消毒剂对食(饮)具消毒效果的模拟现场鉴定试验

1、消毒剂对食 ( 饮)具消毒效果的模拟现场鉴定试验2.1.2.1.1目的鉴定消毒剂对食 (饮)具上细菌的杀灭作用， 以验证该消毒剂对食 (饮) 具消毒的实用剂量。2.1.2.1.2试验器材(1) 大肠杆菌(8099) 。对尚需用于杀灭其他特定细菌者，可增用该特 定细菌进行试验。菌悬液制备按 2.1.1.2 规定的方法和要求进行。(2) ) 磷酸盐缓冲液 (PBS，0.03mol/L ， pH7.2)(3) 稀释液：见附录 A。(4) 中和剂(按 2.1.1.5 方法鉴定合格者 )(5) 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(6) 无菌棉拭(7) 规格板( 用可略弯曲的软性材料制备，中央留一大小为5.0cmX5

2、.0cm 空格作为采样部位)。(8) 试验用食 (饮)具样本 瓷碗(盘)或竹(木)筷前端(周长 2.0cm， 长度为12.5cm。2.1.2.1.3操作程序(1)按产品使用说明书的用法，选定本试验拟用浓度和作用时间，分别进行大肠杆菌杀灭试验。(2)用无菌规格板在试验用瓷碗(盘)中间标出染菌区(5.0cmx5.0cm)。用无菌吸管吸取菌悬液， 分别滴加于染菌区， 每区 0.1ml，用无菌 L 棒在区内涂匀，置 37C恒温箱干燥。对筷子取前端 12.5cm 长度，蘸染预定量菌液后，并置 37C或室温干燥。（3）试验组：将 30 个染菌碗或 3 0 个筷子样本，依次定时放入含消 毒剂溶液的容器中，使

3、其完全浸没。作用至规定时间后取出，弃掉消 毒剂，向瓷碗 （盘） 内的染菌区加入 5ml 中和剂， 用 L 棒刮洗染菌区，作用 10min后，分别取 1.0ml 样液倾注接种 2 块平皿。将筷子放入含 20ml25ml 中和剂的试管中，使其完全浸没在中和剂中，电动混匀器 震荡 60s 或振敲 200次，作用 10min 后，分别取 1.0ml 样液倾注接种 2 块平皿。将接种好的平皿放 37C恒温箱培养 48h，计数菌落数，作 为试验组。（ 4）阳性对照组：将 3 个染菌碗或 3 只筷子样本不浸泡消毒剂，直 接向瓷碗 （盘） 内的染菌区加入 5ml 中和剂， 或直接将筷子放入含 20ml25ml

4、中和剂的试管中。待试验组消毒处理完毕后，随试验组进 行采样和检测。阳性对照组菌量应为 1.25x107cfu/样本 1.25x108cfu/ 样本（相当于 5x105cfu/cm25x106cfu/cm2）。（ 5）阴性对照组：待试验组与阳性对照组试验结束后，将未用过的 同批次中和剂、PBS 接种培养基和未种菌的培养基等与上述两组样本 同时进行培养，作为阴性对照。（6）按下式计算每件食具上的生长菌落数。每件食具样本生长菌落数（cfu/样本）二平板上平均菌落数x检测时 样本稀释倍数（ 7）计算杀灭对数值。2.1.2.1.4评价规定以每种食(饮)具 30 个样本中大肠杆菌杀灭对数值均3.00 所用消 毒剂的浓度和作用时间为消毒合格剂量。2.1.2.1.5注意事项(1) 试验操作过程必须采取严格的无菌技术。 直接或间接接触 样本的器