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文档简介
1、 PCAPCA 平板计数琼脂培养基 平板计数琼脂培养基即 PCA,是在 08GB中用于菌落总数测定的 配方: 1、成分 胰蛋白月东 5.0g 酵母浸粉 2.5g 葡萄糖 1.0g 琼脂 15.0g 蒸储水 1000ml pH7.0 0.2 2、制法: 将上述成分加于蒸储水中,煮沸溶解,调节 15min。 pH。分装试管或锥形瓶, 121c高压灭菌 LSTLST 月桂基硫酸盐胰蛋白月东肉汤 月桂基硫酸盐胰蛋白月东肉汤简称 LST,在 08GB中是用于大肠菌群的检测, 金黄色葡萄球菌的检测。 配方: 1、成分: 胰蛋白月东或胰酪月东 20.0g 氯化钠 5.0g 乳糖 5.0g 磷酸氢二钾 2.7
2、5g 磷酸二氢钾 2.75g 月桂基磺酸钠 0.1g 蒸储水 1000ml pH6.8 0.2 2、制法: 将上述成分溶解于蒸储水中,调节 pH,分装到有玻璃小导管的试管中, 高压灭菌 15min。 煌绿乳糖胆盐肉汤 BGLBBGLB 煌绿乳糖胆盐肉汤简称 BGLB,在 08 国标中是用于大肠菌群的检测 大肠杆菌的计数, 每管 10ml。121c 配方: 1、成分: 蛋白月东 10.0g 孚 L糖 10.0g 牛胆粉溶液 200.0ml 0.1%煌绿水溶液 13.3ml 蒸储水 1000ml pH7.2 0.12、制法: 将蛋白月东、乳糖溶解于 500ml蒸储水中,加入牛胆粉溶液 200.0m
3、l(将 20.0g 脱水牛胆粉 溶于200ml的蒸储水中, pH7.0-7.5) 用蒸储水稀释到975ml,调节pH至7.4,再加入0.1%煌绿水溶液13.3ml,用蒸储水补足到 1000ml,用棉花过滤后,分装到有玻璃小导管的试管中,每管 10ml。121c高压灭菌15min。 V V- -P P 试剂 VogesVoges- -ProsProskauerkauer 试剂 V-P试剂是 Voges-Proskauer试剂的简称,用于副溶血性弧菌的 V-P试验。 配方: 1、成分 甲液 0-蔡酚 5.0g 无水乙醇 100.0ml 乙液 氢氧化钾 40.0g 用蒸储水加至 1000ml 2、试
4、验方法 将 3%氯化钠胰蛋白月东大豆琼脂生长物接种 3%氯化钠 MR-VP培养基,36c士 1C 培养 48h。取 1ml培养物转放到一个试管内,力口 0.6ml甲液,摇动。力口 0.2ml乙液,摇动。随意加一点肌酸结晶,4h 后观察结果。阳性结果是呈伊红的粉红色。 尿素培养基是尿素酶琼脂培养基中去掉琼脂的培养基,是用于小肠结肠炎耶尔森氏菌检验。 配方: 1、成分 尿素 20.0g 酵母浸粉 0.1g 磷酸二氢钾 0.091g 磷酸氢二钠 0.095g 酚红 0.01g 蒸储水 1000ml 2、制法 将上述成分于蒸储水中溶解,校正 pH6.8 0.2.不需要加热,过滤除菌,无菌分装于灭菌 小
5、试管中,每管为 3mlo 3、试验方法 挑取琼脂培养基接种于尿素培养基,26 士 1C 培养 24h。尿素酶阳性者由于产碱而使培养 基变成红色。 改良 CCDCCD 琼脂 mCCDmCCD 尿素培 :关苴乔基 mCCD 是改良 CCD 琼脂的简写,在 08GB中是用于空肠弯曲菌检验的。 配方: 1、 基础培养基: 成分: 肉浸液 10.0g 动物组织酶解物 10.0g 氯化钠 5.0g 木炭 4.0g 酪蛋白酶解物 3.0g 去氧胆酸钠 1.0g 硫酸亚铁 0.25g 丙酮酸钠 0.25g 琼脂 8.0g-18.0g 水 1000ml 制法:用水溶解基础培养基成分,煮沸。分装至合适的三角瓶内,
