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文档简介
1、体 外 受 精 和 早 期 胚 胎 培 养学习目标:1、简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2、简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3、认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。学习重点1、体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。2、哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。学习难点1、卵母细胞的采集和培养。2、精子的采集和获能。学习过程知识点观察与思考归纳与结论试管动物技术思考:试管动物技术的概念试管动物技术是指通过并通过O一、从试管牛说起阅读P69,思考讨论:体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义二、1、卵母细胞的采(1)主要方法是:处理,体外受精集和培养仔细阅读P70,思考讨论:(1)卵母细胞的采集和培
2、养的主要方法是什么?其它方法如何?,然后,从 ,直 接 与0(2) 第二种方法:从刚直接从 , 叫 。需 借 助。 采集的,都要在体外经后,才能与受精。2、精子的采集和获能仔细阅读P71,思考讨论:(1)收集精子 的方法有几 种?各有什 么具体要 求?(2)精子 的获能方法 通常包括哪(1)A : ,米用的方法,模仿设计的装置,它能够满足B要求,同时配有相适应的 B: ,只适用于猪和犬等体型较小,易于控制的 家畜。C: 这种方法多用于野生或经济动物。(2)在体外受精前,要对精子进行获能处理。对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精几种?具体操作如何?子,一般采用,即将取自附睾的精子,放入中,培养一段时
3、间后,精子就可获能;对于牛、羊等家畜的精子常采用,即将精子放在O3、小仔细阅读P72图3-14,思考受精过程简单绘制“哺乳动物体外受精不意图”:三、胚胎 的早期培 养仔细阅读P72-73,思考讨论:1、哺乳动物胚胎培养液 的成分如 何?2、牛体外受精胚胎工厂 化生产流程 图1、精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入中继续培养,以检查的发育能力。培养液成分较复杂,除和外, 还需添加等营养成分,以及等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取出向 移植或O不同动物胚胎移植的时间不同。2、绘制流程图:3、思考讨论: 比较哺乳动 物体内胚胎 的形成、体外 胚胎的发育 各需要完成哪些环节?3、体内胚胎形成
4、需要经过:> 和;体外胚胎的发育需要完成: 、 和O巩固练习:1 .中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作,通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵细胞中,在世界上最早克隆出一大批大熊猫早期胚胎,表明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。 下列描述与克隆无关的是()C.组织培养D.人类基因.注射促性腺激素.以上方法均不正确A. “复制”B,无性繁殖组计划2 .超数排卵的做法正确的是()A. 口服促性腺激素BC. 口服或注射促性腺激素D3.胚胎早期培养需要用液体培养基,此培养液的成分是 ()A.水、无机盐、维生素、激素、有机盐、氨基酸、核甘酸、血清等B.蔗糖、水、无机盐、维生素、激素C.蔗糖、
5、水、无机盐、氨基酸、核甘酸、血清D.水、无机盐、维生素、有机盐、淀粉等4 .下列关于屠宰场和“胚胎工厂”合建的说法正确的是 () 可保证屠宰场的肉是鲜肉,防止实验过长,肉变质有利于生产大 量的胚胎和胚胎工程所需要的原材料 不够卫生,不能合建从屠宰场废弃的卵巢中可直接获取卵细胞A.B . C . D .5 .下列关于培育试管婴儿的叙述,不正确的是 ()A.培育试管婴儿要进行体外受精过程B .试管婴儿的发育场所主要在试管内C.试管婴儿的发育场所主要在母体内D .试管婴儿具有双亲的遗传特性6 .卵母细胞的采集之前,用 处理雌性个体,使其排出更多的卵子,然后,从输卵管中冲取卵子,又叫 。收集精子的方法
6、有 法、法和法等。答案:促性腺激素冲卵 假阴道 手握 电刺激7 .在体外受精前,要对精子进行获能处理。通常采用的方法有? 两种,其中后者是将精子放在一定浓度的中,用化学药物诱导精子获能。答案:培养化学诱导肝素或钙离子载体A23187溶液8 .胚胎发育到适宜的阶段时,将其取出向 或答案:受体移植冷冻保存拓展题9 .以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程,其中正确的顺序是()卵母细胞的采集和培养精子的采集和获能画出“试管牛”工厂化生产技术流程受精 胚胎的早期培养A.B . C . D .10 .哺乳动物胚胎的早期培养所用培养液成分一般都比较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加 、?
7、 等营养成分,以及等物质。答案:维生素 激素 氨基酸 核甘酸 血清知识拓展:何谓试管婴儿技术“试管婴儿”是指分别将卵子与精子取出后,在体外(培养皿中) 使其受精,并发育成胚胎后,再植回母体子宫内。因此,胚胎在体外 培养的时间只有几天,最重要的目的是确定精卵能结合成功, 并筛选 好的胚胎植回母体,以增加怀孕成功的机会。“试管婴儿”技术主要包括:1.超排卵 2 .卵泡监测 3 .取卵手术 4 .精卵体外处理 5.体外受精6.胚胎的体外培养7 .胚胎移植“试管婴儿”技术是一项高、精、尖技术,需要具备一组有经验及专门技术的人员,一定的仪器,必需的药品。 “试管婴儿”费用包括 药物费用及手术费用,由于促
8、排卵的药品费用较高,卵子受精、胚胎 发育所需外界条件高,所以做一例“试管婴儿”的费用也较高。因为 每一名患者所用的药物剂量不同,所以每个做IVF的患者所需的费用 也有所不同,一般来讲,年龄轻、卵巢反应性好的患者需要的费用较 低,具体费用应向生殖医学中心的医生咨询。“试管婴儿”的成功率是大家非常关心的一个问题,一般情况下, 一对正常育龄夫妻每月的自然妊娠机率不超过 27%通俗一点,就是 说每对夫妇不是每个月想要小宝宝都能得到的。同样“试管婴儿”也 不是每个治疗周期都会成功,我所目前“试管婴儿”的成功率为37% 这一比例在国内居领先水平。国外好的辅助生殖中心“试管婴儿”的 成功率一般为3040%目
9、前“试管婴儿”技术可帮助几乎所有类型的不孕症患者,但由于 其费用较高,尚难以在国内普及,但我们认为如果存在需要进行“试 管婴儿”技术助孕的特征,应及早来辅助生殖中心诊治,以提高其成 功率。胚胎冷冻保存胚胎冷冻保存: 要建立胚胎库和长途运送胚胎,就需要解决胚胎冷 冻保存问题。冷冻保存的方法大体可分为缓慢冷冻、快速冷冻、玻璃 化冷冻三类。快速冷冻的主要操作过程如下:1 .冷冻液:一般用加有10%20%的胎犊血清(FCS)的杜氏磷酸盐 缓冲液(PBS)来配制,防冻剂可采用甘油或二甲亚枫(DMS滤。也可 用1摩尔浓度的甘油作为冷冻液。2 .冷冻:将胚胎洗净后置于1摩尔浓度的甘油溶液中,在室温下平 衡10分钟,用O. 25毫升细管包装胚胎,用聚乙醇粉末封口。细管 放人0c冷冻仪,以1C/分钟速度降温,7c诱发结晶(用在液氮 中冷却的镣子夹细管含胚段上端 1/3处)。随后将冷冻仪以0. 5c
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