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1、第第3章章 微生物细胞的破碎微生物细胞的破碎Chapter 3 Cell Disruption知识点:细胞壁的组成和构造,微生物细胞知识点:细胞壁的组成和构造,微生物细胞的破碎技术,破碎率的测定。的破碎技术,破碎率的测定。重点:工业消费中常用的几种细胞破碎方法重点:工业消费中常用的几种细胞破碎方法的原理,操作过程常用设备,并能就实践消费的原理,操作过程常用设备,并能就实践消费情况予以合理的选择。情况予以合理的选择。难点:常用破碎方法的合理选用。难点:常用破碎方法的合理选用。目录v1微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述v2细胞壁的组成和构造细胞壁的组成和构造v3微生物细胞的破碎技术微
2、生物细胞的破碎技术v4 破碎方法的影响要素破碎方法的影响要素 胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物细胞本身:细胞本身: 单细胞蛋白单细胞蛋白SCP胞内产品胞内产品:碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产物等物等1 微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述2 细胞壁的组成和构造细胞壁的组成和构造 1.细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力2.细胞壁的构造细胞壁的构造 2.1 细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力细菌:肽聚糖,多糖,磷壁酸,主要阻力来自细菌:肽聚糖,多糖,磷壁酸,主要阻力来自
3、于肽聚糖的网状构造。于肽聚糖的网状构造。酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质,主要阻酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质,主要阻力来自于壁构造交换的严密程度和厚度。力来自于壁构造交换的严密程度和厚度。真菌:多糖,蛋白质,脂类,葡聚糖,几丁质,真菌:多糖,蛋白质,脂类,葡聚糖,几丁质,主要阻力来自于壁强度和聚合物网状构造。主要阻力来自于壁强度和聚合物网状构造。back2.2 细胞壁的构造细胞壁的构造细菌的细胞壁细菌的细胞壁酵母菌的细胞壁酵母菌的细胞壁真菌的细胞壁真菌的细胞壁backbackback各种微生物细胞壁的构造与组成各种微生物细胞壁的构造与组成 3 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术1微生
4、物细胞的破碎技术:2常用的破碎技术:3破碎方法的影响要素:3.1 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术 细胞破碎主要方法细胞破碎主要方法 细胞破碎机理图细胞破碎机理图机械破碎法与非机械法比较机械破碎法与非机械法比较 破碎技术的未来开展方向破碎技术的未来开展方向多种破碎方法相结合:多种破碎方法相结合:与上游过程相结合:与上游过程相结合:与下游过程相结合:与下游过程相结合:破碎方法选择原那么破碎方法选择原那么(1)(1)仅破坏或破碎存在目的生化物质的位置周围:仅破坏或破碎存在目的生化物质的位置周围:(2)(2)选择性溶解目的生化物质:选择性溶解目的生化物质:3.2 常用的破碎设备常用的破碎设备
5、u机械法:机械法:u研磨,匀浆器,组织捣碎法,压榨器研磨,匀浆器,组织捣碎法,压榨器u物理处置法:物理处置法:u化学法:化学法:u酶解法:酶解法:u枯燥法:枯燥法:砂磨机砂磨机高速珠磨机高速珠磨机高压匀浆器高压匀浆器撞击破碎器撞击破碎器电声超声波发生器电声超声波发生器4 破碎方法的影响要素破碎方法的影响要素细胞的数量破碎条件破碎目的破碎率的测定破碎率的测定 1. 1.直接测定法直接测定法2.2.测定释放的蛋白质量或酶的活力测定释放的蛋白质量或酶的活力5. 包含体的破碎包含体的破碎 包含体定义包含体中目的蛋白的制备步骤蛋白质的复性操作方法提高目的蛋白质复性效率的对策作业作业高速湿法珠磨高速湿法珠磨高压匀浆高压匀浆超声波破碎超声波破碎组织捣碎组织捣碎酶解酶解自溶自溶化学溶胞化学溶胞浸透压冲击浸透压冲击冻结冻结- -融化融化枯燥枯燥撞击破碎撞击破碎 每人请任选一种破碎方法,经过假设干个典型实例来每人请任选一种破碎方法,经过假设干个典型实例来详细分析阐明工
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