸、八味地黄丸等的重要原料。目前认为山茱萸中所含的熊果酸、齐墩果酸、山 茱萸昔、马钱素、没食子酸、莫诺甘等为其主要活性成分1,具有降低血糖、 增强免疫、利尿、降压、抗炎等药理作用2。中国药典2005版规定测定马 钱素含量作为山茱萸药材质量控制指标3o山茱萸临床和入中成药多用其炮制 品，并认为山茱萸生用以敛阴止汗力强，蒸制后以补肾涩精，固精缩尿力胜，酒 炙后借酒力温通，助药势，降低其酸性，滋补作用强4。马钱素作为山茱萸中 水溶性有效成分之一，其结构属于环烯醛葩昔类成分，炮制加热和加辅料对其含 量肯定有一定影响，但目前尚

3、未见到有关报道。本研究以马钱素为考察指标，比 较不同炮制方法对其含量的影响，以期为制定山茱萸合理的炮制工艺提供实验依 据。1.1 仪器与试剂BS210S型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）;高效液相色谱仪:LC-2010A（SHIMADZU）；检测器 SPD-M10A；工作站:Class-VP； H66025T超声清洗机（无锡超声电子设备厂）；101A-2型干燥箱（中华人民共和 国上海市实验仪器总厂）；LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸气灭菌器（上海申安 医疗器械厂）。马钱素对照品（由北京格润得科技公司提供，纯度在98%以上）; 黄酒（河南濮阳亚光酒厂）；甲醇（天津四友生物有限公司）、乙

4、腾（杭州白林）为 色谱纯；氯仿、无水乙醇等均为分析纯。1.2 药材山宛西制药股份公司提供，产于河南西峡县山茱萸GAP种植 基地，经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定为山茱萸科植物山茱萸 CornusofficinalisSiet.etZncc.的干燥成熟果肉。2方法2.1 样品制备根据中国药典净制要求，取山茱萸样品，除去杂质和 残留的果梗和核，即为净山茱萸，再按不同炮制方法的要求炮制成为以下实验样 品。2.1.1 生品取山茱萸样品，除去杂质和残留的果梗和核，放置备用。2.1.2 加压酒蒸品取净山茱萸100g,缓慢加入40ml黄酒搅拌均匀，加 盖密闭闷润20min后将样品放入压力锅中蒸制，待温度

5、升至115后，保持该温 度lh,取出摊于瓷盘中，于烘箱中80c烘3h至干，取出，置干燥器中放凉备用。2.1.3 酒蒸品取净山茱萸100g,缓慢加入40ml黄酒搅拌均匀，加盖闷 润40min,置于滤布上摊开，放在蒸笼上蒸3h后，于烘箱中80c烘3h至干， 取出，置干燥器中放凉备用。2.1.4 酒炖品取净山茱萸100g,缓慢加入20ml黄酒搅拌均匀，加盖闷润 60min,置不锈钢锅中，隔水炖3h,摊于瓷盘中，于烘箱中80c烘3h至干，取 出，置干燥器中放凉备用。2.1.5 清蒸品取净山茱萸100g,置于滤布上摊开，放在蒸笼上蒸3h后， 取出摊于瓷盘中，于烘箱中80c烘3h至干，取出，放于干燥器中放

6、凉备用。2.2 山茱萸不同炮制品中水分含量比较按照中国药典规定方法3 分别称取山茱萸炮制品粗粉3g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定， 打开瓶盖，在105c干燥5h,将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30min,精密称 定重量，再在上述温度干燥lh,冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg 为止。根据减失的重量，计算山茱萸不同炮制品中水分的含量。结果见表1。表 1山茱萸不同炮制品中水分的含量结果（略）从山茱萸不同炮制品中水分含量可以看出，所有炮制品中含水量都在 7%13%以内，符合中国药典规定。此外，实验中所有炮制样品中的马钱素 含量都按干燥品计算。2.3 HPLC法测定马钱素含量2.