6、121c高压灭菌 15min。 2、 抗生素溶液 成分 头抱哌酮 0.032g 两性霉素 0.01g 利福平 0.01g 乙醇/灭菌水(50/50,体积比)5ml 制法:将上述成分溶解于乙醇/灭菌水混合溶液中。 3、 完全培养基: 成分: 基础培养基 1000ml 抗生素溶液 5ml 制法: 当基础培养基的温度约为 45c左右时,加入抗生素溶液,混匀。待完全培养基的 pH值调至 7.2 0.2(25C)。倾注约 15ml于无菌平皿中,静置至培养基凝固。使用前需预先干燥平板。可将平皿盖打开,使培养基面朝下,置于干燥箱中约 30min,直到琼脂表面干燥。预先 准备的平板未干燥时在室温放置不得超过
7、4h,或在 4c左右冷藏不得超过 7.4. BultonBulton 肉汤 在 08 国标中,Bulton 肉汤是用于空肠弯曲菌检验的。 配方: 1、 基础培养基 成分: 动物组织酶解物 10.0g 乳白蛋白水解物 5.0g 酵母浸粉 5.0g 氯化钠 5.0g 丙酮酸钠 0.5g 偏亚硫酸氢钠 0.5g 碳酸钠 0.6g 维酮戊二酸 1.0g 水 1000ml 制法 用水溶解基础培养基成分,如需要可使用加热促其溶解。将基础培养基分装至合适的锥形瓶 内,121c灭菌 15min。 2、 无菌裂解脱纤维绵羊或马血 对无菌脱纤维绵羊或马血通过反复冻融进行裂解或使用皂角昔进行裂解。 3、 抗生素溶液
8、 成分 头抱哌酮(cefoperazone)0.02g 万古霉素(vancomycin)0.02g 三甲氧芳氨口密咤乳酸盐(trimethoprimlactate)0.02g 两性霉素 B(amphotercinB)0.01g 多粘菌素 B(polymyxinB)0.01g 乙醇/灭菌水(50/50,体积比)5mL 制法 将上述成分溶解于乙醇/灭菌水混合溶液中。 4、 完全培养基 成分 基础培养基(A.1.1)1000mL 无菌裂解脱纤维绵羊或马血(A.1.2)50mL 抗生素溶液(A.1.3)5mL 制法 当基础培养基的温度约为 45c左右时,无菌加人绵羊或马血和抗生素溶液,混匀,将完全 培
9、养基的 pH值调至 7.2 0.2(25C),将培养基无菌分装至合适的试管或锥形瓶中备用。配 制的增菌液在常温下放置不得超过 4h,或在 4c左右避光保存不得超过 7d。 MuellerHintonMuellerHinton 琼脂 MHMH 琼脂 MH琼脂是 MuellerHinton 琼脂的简称,用于空肠弯曲菌的检测配方: 5、 基础培养基 成分 动物组织酶解物 6.0g 酪蛋白酶解物 17.5g 可溶性淀粉 1.5g 琼月旨 5.0915.0g 水 1000mL 制法 将基础培养基成分溶解于水中,煮沸。将基础培养基分装于合适的三角瓶中,121c高压灭 菌 15min。 6、 无菌脱纤维绵羊
10、血 无菌操作条件下,将绵羊血加人到盛有灭菌玻璃珠的容器中,振摇约 10min,静置后除去附有血纤维的玻璃珠即可。 7、 完全培养基 成分 基础培养基(A.7.1)1000mL 无菌脱纤维绵羊血(A.7.2)50mL 制法 当基础培养基的温度约为 45c左右时,无菌加人绵羊血,混匀。根据需要,将完全培养基 的 pH值调至 7.2 0.2(25C)。倾注约 15mL于灭菌平皿中,静置至培养基凝固。使用前需预先干燥平板。可将平皿盖打开,使培养基面朝下,置于干燥箱中约 30min,直到琼脂表面 干燥。预先制备的平板未干燥时在室温放置不得超过 4h,或在 4c左右冷藏不得韶讨 7d_ 哥伦比亚琼脂 哥伦
11、比亚琼脂就是哥伦比亚血琼脂,用于用空肠弯曲菌的检测。配方 1、基础培养基成分 动物组织酶解物 23.0g 淀粉 1.0g 氯化钠 5.0g 琼脂 8.0g18.0g 水 1000ml 制法 将基础培养基成分溶解于水中,加热促其溶解。分装至合适的三角瓶内,121c高压灭菌 15min。 2、无菌脱纤维绵羊血 无菌操作条件下,将绵羊血加人到盛有灭菌玻璃珠的容器中,振摇约 10min,静置后除去附有血纤维的玻璃珠即可。 3、完全培养基 组分 基础培养基(A.3.1)1000mL 无菌脱纤维绵羊血(A.3.2)50mL 制法 当基础培养基的温度为 45c左右时,无菌加人绵羊血,混匀。将完全培养基的 p
