人类白细胞抗原分型

1、第二十七章人类白细胞抗原分型Chapter27HumanLeukocyteAntigenTyping第一部分教学内容和要求一、目的要求掌握：HLA血清学分型和细胞学分型的方法类型、原理和用途；熟悉：基因分型技术的方法类型、原理和用途；了解：HLA血清学分型的技术要点。二、教学内容1 .血清学分型法：原理，实验流程与结果判断，技术要点，方法评价。2 .细胞分型法：阴性分型法，阳性分型法。3 .基因分型技术：PCR-序列特异性引物分型法，PCR-序列特异性寡核甘酸探针杂交法，PCR-序列测定法,PCR-限制性片段长度多态性分析法。第二部分测试题、选择题（一）单项选择题（A型题）1 .微量补体依赖的

2、细胞毒试验中所用的补体为A.豚鼠血清2 .HLA-I类抗原血清学分型主要应用的试验A.微量补体依赖的细胞毒试验D.溶血空斑试验.T淋巴细胞增殖试验.混合淋巴细胞培养C .T细胞介导的细胞毒试验3 .不表达HLAI类抗原的细胞是A.淋巴细胞B.成熟红细胞C.血小板D.脾细胞E.粒细胞4 .编码HLA-I类分子的基因位点有A. HLA A、B 位点D. HLA DR、DP、DQ 位点B. HLA A、B、C 位点C. HLA DR 位点E. C4、C2、TNF位点5 .最容易发现HLA新基因的方法是A. CDC试验B. MLRC.PCR-SSPD . PCR-SSOE. PCR-测序6 .CDC试

3、验观察结果用A.分光光度计B.酶标仪C.光学显微镜D.相差显微镜E.倒置相差显微镜（二）多项选择题（X型题）1.HLA-I类抗原分布于如下细胞A.T细胞B.B细胞C.巨噬细胞D.血小板E.红细胞2. HLA-II类抗原包括的抗原有A. HLA-A B . HLA-DC . HLA-DP.HLA-DQHLA-DR3. HLA- 口类抗原主要表达于如下细胞A.B淋巴细胞 B. 巨噬细胞 C.抗原提呈细胞D.红细胞E.T 淋巴细胞4.A.5.A.6.A.7.A.8.HLA抗体可来自健康人血清 B .产妇血清C .接受移植者血清HLA血清学分型技术可用于检测HLA-A抗原 B . HLA-DP抗原 C

4、 . HLA-DR抗原 可用混合淋巴细胞培养分型方法进行检测的位点有HLA-A B . HLA-B C . HLA-DP D下述哪些分子生物学方法可用作HLA定型PCR B . PCR-SSP C . PCR-RFLP D下述哪些是MLC阴性定型法的特征D .单克隆抗体D . HLA-B 抗原HLA-DR EPCR-SSOE .兔抗HLA血清E . HLA-C抗原.HLA-D.PCR测序A.用已知的HTC作应答者D. 仅需培养2天B.用已知HTC作刺激者E .具有相同抗原时cpm不增高.需培养6天9.血清学分型法（微量补体依赖的细胞毒试验,A. HLA分型（供移植前配型、C.鉴定和交叉配合试验

5、疾病相关研究、CDC test）临上可应用于人类亲缘研究等）D.测定T细胞免疫功能B.抗体筛选E. B细胞免疫功能10.PCR-SSP（序列特异性引物）用于HLA分型具有的特点A.分辨度高B.特异性强D.只需借助琼脂糖凝胶电泳C.扩增后处理过程简单E.依据是否出现特异性条带判断结果二、填空题1 检测HLA抗原的基本方法有分型法、分型法和分型法。2 CDC试验的分型血清可来自或。3 CDC试验阳性时，抗原细胞应。4 检测HLA-I类抗原时可用细胞或细胞，检测HLAII类抗原时需用细胞。5 检测HLAU类抗原时，抗血清需用吸收除去HLA一类抗体。6 PCR-SS吩型法是目前最常用于类基因分型三名词

6、解释1. PCR-序列特异引物分型技术(PCR-polymerasechainreactionwithsequencespecificprimer,PCR-SSP)2同种免疫血清(isotype-immunoserum)3混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture，MLC)四问答题1检测HLA血清学分型法(微量补体依赖的细胞毒试验，CDCtest)的原理2. 用血清学分型法检测HLA-II类抗原时，和检测I类抗原比较有哪些主要的不同点?3. CDC试验中兔补体为何需用多只兔的混合血清？4如何获取B淋巴细胞?5. PCR-SSP!于HLA分型的原理第三部分参考答案与题解-、选

7、择题A型题)1 B2.A3B4B5E6E（二）多项选择题（X型题）1.ABCD8.BCE2.BCDE9.ABC3.ABC410.ABCDEBCD5.ACDE6.CE7.BCDE二、填空题1血清学、细胞学、分子生物学。2同种免疫血清、单克隆抗体。3.死亡。4.单个核、T淋巴、B淋巴。5.混合血小板、I。6.HLA-U三名词解释1 PCR-SSP：编码各种HLA抗原表型的等位基因不尽相同,可用相应的序列特异性引物进行扩增。借助HLA 基因分析。琼脂糖凝胶电泳观察是否存在特异性产物的电泳条带进行2同种免疫血清HLA 抗体。HLA-D,HLA-DP抗原不同，可刺激发生淋巴细胞转存在于同种不同个体间的抗

8、原免疫所诱导生成的抗体。如3混合淋巴细胞培养：两个体淋巴细胞在一起培养，若化现象。用于HLA定型有阳性和阴性定型法。四问答题1。HLA分型采用微量补体依赖的细胞毒试验，其原理是HLA抗体与淋巴细胞表面的相应抗原结合后激活补体，导致细胞膜损伤，通透性增强，染料进入细胞，在倒置相差显微镜或倒置荧光显微镜下观察，着染的细胞为死亡细胞，视野下死亡细胞超过40%试验为阳性。如淋巴细胞膜上无相应的抗原，则不发生反应，为阴性，从而将HLA分型。2。要用B淋巴细胞，抗体要用混合血小板吸收除去I类抗体或用单克隆抗体，孵育时间需延长。3。避免因个别兔的补体缺陷造成误差。4。用尼龙毛法，E花环分离法，免疫磁珠分离法等从单个核细胞悬液中进行分离。5.PCR-SSP方法的原理是编码各种HLA抗原表型的等位基因不尽相同，均可用相应的序列特异性