植物样品全氮磷钾测定

1、植株全氮、磷、钾测定方法一、植物全氮测定一）H2SO4-H2O2 消煮法1、适用范围3、试剂本方法不包括硝态氮的植物全氮测定, 适合于含硝态氮低的植物样品的测定。2、方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在, 钾以离子态存在。样品经浓HSO和氧化剂HtQ消煮,有机物被氧化分解 , 有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐 , 钾也全部释出。消煮液经定容后 , 可用于氮、磷、钾的定量。采用H2O2为加速消煮的氧化剂，不仅操作手续简单快速, 对氮、磷、钾的定量没有干扰 , 而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作防止有机氮被氧化成 N2气或氮的氧化物而损失。3、试剂1）硫

2、酸 （ 化学纯 , 比重 ;（2） 30% H2Q（分析纯）。4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。5、操作步骤称取植物样品（称准至装入100ml开氏瓶或消煮管的底部，加少量水润湿，加浓H2SO5ml,摇匀（最好放置过夜）,盖上弯劲漏斗，在电炉或消煮炉上先小火加热，待H2SO发白烟后再升高温度当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加1-5滴H2Q，再加热至微沸，消煮约710min,稍冷后重复加HbQ,再消煮。如此重复数次 ，每次添加的H2Q应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后再加热10min,除去剩余的 fQ。取下冷却后，用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中，冷却至室温后定容 （V1）。 每

3、批消煮的同时 ,进行空白试验 ,以校正试剂和方法的误差。6、注释(1)所用的H2Q应不含氮和磷。fQ在保存中可能自动分解，加热和光照能促使其分解 ，故应保存于阴凉处。在 H2Q中加入少量HtSQ酸化，可防止H2O2分解。(2)称样量决定于 NPK含量，健状茎叶称，种子,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样，可按干样的5倍称样。称样量大时，可适当增加浓 HSQ用量。(3)加H2Q2时应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶劲内壁上，将不起氧化作用，若遗留下来还会影响磷的显色。4)上机分析准备的试剂指示剂溶液：取 10ml 指示剂储备液加入 500ml 容量瓶，加入 4ml 磷酸盐缓冲液。用蒸馏水定容。在分析前一天

4、准备此试剂。(一般1L 能分析 200个样品)4mol/LNaQH : 在蒸馏水中溶解 80g 氢氧化钠并稀释定容至 500ml. (一般 1L 能分析 200 个样 品)1000ppm N 储备液 ;在 1000ml 容量瓶中溶剂氯化铵，并稀释定容。分析标线梯度：0、5、10、15、20、25ppm二) 水杨酸 -锌粉还原 - H 2SQ4- 加速剂消煮法1 、适用范围包括销态氮的植物全氮测定 ,适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。2、方法原理样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用, 生成硝基水杨酸 , 再用硫代硫酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按HSQ-加速剂消煮法进

5、行消煮法进行消煮样品，使样品中全部氮转化为铵盐。1)固体 Na2S2O3;2）还原锌粉 （AR）;（3）水杨酸-硫酸:30g水杨酸溶于1L浓硫酸中。也可以该用含苯酚的浓硫酸：40g苯酚溶于 1L 浓硫酸中。4、仪器设备。同上。5、操作步骤称取磨细烘干样品（过筛）或新鲜茎叶样品，置于100ml开氏瓶或消煮管中，先用水湿润 内样品（烘干样）,然后加水杨酸-硫酸10ml,摇匀后室温放置 30min,加入NafcS2Q约,锌粉和水10ml,放置10 min,待还原反应完成后，加入混合加速剂2g,按土壤全氮测定方法进行消煮，消煮完毕,取下冷却后，用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中，冷却至室温后定

6、容（Vi）。用于滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮。每批消煮的同时, 进行空白试验 , 以校正试剂和方法的误差。5、蒸馏三）消煮液中铵的定量 （凯氏法 ）1、适用范围。适合于各种植物样品消煮液中氮的定量。2、方法原理植物样品经开氏消煮、 定容后，吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨，经蒸馏,用HBQ吸收,硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定 , 以甲基红 -溴甲酚绿混合指示剂指标终点。3、试剂1）400g/L NaOH 溶液。2）20g/L H 3BO3 -指示剂溶液。酸标准溶液 c(HCL 或 1/2H 2SO4)=L 。4、仪器设备。蒸馏装置或半自动蒸馏仪。检查蒸馏装置是否漏气和管道是否洁净后

7、，吸取定容后的消煮液（V 2,含NH-N约1mg）,注入半微量蒸馏器的内室。另取150ml三角瓶，内加5 ml 2% H 3BO指示剂溶液（若为包括硝态氮的待测液，应加约6 mL的400g/L NaOH溶液）,通过蒸气蒸馏（注意开放冷凝水,勿使馏岀液温度超过40 C ） O待馏岀液体积约达 5060ml时，停止蒸馏,用少量已调节至的水冲洗冷凝管末端。用酸标 准溶液滴定馏岀液至由蓝绿色突变为紫红色 （终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同 ）。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定、以校正试剂和滴定误差。6、结果计算3 (N), %= c(V-Vo) XX DX 100/m;式中 : 3（N） 植物全氮

8、的质量分数 ,%;c酸标准溶液的浓度,mol/L;V滴定试样所用的酸标准液体积，ml;V）滴定空白所用的酸标准液，ml; N 的摩尔质量 ,kg/mol;D分取倍数（即消煮液定容体积 V吸取测定的体积 V2）O二、植物全磷的测定一） 钒钼黄吸光光度法1、适用范围。适合于含磷量较高的植物样品的测定（ 如籽粒样品 ） O2、方法原理植物样品经浓H2SO消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸 能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400490nm处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短波长。此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定