12、H值调至 7.2 0.2(25C)o倾注 15mL于无菌平皿中,静置至培养基凝固。使用前需预先干燥平板。 可将平皿盖打开,使培养基面朝下,置于干燥箱中约 30min,直到琼脂表面干燥。预先制备的平板未干燥时在室温放置不得超过 4h,或在 4c左右冷藏不得超过 7d。 脑心浸出液肉汤 BHIBHI BHI是脑心浸出液肉汤的简写,08GB中用于金黄色葡萄球菌的检测。 配方: 1、成分 胰蛋白质月东 10.0g 氯化钠 5.0g 磷酸氢二钠(Na2HPO4?12H2O)2.5g 葡萄糖 2.0g 牛心浸出液 500mL pH7.4=0.2 2、制法 加热溶解,调节 pH,分装 16mmX160mm试
13、管,每管 5mL,置 121,15min 灭菌。 10%10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤 LSTLST LST是 10%氯化钠胰酪月东大豆肉汤的简称,是用于 08GB中金黄色葡萄球菌的检测。 配方: 1、成分 胰酪脐(或胰蛋白月东)17g 植物蛋白月东(或大豆蛋白月东)3g 氯化钠 100g 磷酸氢二钾 2.5g 丙酮酸钠 10g 葡萄糖 2.5g 蒸储水 1000ml pH7.3 仕 2 2 制法 将上述成分混合,加热,轻轻搅拌并溶解,调节 pH,分装,每瓶 50mL,1210c高压灭菌 15min MRSMRS 培养基 在 08GB中,MRS培养基是用于食品中乳酸菌检测的。 配方: 1、成分
14、蛋白陈 10.0g 牛肉粉 5.0g 酵母粉 4.0g 葡萄糖 20.0g 吐温 80 1.0mL 磷 酸 氢 二钾 2.0g 乙酸钠 5.0g 柠 檬 酸 三镂 2.0g 硫酸镁 0.2g 硫酸镒 0.05g 琼脂粉 15.0g 蒸储水 1000mL 2、制法 将上述成分加人蒸储水中,加热溶解,校正 pH6.2,分装后 121c高压灭菌 15min-20mino MCMC 培养基 在 08GB中,MC 培养基是用于食品中乳酸菌检测的。 配方: 1、成分 大豆蛋白陈 5.0g 牛肉粉 3.0g 酵母粉 3.0g 葡萄糖 20.0g 乳糖 20.0g 碳酸钙 10.0g 琼脂 15.0g 蒸储水
15、 1000ml 1%中性红溶液 5.0ml 2、制法 将前面 7 种成分加人蒸储水中,加热溶解,校正 pH6.0,加人中性红溶液。分装后 121c高压灭菌15min20min。 0.5%蔗糖发酵管 在 08GB中,0.5%蔗糖发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%纤维二糖发酵管 在 08GB中,0.5%纤维二糖发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%麦芽糖发酵管 在 08GB中,0.5%麦芽糖发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%甘露醇发酵管 在 08GB中,0.5%甘露醇发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%水杨昔发酵管 在 08GB中,0.5%水杨昔发酵管是用
