HIV测定胶体金法标准操作规程

1、南宁市红十字会医院检验科 HIV筛查实验室文件编号：第1页共3页HIV测定（英科新创、胶体金法）标准操作规程2011年10月版第0次修订实施日期：2011年10月18日1、检验目的用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的 HIV 1/2型抗体。2、原理采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV 1/2型抗体。检测随性样本时，样本中的 HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物 沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体 金标记重组抗原则在对照线处与抗 HIV单克隆抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处 显

2、色，30分钟内观察结果即可。3、性能参数用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定 性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病 患者等各种类型的血清不得引起干扰。本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不 到准确的结果。对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：测定物质名称测定的浓度测定物质名称测定的浓度胆固醇一<200 mg/ml血红蛋白< 178 g/L甘油三醋<200 mg/ml胆红素< 16 mg/L4、标本要求标本类型：血清或血浆，血浆样本对临

3、床常用抗凝剂（ EDTA肝素、枸檬酸钠）无要求。标本采集：见标本采集手册。标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后 7天内检测，样品须放在28c保存，如果 大于7天则须冷冻保存；全血标本建议在 3天内检测，样品放在28c保存，不得冻存。 标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。5、容器和添加剂类型使用一般干燥管（不添加任何东西），或EDTA柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。6、贮存条件及有效期储存条件：4-30 C密封干燥处保存，有效期为16个月。南宁市红十字会医院检验科文件编号：精选HIV筛查实验室第2页共3页HIV测定(万泰、胶体金法)标准操作规程2011年10月版第0次修订

4、实施日期：2011年10月18日7、操作步骤【血清、血浆样本】(1)将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。(2)将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。(3)用微量加样器取60ul血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。(4)加样后阳性标本可在130分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过 30分钟将对实验 结果的观察造成影响，因此，建议 30分钟内最终观察并记录实验结果。【全血】(1)将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。(2)将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。(3)用微量加样器取60ul全血样本，加

5、到试剂卡的加样处，随即加一滴金标全血样本稀释液。(4)加样后阳性标本可在130分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过 30分钟将对实验 结果的观察造成影响，因此，建议 30分钟内最终观察并记录实验结果。【结果判定】阳性：测试条/卡在检测区(T)和对照区(C)位置各出现一条紫红色条带。如果检测区(T)的紫 红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。阴性：测试条/卡只在对照区(C)位置出现一条紫红色条带。失效：对照区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏或者是样本中 抗体的含量过高。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并将待测样本稀释后用新的测 试条/卡重新

6、测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与试剂供应商联 系。【注意事项】检测线颜色深浅的程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。测试区(T)内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象，但是，在规定的观察时间内，无论该色带颜色深浅，即使只 有非常弱的色带，也应判定为阳性结果。本品检测随性者，需进一步确证。实验环境应保持一定的湿度，避风。避免在高温下进行实验。测试条从包装中取出后，应 尽快进行实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。南宁市红十字会医院检验科 HIV筛查实验室文件编号：第3页共3页精选HIV测定（万泰、胶体金法）标准操作规程2011年10月版第0次修订实施日期：2011年10月18日8、质量控制：阴性对照显示为阴性；阳性对照显示为阳性。9、临床意义：监测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体，用于帮助检测受感染个体的 HIV-1和HIV-2抗 体。本品检测阳性者，需进一步确证。10、其它注意事项必须按规定使用经中国药品生物制