9、,在HNQ HCI04和H2SQ等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格, 干扰物少 , 在可见光范围内灵敏度较低 , 适测范围广(约为120mg/L P),故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定。3、试剂(1)钒钼酸铵溶液：钼酸铵(NH 4)6M07O2 . 4甩0,分析纯溶于400mL水中，必要时可适当加热，但温度不得超过 60 C。另将偏钒酸铵(NH4VO,分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后加入250mL浓HNO(分析纯)。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵( 溶液中 , 不断搅匀 , 最后加水稀释至 1L, 贮于棕色瓶中。(2) NaOH溶液(c=6moI/L

10、):24gNaOH溶于水 , 稀释至 100mI 。(3)二硝基酚指示剂(P =2g/L):,6-二硝基酚或 2,4- 二硝基酚溶于 100mI 水中。(4)磷标准溶液P (P)=50mg/L:( 干燥的KHPO(分析纯)溶于水，加入5ml浓HNO,于1L容器瓶中定容。4、主要仪器设备。分光光度计。5、分析步骤准确吸取定容,过滤或澄清后的消煮液520ml( V2,含放入50ml容量瓶中，加2滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色，加入5ml钒钼酸铵试剂，用水定容(V3)。15min后, 用1cm光径的比色槽在波长 440nm处进行测定，以空白溶液(空白溶液消煮液按上述步骤显色

11、), 调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程 :准确吸取 50mg/L P 标准液 0, 1, , , 10, 15ml分别放入50mL的标准系列溶液 , 与待测液一起进行容量瓶中 ,按上述步骤显色 ,即得 0, , , , , 10, 15 ml P测定, 读取吸光度 , 然后绘制校准曲线或求直线回归方程。6、结果计算-4p (P) X V3X(V1/V2)X 10-43 (P) =式中 :3 (P)植物磷的质量分数 ,%;p (P)从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度, mg/L;V消煮液定容体积，ml;V2吸取测定的消煮液体积，ml;V3显色液体积，ml;m 称样量,g;10-4

12、将 mg/L 浓度单位换算为百分含量的换算因数。7、注释(1)显色液中 P (P)=15 mg/L 时，测定波长 420nm;520mg/L 用 490nm。待测液中Fe3+浓度高应选用450nm,以清除Fe3+干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。(2) 般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如V15C)时,需显色30min 。稳定时间可达 24h。(3)如试液为HCI,HCIO4介质，显色剂应用 HCI配制；试液为H2SC4介质,显色剂也用 H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为mol/L,最好是mol/L。酸度高显色慢且不完全，甚至不显色；低于mol/L易产生沉淀物，干扰测定。钼酸

13、盐在显色液中的终浓度适宜范围为X10-310-2mol/L, 钒酸盐为 8X 10-5X 10-3 mol/L 。4、此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中Fe3+浓度超过寸,它的黄色有干扰，可用扣除空白消除。二) 钼锑抗吸光光度法1、适用范围适合于含磷量较低的植物样品的测定 （如茎秆样品等 ）。2、方法提要植物样品经浓H2SO消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下，待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸 , 后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物可用吸光光度法测定。3、试剂1)6mol/L NaOH 溶液2）%二硝基酚指示剂(3) 2mol/L(1/2 H

14、2SO)硫酸溶液：浓 HtSQ加水至 lOOmL。（4）钼锑贮存液：浓HSO（分析纯）126 ml缓慢地注入约400 ml水中，搅拌,冷却。钼酸铵（分析纯）溶解于约60C的300ml水中，冷却。然后将 HSO溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100 %酒石酸锑钾（KSbOCQ. 1/2H2O,分析纯）溶液,最后用水稀释至 1L,避光贮存。此贮存液含钼酸铵为 1%,酸浓度为 c(1/2 H 2SO4)= mol/L（5）钼锑抗显色剂：抗坏血酸（C6fO,左旋，旋光度+21+22,分析纯）溶于 100ml 钼锑贮存液中, 此液须随配随用 ,有效期一天 , 冰箱中存放 ,可用 35天。（6）磷标准工作

15、液P （P）=5 mg/L: 吸取100mg/L P标准贮存液稀释20 倍 , 即为 5 mg/L P标准工作溶液 , 此溶液不宜久存。4、主要仪器设备。同上5、分析步骤吸取定容过滤或澄清后的消煮液（V2,含P530 U g）于50ml容量瓶中，用水稀释至约 30ml,加12滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/L NaOH溶液中和至刚呈黄色 ，再加入1滴2mol/L（1/2 HbSQ）溶液，使溶液的黄色刚刚褪去，然后加入钼锑抗显色剂，摇匀，用水定容（V3） O在室温高于15C的条件下放置30min后，用1cm光径比色槽在波长 700nm处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归

16、方程:准确吸取P (P)= 5mg/L标准工作溶液 0,1,2, 3, 4,5 ml,分别放入50mL容量瓶中，加水至30ml,同上步骤显色并定容,即得0,按，LP标准系列溶液，与待测液同时测定，读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。6、结果计算：同1。7、注释根据分光光度计性能，可选用650890nm波长处测定,880890nm处灵敏度高三、植物全钾的测定一火焰光度法（一）适用范围。适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。（二）方法提要植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定。（三）试剂K标准溶液P （K）= 100mg/L:（ 分析纯），在105110C干燥2h）溶于水，于1L容量瓶中定 容，存于塑料瓶中。（四）主要仪器设备。火焰光度计。（五）分析步骤吸取定容后的消煮液（V2）放入50mL容量瓶中，用水定容（V1）,直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程准确吸取 100mg/L K标准溶液0, 1, , 10, 20 ml,分别放入 50mL即得 0, 2, 5, 10, 20, 40 mg/L K标准系列溶液。以浓度最高的标