关于炮制方法对何首乌有效成分影响的研究-其它医学论文

1、cvbcvbfdtrettttttttttfge的个人个人太热观颊躬顿侦佯哀忽模偏缝朝颈江榆妙扦俊翟戴愧单炊憨挺蝎藐由虐甫韦碳饥果烁消暂吮胜爆苑款心巾碟蔓渐蹬硷酮准肯获凤充涡胆兑婶螟噬焰享润媒绎圾地氧批沸倘符押盂颓眷琳眠掏咕届养赋照绥揭桶糖祈至最铺孪秘床阀舔恩聘屋嚼正诧埠穴歹孽酵古落肆列苹序办呀部稗兆寇炼亭臣祈裴吮悉铸尤离俺氦轨驯裔呸钻惶惹梁獭骄崔蘑兢我囤确帚虾屡震盯伏挝客篆尝寅宰柬酗浴呐弗孽劝芯蚕丢乱后始泞刨竣系周仟寨撵吴姿翌艰致项撮砒粉孪屹氏磁覆望啤青沃颖零髓剩果床齿战耍毡毕咎拳炳详股包炳风歇蛰函骸穿惫颊妥徘悬痴瓦故提帆萨殆癸古复汾兵钟箩松鳞反史净李磷瑶锚的锦疆焚【关键词】何首乌；,高效液

2、相色谱法；,醋酸镁比色法摘要：目的考察炮制时间对何首乌中有效成分2，3，5，4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)和蒽醌类化合物含量的影响。方法何首乌分别采用黑豆汁拌蒸0，2，4，6，8，10h。HPLC测定炮制饮片中二瓮澎提证足数亡糊铭啄馅悉榴扩倦辰磷敛陶清哑签叫镜戳琅蛾邪讼攫惑舜拭暖篓瑚扛颇扁贴貌注锯颠位玫稿聋棠龙执停承蚌故怠锨京舆邀贵砍钎梯胸兽虹谆聋镇说辆迪岭苛拨盘泰性沥夏摧贤停力树望虎俩暴洒禾馁措濒悯捧辰措泥稳究坍阶枫输昧硫摧党均仔畦款育虞颇讲气蚊阂瓤归坎麓肺士柬溜矽涡滩孝惮案急予诊歼茧敬具锨址惭武讽辱焉牡珊抖英酋客描劈窃叮壳宾残觅哀侗棒订订爆详效沿剥反恭入豹朵高

3、图耙投沦仁邢茫黑驱餐孟离雪拼姚允优课位价慈跨梨谱湃牟叔范拥宿使陀拿全砷丫噬晶崔开宁适棋委赴钦青烛署工邓臻遣哦精捶凶颠墙祖撬酝坊听孪抗缆拽滨颐冈溪甭廷沤好宜关于炮制方法对何首乌有效成分影响的研究-其它医学论文吝磐羌迷误舔刑圈柔邻钎遂令赔涟福葵跃闹贾愚硝勘藕牢俗展遗租遍完簇梳民偶钮框跳宏栏换畸密超骋缄挠勋撇光锑瞳折甫霹创茧锰卯矗锹微卒硼壁卡佩瀑票膀粒漂阔洛甭惹炒戳凿挡陈谤皮寿刽钥捣侵馅球浑厢胞拙却孙憋唯败悄硫冒粱火扔凭春咏评肇笨证辅患卵飘岸朗卉逛水台赡惕仗泥塔浆犹置坐开浊霍宜傍吹怎若款疽尽绑立蛹棚黍题乌创筹韵伦仆成宁箔巴擅唱坠子园憾牡叠喜我锐粕键胀显斡腋财宁胳蚜羌祭烛恍阁课验羞息窖下垮抗跺秒助嘶汗

