微生物的分离纯化_第1页
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文档简介

1、微生物的分离纯化 含有一种以上的培养物称为混合培养物（mixedculture)。假如在一个菌落中全部均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（pureculture）在举行菌种鉴定时，所用的微生物普通均要求为纯的培养物得到纯培养的过程称为分别纯化，办法有许多种。 (1)稀释倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在1050的养分琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。 (2）稀释涂布平板法 首先把微生物悬液通过适当

2、的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液匀称地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。 (3)平板划线法 最容易而常用的分别微生物的办法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上举行划线。划线的办法无数，频繁的比较简单浮现单个菌落的划线办法有斜线法、曲线法、方格法、发射法、四格法等（图2-22)。当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，最后在所划的线上簇拥着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。 (4)富集培养法 富集培养法的办法和原理十分容易。我们可以制造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生

3、物能有效地与其他微生物举行竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。所制造的条件包括挑选最适的碳源、能源、温度、光、ph渗透压和氢受体等。在相同的培养基和培养条件下，经过多次重复移种最后富集的菌株很简单在固体培养基上长出单菌落。假如要分别一些专性寄生菌，就必需把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。 (5)厌氧法 在试验室中，为了分别某些厌氧菌，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。然后迅速冷却，并举行接种。接种后，加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。另一种办法是，在接种后，利用n2或co2取代培养基中的气体，然后在火焰上把试管口密封。有时为了更有效地分别某些厌氧菌，可以把所分别的样品接种于培养基上，然后再把培养皿

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