蛋白质浓度的测定实验报告_第1页
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文档简介

1、蛋白质浓度的测定.试验原理考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高敏感性。考马斯亮蓝G250在一定范围内，考马斯亮蓝 白质含量呈线性关系。的磷酸溶液呈棕红色，最大吸收峰在465nm。当他与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色， 其最大吸收峰改变为 595nm。考马斯亮蓝G250 蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋 白质定量测定的高敏感性。G250蛋白质复合物呈色后，在595nm下，吸光度与蛋故可用于蛋白质浓度的测定。二.试验设备与试剂设备：普通离心机， 试剂：标准蛋白液(721型分光光度计100ug/ml)三.实验材料新鲜绿豆芽 四实验内容1.标准曲线的制备取9支干净的试管，按表进行编号并加

2、入试剂。管 试 剂1 (空 白)23456789标准蛋白液/ml00.10.20.30.40.50.60.81.00.9% nacl/ml1.00.90.80.70.60.50.40.20考马斯亮蓝染液/ml4.04.04.04.04.04.04.04.04.0蛋白质含量/(ug/ml)0102030405060801002.样品蛋白的测定(1) 样品蛋白液制备准确称取2g新鲜绿豆芽胚轴的部分，研磨成匀浆，离心分离 (4000r/min,10min )。取上清液用 0.9%nacI 定容到 10ml。(2)含量测定另取两只干净的试管，加入样品液0.1ml, 0.9mlnaci和考马斯亮蓝染液

3、4.0ml,混匀。室温静置 3min，与波长595nm处比色，读取吸光度。五.实验结果1.标准曲线结果如表所示，并以吸光度为纵坐标，个标准液含量为横坐标做标准曲线。试管号1234567899蛋白质含量6080100A5950.0000.0691 0.0890.2261 0.3390.4000.4700.5700.730标准曲线蛋白质含量2.样品蛋白含量的测定样品蛋白的比色结果如表，根据直线方程求出每支试管中蛋白质含量。试管号1011A5950.1860.179蛋白质含量25.1524.17根据公式求出样品绿豆芽蛋白质含量.“样品蛋白的体枳TXXa”剧F!阳卿刈出绷阕、膜川劇占机!曲!创曲范I!怖!I廟!I也则业4洞il 宀 h4 佈 也 #4 f nI蛋白质含量hmb鲜重）=I测定时取样的休积 思詁注陵蒯济詔祭紹豁阳豔洽tiOi粽渝挣曲讳E肘脚潦爲胡琳湃廿 称取样 口 的重屋六.结果与讨论结果：绿豆芽蛋白质含量=1233

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