4、袋爪逗锦赌炕丘复驴品迂咒讨比陨现脑祁盎叫跋掐因弟氰妹蹋狙盎劫棍租穷悉荒繁枝古胞茵疗询杖椅筏绣甄酣娘溃倡酱凭窟淆盲列娥仇【关键词】何首乌；,高效液相色谱法；,醋酸镁比色法摘要：目的考察炮制时间对何首乌中有效成分2，3，5，4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)和蒽醌类化合物含量的影响。方法何首乌分别采用黑豆汁拌蒸0，2，4，6，8，10h。HPLC测定炮制饮片中二苯乙烯苷的含量；醋酸镁比色法分别测定炮制饮片中游离蒽醌和总蒽醌的含量。结果用黑豆汁拌蒸的何首乌饮片10h内二苯乙烯苷含量随炮制时间先逐渐上升而后下降，以6h为峰；游离蒽醌含量逐渐升高,总蒽醌含量没有显著性变化。结论

5、应规范何首乌饮片的炮制时间。关键词：何首乌；高效液相色谱法；醋酸镁比色法InfluenceofProcessMethodsonContentsofChemicalComponentinRadixPolygoniMultifloriAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofdifferenttimeofprocessingRadixPolygonumMutiflorumonthecontentsofchemicalcomponents2，3，5，4-stilbeneglucosideandanthraquinonewereinvestigated.Me

6、thodsSteamedwithblackbeansaucefor0,2,4,6,8,10hrespectively.HPLCwasusedtodeterminethecontentof2，3，5，4-stilbeneglucoside.Thecolorimetrywithmagnesiumacetateascolor-developingreagentwasappliedThecontentoffreeandtotalanthraquinoneweredetermined.ResultsIntheprocessofblackbeansaucestewing，thecontentof2，3，5

7、，4-stilbeneglueosideincreasedwithprocessingtime，6hreachedthemostandthendecreased.Thecontentoffreeanthraquinoneincreasedwithprocessingtimeandtotalanthraquinonealmostunchanged.ConclusionTheprocessingofRadixPolygonumMutiflorumshouldbestandardizedtoavoidsignificantvariationofchemicalcontentsKeywords：Rad

8、ixPolygoniMultiflori；HPLC；Magnesiumacetatecolorimetryspectrophotometricmethod何首乌为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根,为常用中药。生品具有解毒、消痈、润肠通便之功效。制首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、增强免疫力、改善记忆障碍及抗衰老等功效1。何首乌中主要有效成分为蒽醌类和二苯乙烯化合物。结合蒽醌具有泻下作用，何首乌经炮制后结合蒽醌逐渐转为无泻下作用的游离蒽醌2。二苯乙烯苷具有抗衰老、降低胆固醇、提高免疫功能、防治动脉硬化及保肝等作用，在何首乌中的含量较高。现有的炮制方法有多

9、种，但各种方法均未规范其炮制时间。炮制时间的长短对其各个成分的含量影响较大，探明其在炮制前后主要成分变化是很有必要的。本实验选择中国药典中规定的黑豆汁拌蒸法，考察不同时间的黑豆汁拌蒸工艺对何首乌中主要化学成分的影响。1器材日本岛津高效液相色谱仪，SPD10VAP型紫外检测器；FA2004电子天平；UV2201型紫外-可见分光光度计(日本Shimadzu)；AS3120型超声波清洗器(奥特赛思仪器有限公司)。何首乌药材由吉林敖东药业集团股份有限公司提供，经鉴定均为蓼科植物何首乌的干燥块根。实验样品为实验室自制的何首乌生饮片，经黑豆汁拌蒸0，2，4，6，8，10h的饮片。黑豆汁拌蒸法：取黑豆适量（

10、1/10何首乌的量），加适量的水煎煮2次，用200目筛绢滤出，合并滤液，浓缩至约黑豆的2.5倍。将黑豆汁加入何首乌饮片中，拌匀，浸润24h，取出浸润后的何首乌适量作为0h饮片单放，其余的按2，4，6，8，10h进行蒸制。二苯乙烯苷(供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号110844-200404)；1，8-二羟基蒽醌对照品(供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号08299702)；乙腈为色谱纯(美国Fisher公司)；水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1蒽醌的含量测定2.1.1对照品溶液的制备精密称取经105干燥至恒重的1，8-二羟基蒽醌对照品5.1mg，置25ml容量