16、于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%山梨醇发酵管 在 08GB中,0.5%山梨醇发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 0.5%乳糖发酵管 在 08GB中,0.5%乳糖发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 七叶昔发酵管 在 08GB中,七叶昔发酵管是用于食品中乳酸菌生化鉴定的。 VRBVRB- -MUGMUG 琼脂 在 08GB中是用于大肠杆菌计数。 配方: 1、成分: 蛋白陈 7.0g 酵母膏 3.0g 乳糖 10.0g 氯化钠 5.0g 胆盐或 3 号胆盐 1.5g 中性红 0.03g 结晶紫 0.002g 琼脂 15g 琼脂 18g 蒸储水 1000.0mL 4-甲基伞形酮-aD-葡萄糖昔
17、(MUG)0.1g pH7.4 力.1 2、制法 将上述成分溶于蒸储水中,静置几分钟,充分搅拌,调节 pH。煮沸 2min,冷却至 45c 50C 使用。 缓冲蛋白月东水 BPWBPW BPW 是缓冲蛋白月东水的简称,在 08GB中用于阪崎杆菌检验和沙门氏菌的前增菌。 配方: 1、成分 蛋白月东 10g 氯化钠 5g 磷酸氢二钠 9g 磷酸二氢钾 1.5g 蒸储水 1000ml pH7.2 2、制法 加热搅拌至溶解,调节 pH,121c高压灭菌 15min。 改良月桂基硫酸盐胰蛋白月东肉汤一万古霉素 mLST-Vm mLSTmLST- -VmVm 是改良月桂基硫酸盐胰蛋白月东肉汤一万古霉素的简
18、称,是用于坂崎杆菌检验。 配方: 1、改良月桂基硫酸盐胰蛋白月东(mLST)肉汤 成分 氯化钠 34.0g 胰蛋白月东 20.0g 乳糖 5.0g 磷酸二氢钾 2.75g 磷酸氢二钾 2.75g 十二烷基硫酸钠 0.1g 蒸储水 1000mL pH6.802 制法 加热搅拌至溶解,调节 pH。分装每管 10mL,121c高压灭菌 15min。 2、万古霉素溶液 成分 万古霉素 10.0mg 蒸储水 10.0mL 制法 10.0mg万古霉素溶解于 10.0mL蒸储水,过滤除菌。万古霉素溶液可以在 0C-5c保存 15 天。 3、改良月桂基硫酸盐胰蛋白月东肉汤一万古霉素 每 10mLmLST加人万
19、古霉素溶液 0.1mL,混合液中万古霉素的终浓度为 10g/mL。注意: mLS-Vm必须在 24h 之内使用。 阪崎肠杆菌显色培养基 DFIDFI 琼脂 DFI琼脂是阪崎肠杆菌显色培养基的简称,是用于阪崎肠杆菌的分离培养。 配方: 1、成分 胰蛋白月东 15.0g 大豆蛋白月东 5.0g 氯化钠 5.0g 柠檬酸铁按 1.0g 硫代硫酸钠 1.0g 脱氧胆酸钠 1.0g 5-澳-4-氯-3-口引味-“-D-口比喃葡萄糖 0.1g 琼脂 15g 蒸储水 1000mL pH7.3 仕 2 2、制法 加热搅拌至完全溶解,调节 pH,121c高压 15min,冷却至 50C,倾注平板。 4%2,3,
20、54%2,3,5 一氯化三苯四氮吵水溶液 TTCTTC TTC 是 2,3,5 一氯化三苯四氮口坐的简称,在 08GB是中用于鲜乳中抗生素残留检验。 配方: 1、成分 2,3,5 一氯化三苯四氮哩(TTC)1g 灭菌蒸储水 5mL 2、制法 称取 TTC,溶于灭菌蒸储水中,装褐色瓶内于 2c5c保存。如果溶液变为半透明的白色 或淡褐色,则不能再用。临用时用灭菌蒸储水 5 倍稀释,成为 4%水溶液。 澳甲酚紫葡萄糖蛋白月东培养基 在 08GB中,澳甲酚紫葡萄糖蛋白月东培养基是用于鲜乳中抗生素残留检验。 配方: 1、成分 蛋白月东 10.0g 葡萄糖 5.0g 2%漠甲酚紫乙醇溶液 0.6mL 琼脂 4.0g 蒸储水 1000mL 2、制法 在蒸储水中加人蛋白陈、葡萄糖、琼脂,加热搅拌至完全溶解,调节 pH至 7.10.1,然后再加人嗅甲酚紫乙醇溶液,混匀后,115c高压灭
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