厚荚相思种子离体培养萌发试验

1、厚荚相思种子离体培养萌发试验2008年第2期(总第115期)广西热带农业7厚荚相思种子离体培养萌发试验秦欣岑秀芬韦鹏霄赖家业秦武明(广西大学农学院,南宁530005;广西大学林学院)摘要:对影响厚荚相思种子离体萌发的几种因素进行系统的试验研究,结果表明用浓硫酸30min加沸水浴l0min的处理方法的萌发率高于单一的浓硫酸处理或沸水处理;接种方式以胚芽向下接种最佳,诱导培养基以1/2MS培养基为宜.关键词:厚荚相思种子萌发率离体培养厚荚相思(Acaciacrassicarpa)原产澳大利亚,为热带速生豆科乔木树种.其适应性强,多生于沿海深厚沙土和粘土,具有固氮改土性能,能耐火烧和海风(含盐);主

2、干通直,为重要的纸浆和用材树种1101985年我国开始引种,经种源试验和林木改良,厚荚相思已在华南地区推广,成为我国南方短周期工业用材林的主要造林树种之一.相思树常规繁殖方法以种子繁殖为主.但厚荚相思种子具有种皮坚硬,外层裹有蜡质,不易吸水膨胀的特点,未经处理的种子,萌发不整齐,萌发期长达23个月,有的甚至半年后还有萌发2,31,因此需要进行萌发前处理以打破休眠.本试验旨在对影响厚荚相思树种子离体萌发率的几种因素进行系统的研究,以提高离体培养获得无菌苗和进行离体快繁的效率.1材料与方法采用厚荚相思优良单株种子为试材,进行如下几项试验.1.1种子预处理分别采用98%浓硫酸处理种子l0,30,60

3、min;沸水浴处理种子5,l0,20,35mln;98%浓硫酸处理30min后再沸水浸泡5,l0,20min这3种方法进行预处理,空白试验为对照.每个处理50粒种子,重复3基金项目:广西科学基金(0342013);国家林业局重点开放实验室项目.作者简介:秦欣,男,四川邻水人,在读硕士研究生.通讯作者:韦鹏霄,男,副研究员,硕士生导师.收稿日期:2oo71218次.每种方法都将处理好的种子先用75%酒精消毒60S,然后用0.1%升汞消毒10min,最后经无菌水冲净后接种在pH值5.8的MS培养基上培养.12种子灭菌消毒处理种子先用98%浓硫酸处理30min后沸水浴处理10min;然后分别用75%

4、酒精处理种子30,60S,再分别用0.1%升汞消毒l0,20min,共设4个处理,每个处理50粒种子,重复3次;最后用无菌水冲洗5遍后接种在pH值5.8的MS培养基上培养.1.3种子接种方式对种子先用98%浓硫酸处理30min后再沸水浴处理10min,然后依次用75%的酒精消毒60S,0.1%的升汞消毒10min,最后用无菌水冲净后接种在pH值58的MS培养基上培养,采用撒播和胚芽向下2种接种方式共设2个处理,每处理50粒种子,重复3次.1.4诱导培养基设计按1.2.3的方法对种子进行预处理和灭菌消毒处理,然后将处理好的种子分别接种在pH值5.8的MS,1/2MS,改良MS,MS+活性炭4种诱

5、导培养基上培养,每种培养基接种50粒,重复3次.培养条件:温度25±2,光照强度2OOOlx,光照时问12h/d的培养室内培养.8广西热带农业2008年第2期(总第115期)观察统计:各实验处理分别在接种培养10,20,30d时观察统计种子萌发情况,并采用DIES7.05数据统计分析软件进行多重比较分析.萌发率=未污染种子发芽数/未污染种子数×100%.2结果与分析2.1不同预处理对离体培养萌发的影响结果见表1.用98%浓硫酸处理相思种子,处理30min的萌发率较高,到第10d萌发率达16.38%,30d达56.23%;处理10,60min的种子萌发率明显不如处理30min