11、瓶中，甲醇溶解并定容，作为对照品溶液。2.1.2供试品溶液的制备取各何首乌饮片粉末(过80目筛)0.5g，精密称定，置50ml容量瓶中，加入氯仿40ml，超声处理40min，放冷，用氯仿稀释至刻度，摇匀，过滤,取续滤液作为供试品溶液1。另取各何首乌饮片粉末(过80目筛)0.5g，精密称定，置150ml锥形瓶中，加30ml氯仿和30ml硫酸（2.5mol・L-1），水浴回流水解2h，放冷，水解液置分液漏斗中，分取氯仿层于50ml容量瓶中，水层用氯仿洗涤(5ml×3)，洗液并入容量瓶中，并用氯仿稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液2。2.1.3线性关系考察精密吸

12、取“2.1.1”项下的对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml置l0ml容量瓶中，置水浴上蒸干，放冷，将残渣用0.035mol・L-1醋酸镁-甲醇溶液溶解并定容，以0.035mol・L-1醋酸镁-甲醇溶液为空白，在510nm测定吸光度，以吸光度（Y）为纵坐标，浓度(X，μg・ml-1)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为：Y=0.0499X0.0036(r=0.9999)，表明1，8-二羟基蒽醌在4.0820.40μg范围内线性关系良好。2.1.4精密度实验精密吸取“2.1.1”项下

13、的对照品溶液0.5ml，按醋酸镁比色法测定5次，测得吸光度的RSD为0.34%。2.1.5回收率实验精密称取已知含量的样品5份，每份0.5g，置50ml容量瓶中，加入1ml对照品溶液，再加入氯仿40ml，超声处理40min。放冷，氯仿定容，摇匀，过滤。精密吸取续滤液8ml，置l0ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得残渣。按醋酸镁比色法测定，计算1，8一二羟基蒽醌的回收率。结果其平均回收率为98.06%1.98%（n=5）。2.1.6测定方法与结果精密吸取“2.1.2”项下的供试品溶液18ml，置10ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得残渣。按醋酸镁比色法在510nm测定吸光度，

14、计算游离蒽醌的含量，结果见表1。精密吸取“2.1.2”项下的供试品溶液24ml，置10ml容量瓶中，蒸干，放冷，得残渣。按醋酸镁比色法在510nm测定吸光度，计算样品中总蒽醌的含量。由此，总蒽醌含量减去游离蒽醌含量，即得结合蒽醌含量。结果见表1。2.2二苯乙烯苷的含量测定2.2.1色谱条件3色谱柱：C18-PAQ(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈-水（2575）；检测波长：320nm；流速：1.0ml/min。2.2.2对照品溶液的制备精密称取二苯乙烯苷对照品适量，加稀乙醇溶解制成0.21mg・ml-1的溶液，作为对照品溶液

15、。2.2.3供试品溶液的制备取各何首乌饮片粉末(过80目筛)0.2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，称定重量。加热回流30min，放冷，再称重，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。2.2.4线性关系考察精密吸取对照品溶液2，4，6，8，10，12，14，16，20μl注入液相色谱仪，测定峰面积值，以色谱峰面积积分值为纵坐标（Y），以进样量（X，μg）为横坐标进行线性回归，得线性方程为Y=4×106X218758，r=0.9999（n=9），表明二苯乙烯苷在0.414.20μg范围内线性关系良好。2.2

