2020新冠病毒核酸检测标准操作流程

1、2021新冠病毒核酸检测标准操作流程在当前新型冠状病毒肺炎疫情期间,需要开展核酸检测的医疗机 构,在有限的硬件条件下,如何科学、标准、有效地做好生物平安防 护及开展核酸检测工作.各实验室可结合自身条件和流程,制定适宜 的生物平安防护和核酸检测方案.核酸检测流程一核酸检测前的生物平安防护工作人员个人三级防护的穿戴穿戴流程：在基因扩增实验室的清洁区更衣区或者普通实验室的洁净区, 工作人员按顺序依次穿戴好一次性帽子、医用N95 口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、防护目镜和双层乳胶手套,进入 样本处理工作区域或实验室.【要点提示】具备标准基因扩增布局条件的实验室, 应在清洁更衣区做好个人

2、 三级防护,条件有限的实验室亦可选择在一洁净的实验室中按流程穿 戴好个人三级防护.需佩戴医用N95 口罩,假设无医用N95 口罩,可以考虑用普通 N95/KN95 口罩外加一次性外科口罩的组合方式,但不要佩戴有呼吸 阀的N95口罩.佩戴N95 口罩时需检查密闭性,通过双手按压、深呼吸、左右转 头等动作严格检查口罩是否佩戴正确.一次性防护服已具备新型冠状病毒核酸检测的防护需求,有条件 时可以考虑加穿一次性反穿隔离衣,穿衣时需由他人协助.穿戴整洁的工作人员,应按要求尽快进入样本处理的实验区域开 展工作,严禁穿戴三级防护后再进入普通实验区域或办公区域.二样本的灭活处理操作流程：两名完成三级防护的工作

3、人员,进入样本处理区或样本处理专用 实验室,将接收到的样本二级包装在平安柜内翻开, 检查样本主容器 是否为严格密闭；对密封袋外表进行消毒后,对送检样本进行56 C下30分钟的灭活,灭活后的样本管需在生物平安柜内翻开最内层的 容器,将拭子保存液混匀后进行分装和用于核酸提取.【要点提示】涉及高致病性病原微生物的实验室活动,需由两名工作人员完 成,其中一人负责主要实验操作,一人提供必要的协助.主操作者应 预防反复屡次进出平安柜.灭活形式：可以采用水浴或空气加热形式完成灭活, 采用空气加 热时可适当延长灭活时间.有条件时可以采用小型化设备在平安柜内 操作,减少样本进出平安柜的次数.灭活前的样本严禁在生

4、物平安柜 外翻开和操作.应特别检查采样管是否拧紧、有无样本溢漏等情况.样本管每次进出平安柜均需对外外表进行消毒应就近配备适量的消毒处理物品,以预防实验操作过程中可能发 生的意外溢洒事故,有条件时建议在平安柜内配备一次性吸水台布.三样本的核酸提取1、手工核酸提取操作流程以凯杰的 52906柱提法核酸提取试 剂盒为例1裂解液配制：在基因扩增实验室的试剂配制区或单独的普通试剂配制实验室中,准备核酸提取所需的洗液1 AW1、洗液2AW2和carrier RNA .根据要求,分别向洗液1和洗液2中参加 分子生物学级别的130ml和160ml的无水乙醇并及时做好标记；取 310/洗脱液AVE溶解310 w g/支的Carrier RNA .配置好后, 通过传递窗进入核酸提取区或由工作人员送入核酸提取专用实验室.2样本裂解：取560“ AVL裂解液到1.5ml无菌EP管中,参加5.6 口 配制好的Carrier RNA ,再参加已经灭活的140区l样本 例如咽拭子、血浆等,混匀振荡15秒,室温静置10分钟,充分裂解样本中的核酸.将EP管瞬时离心后参加560/无水乙醇,充分 混匀15秒,再次瞬时离心后备用.吸取630“裂解产物,小心参加 至离心柱中,8000rpm 或6000g离心1分钟,转移离心柱至新收