7、3.1 色谱条件色谱柱为ODS柱4.6mmx250mm（大连依利特）；乙月青-水 （15 : 85）为流动相；检测波长240nm：柱温25：流速lml/min：分析时间20mino2.3.2 对照品溶液的制备精密称取马钱素对照品0.46mg置2ml容量瓶 中，加甲醇（色谱纯）使溶解并定容至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤（0.45nm）,即得 浓度为0.23mg ml-l马钱素对照品溶液。233标准曲线绘制依次自动进样马钱素对照品溶液1, 3, 5, 7, 9川 于高效液相色谱仪中，按上述色谱条件测定，并对结果进行分析。以峰面积积分 值为纵坐标，对照品含量为横坐标，绘制标准曲线。回归方程为： Y=12

8、74329.13X-17626.1, r=0.9999。结果表明在0.231.15由范围线性关系良好。 见表2和图1。表2山茱萸马钱素标准曲线数据（略）2.3.4 精密度实验连续自动进样马钱素对照品溶液53，按前述条件测 定峰面积积分值,计算RSD值,结果表明精密度良好RSD=0.097%°结果见表3。 表3精密度考察结果（略）2.3.5 稳定性实验分别在0, 2, 4, 6, 8, 10h自动进样马钱素对照品 溶液5必照前述色谱条件测定峰面积积分值计算RSD值，结果表明马钱素在10h 内稳定性良好,RSD=0.15%。结果见表4。表4稳定性考察结果（略）236重复性实验称取山茱萸同

9、一样品粗粉5份各约1g,精密称定，按 照供试品溶液制备方法和色谱条件，制备供试品溶液并注入高效液相仪，计算含 量，RSD=1.63%o结果见表5。表5重复性实验结果（略）2.3.7 加样回收率实验取已知马钱素含量的山茱萸粉末约0.5g,精密称 定，共5份，分别加入马钱素对照品，以下按供试品溶液制备项下操作，得到5 份加样回收供试液。自动进样各加样供试液103,测定，用外标法根据峰面积积 分值进行计算。结果见表6。表6加样回收率实验结果（略）每份加入对照品4.040mg,样品含量8.0810mg g-lo238供试品溶液的制备各取样品粗粉约1g,精密称定，置具塞三角瓶 中，加入30%甲醇10ml

10、,超声提取15min,倾出上清液抽滤，重复上述操作4 次，用适量30%甲醇清洗残渣，合并滤液，定容至50ml容量瓶中，摇匀，作为供 试品溶液。2.3.9 样品含量测定取各供试品溶液分别自动进样53，测定马钱素峰 面积积分值，计算样品含量。对照品和样品色谱图见图24。结果见表7。表7 不同炮制品中的马钱素含量(略)熊果酸含量和马钱素含量均是以干燥品计，且是两次测定的平均值从表7可知，马钱素含量相对于生品含量均有所降低，由高到低依次 为生品 酒炖品加压酒蒸品酒蒸品 清蒸品。3讨论3.1 山茱萸由于药用历史悠久，炮制方法较多，本实验所采取的是临床 常用的炮制方法，加压酒蒸、清蒸、酒炖、酒蒸等炮制工艺

11、中的加酒量、闷润时 间、炮制时间，均经正交实验优选确定。由于实验内容较多，篇幅所限，正交实 验的研究过程没有报道。3.2 实验结果表明，不同炮制方法和加入的辅料对马钱素含量有一定影 响，其炮制品中马钱素含量相对于生品均有所降低，且以清蒸品含量最低。马钱 素含量降低的原因可能是马钱素属于环烯酸苗首类，在一定条件下易发生水解, 炮制加热和加入辅料对其能产生一定影响的缘故。3.3 据药理作用研究表明，山茱萸具有免疫调节、抗炎、抗休克、降糖、 强心作用，其不同成分具有不同的免疫药理活性4。其中熊果酸体外具有一定 的促进免疫效应，并有抑菌、安定、降温和抗糖尿病等作用1:马钱素在低浓 度(0.016m g/m 1 )时有促进淋巴细胞转化作用而高浓度(0.500m g/m 1 )时则有 抑制作用，提示马钱素对免疫反应有双向调节作用5o本研究以马钱素作为山 茱萸不同样品的考察指标，正是以其药理作用为依据的，山茱萸炮制前后马钱素 含量的变化，对其药理作用肯定有影响，其具体量 效关系有待于进一步研究。【