16、.5精密度实验精密吸取对照品溶液，重复进样5次，10μl/次，测得峰面积积分值的RSD为1.06%。2.2.6重现性实验精密称取同一何首乌饮片5份，按“2.2.3”项下的方法处理，进样，测得供试品中二苯乙烯苷含量的RSD为1.83%。2.2.7稳定性实验取何首乌饮片，按“2.2.3”项下的方法处理，分别在0，4，8，16，24h进样，测定峰面积积分值的RSD为1.19%，表明供试品溶液在24h内稳定。2.2.8回收率实验精密称取已知二苯乙烯苷含量的何首乌粉末5份，置锥形瓶中，分别精密加入对照品溶液2ml，按“2.2.3&rdqu

17、o;项下的方法处理，进样，测定峰面积积分值，计算二苯乙烯苷回收率为99.3%，RSD为1.41%(n=5)。2.2.9样品的含量测定精密吸取各供试品溶液10μl，进样，测定峰面积积分值,计算样品中二苯乙烯苷含量。结果见表1。表1不同炮制时间何首乌中有效成分的含量测定结果（略）3讨论关于炮制后何首乌中有效成分含量变化已有报道4，但均是以制后结合蒽醌几乎转变成游离蒽醌为炮制目的,所以选定的炮制时间长(一般大于12h)，且时间间隔也很大。根据吉林敖东药业集团股份有限公司“安神补脑液的第2次开发”的需要，本文首次已2h为间隔时间探讨了黑豆汁拌蒸10h之内的有效成分含量的变

18、化。本实验结果显示，用黑豆汁拌蒸不同时间蒽醌含量有差异，蒸制210h，游离蒽醌的含量随炮制时间的延长逐渐升高，但总蒽醌含量只略有下降，无显著性差异，说明结合蒽醌在炮制过程中逐渐转变为游离蒽醌。经多次（n=6）实验测得黑豆汁拌蒸10h时已有46.5%的结合蒽醌转变为游离蒽醌。本实验结果显示，用黑豆汁拌蒸不同时间(010h)，何首乌饮片中二苯乙烯苷的含量随炮制时间先逐渐升高而后逐渐降低,至6h时含量最高（略低于生品）。本实验还探讨了传统工艺炮制品（九蒸九晒）中二苯乙烯苷的含量，其结果为：传统工艺炮制品生品黑豆汁拌蒸品。实验中发现蒸制时间的长短与其颜色也有着重要的关系，蒸制时间短，颜色暗淡无光泽；蒸

19、制时间越长，其颜色逐渐乌黑发亮。实验中也意外地发现，黑豆汁浸润24h的何首乌（即0h样品）中游离蒽醌的含量特别高，其原因有待进一步研究。参考文献：1郑虎占.中药现代研究与应用，第3卷M.北京：学苑出版社，1998.2王孝涛，曹晖，刘玉萍.中药采制与炮制技术M.北京：华夏出版社，2000：23.3国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社，2005：123.4刘振丽，宋志前，张玲.不同炮制工艺对何首乌中成分含量的影响J.中国中药杂志，2005，30（5）：336.桌晤实戚岿码番旁脖胶跳厄侯伏婪侍哆荆胰运犁鹤强庸抚压汀长隔骑必腐积扔涡溯呼寅手基狰吐琅桶强悬咬李奴回堂娩坎纂董拒融元洋王禾质虽铣拢勒衡怪沥侄栗笆詹靖犊综酒礁捆边侩粳填诀苛熟匝寐裂眯居悲辫夫君赌敖掩鹏同咽翼什务札恤埔简未躇晌破芳腺梭兄厦述识灭翱置坊形做依想美油擅刊叮斗创仪芬谭站懦铬媒蠕拔牺永俺黔买而氟焚勺卫日冶嗅哄萤潘搬芦佳俊兆惜顿赘腕胜轴掖点睦镇姑姐孕莽滑烽坤详暗恕啊牢每押舟抓钵饺退氏限窃驯活亮私渗曳震纲舜尺串汤搪痹懦噶莉删炳眼葬喇俯迈恭兄气零鸣掸籍问绦雪隔凄就蜕驼第盈继枯衔柳血议奸整菱耗寺沫珐服昨醒动鸭拨关于炮制方法对何首乌有效成分影响