6、.可能是用30min处理的种子已充分吸胀,所以萌发率较高;10min的处理时间可能过短,种子未得到充分吸胀而使萌发率不够高;60min的处理可能由于处理时间过长,使种子结构受到浓硫酸伤害,导致萌发率降低.而未经浓硫酸处理的种子根本不萌发.用沸水浴处理厚荚相思种子,处理20min的种子萌发率较高,30d后达到了21.82%;而处理35min的种子萌发率只有5.97%,这可能是由于处理时间太长,引起种子坏死,从而导致萌发率降低.未经沸水浴处理的种子也根本不萌发.用98%浓硫酸处理30rain结合不同的沸水浴处理(5,10,20min)厚荚相思种子,结果,浓硫酸处理30rain结合沸水浴处理10mi

7、n萌发率最高.表1不同预处理方法对厚荚相思种子离体培养萌发的影响响.结果见表2,不同灭菌组合的灭菌效果均较好,培2.2不同灭菌处理对离体培养萌发的影响养30d后的菌污染率只为2%或4%;不同灭菌组合用75%酒精结合0.1%升汞消毒厚荚相思种子,的处理时间对种子萌发率的影响较大,其中75%酒精比较不同处理组合的灭菌效果和对种子萌发的影处理30s加0.1%升汞处理10min种子萌发率最高,表2不同的灭菌组合处理对厚荚相思种子离体培养萌发的影响由此说明这个组合对种子的伤害较小.2.3不同接种方式对离体培养萌发的影响用撒播和胚芽向下的接种方式来接种,比较2种接种方式对厚荚相思种子萌发的影响.结果见表3

8、,经方差分析发现这2种接种方式萌发率的差异不显着,表明本试验的不同接种方式对种子萌发率的影响不2008年第2期(总第115期)广西热带农业9大,但后期观察发现对苗的整齐度有很大影响,以胚表3不同接种方式对厚荚相思种子离体培养萌发的影响芽向下的接种方式整齐度为佳.2.4不同诱导培养基对离体培养萌发的影响从表4中可以看出,MS,1/2MS,MS+活性炭这3种培养基都有较高的种子萌发率,30d后均显着高于改良MS,但这3种培养基之间的种子萌发率差异不显着,种子萌发率最高的是1/2MS培养基,达到了69%,改良MS培养基的种子萌发率最低,只有34.04%.表明厚荚相思种子离体培养萌发时,不需要MS培养

9、基的全量大量元素;加入活性炭的MS培养基,种子萌发率高于不加活性炭的MS培养基,说明活性炭对提高种子的萌发率有一定的效果.3小结厚荚相思种子是硬实种子,在自然情况下,只能靠细菌和真菌分泌酶类去水解这些种子种皮的多糖,使种皮变软后萌发.本试验结果表明:用98%浓硫酸处理30min后再沸水浴处理10min,然后依次用75%酒精处理30s,升汞处理10min后采用胚芽向下的方式接种在大量元素减半的1/2MS培养基可以获表4不同诱导培养基对厚荚相思种子离体培养萌发的影响得较好的培养效果.在本试验中,虽然厚荚相思种子的离体培养萌发率达到了69%,但和其他同类研究的报道b的结果仍有差距,这可能是由于品种不

10、同,以及种子保存时间过长,种子活性降低所致.参考文献1】潘志刚.游应天.厚荚相思的引种及种源试验J】.林业科学研究,1994,10(5):498505.2】奚福生,苏扬.南方速生材营林新技术与效益评价M】.南宁:广西科学技术出版社,1997.3】林珊珊,蔡汉权,赖钟雄,等.浓硫酸与沸水浸泡对厚荚相思种子离体萌发的影响J】.种子,2005,8(24):3436.4】潘瑞织.植物生理学M】.北京:高等教育出版社,2000:306.(上接第6页)熟桃结果枝占的比例大,结果性能好.在对花芽种类进行调查中发现,早熟桃主要是单花芽和三花芽,花芽大部分在长结果枝和中结果枝上,长结果枝上的三花芽最多,占花量的44.26%,其次是单花芽占39.25%;说明早熟桃花芽种类多.开花量大,结果率高.随机调查5株早熟桃和毛桃,每树随机选一大枝.座果数在终花期后25天进行调查.调查结果,早熟桃的开花量比毛桃多,平均每大枝开花量为577朵,平均结果数112个,座果率19.4%.毛桃每大枝开花量