小剂量氯化铵对小鼠学习经历的阻碍

1、小剂量氯化铵对小鼠学习经历的阻碍徐明李旸张翔麻亦柏李大进董薇【摘要】目的观看小剂量氯化铵对小鼠学习经历功能的阻碍。方式昆明种小鼠40只，随机分为2大组，每大组再随机分为2组（n=10）：生理盐水组（腹腔注射生理盐水25ml/kg），氯化铵组（腹腔注射%（化镂25ml/kg）。通过水迷宫实验和Y型迷宫实验观看氯化铵对小鼠学习经历功能的阻碍。结果用药后氯化铵组与生理盐水组相较：动物水迷宫实验时刻延长，错误次数增多（P<；Y迷宫实验学习次数增多（P&lt；。停药24h后再次实验，氯化镂组与生理盐水组水迷宫实验和Y迷宫实验结果不同无显著性（P>。结论单次小剂量注射氯

2、化铵能抑制小鼠短时间内的学习经历功能，但在停药24h后抑制作用消失，可不能造成持久性的学习经历障碍。【关键词】氯化铵；小鼠；学习；经历Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsoflow-doseammoniumchlorideonlearningandmemoryinmice.Methods40Kunmingmicewererandomlydividedintogroups:2NScontrolgroupsand2ammoniumchloridetestgroups.Thetestgroupwereeachgiven%ammoniumchloride2

3、5ml/kg.Themicewerethenconductedtotakewater-mazetestandY-mazetesttoevaluatetheeffectsofammoniumchlorideonlearningandmemoryfunction.ResultsComparedwiththeresultsofNSgroups,itwasfoundthatammoniumchloridelengthenedtheswimminglearningtimeandincreasedthefrequencyoferrormadeinwater-mazeandY-mazetests（P&

4、;lt;.However,24hoursaftertheinjectionofammoniumchloride,thedifferencesbetweentwogroupswerenomoredetectableinthetests.ConclusionSinglelow-doseammoniumchloridecantemporarilyimpairthelearningandmemoryinmice,causingnopersistentmemorydefect.Keywords:ammoniumchloride;mice;learning;memory氯化铵进入到体内会引发血氨浓度的升高

5、，当体内血氨浓度升高到必然程度的时候，大量的氨会进入脑内，通过干扰脑内能量代谢、改变脑内神经递质、阻碍神经细胞膜功能等机制引发脑功能障碍，轻度表现有情绪和行为异样，重度有昏睡、昏迷乃至死亡1-2。本实验观看了小剂量氯化铵中毒对小鼠学习经历能力的阻碍，为进一步研究氨中毒引发脑功能改变的机制提供实验依据。1材料和方式实验动物昆明种小鼠，体重2025g,雌雄各半，由徐州医学院实验动物中心提供合格证号：（苏）2002-0038。实验前2天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日9:0012:00进行实验。要紧仪器及药品MG-3Y迷宫刺激器（安徽淮北正华生物仪器设备）。氯化镂（徐州试剂总厂，批号0708

6、23）,用生理盐水（N0稀释至所需浓度。动物分组按分层随机区组设计将小鼠分组，使各组小鼠雌雄比例、平均体重大体相同。在水迷宫（徐州医学院麻醉基础实验室提供）实验和Y迷宫实验中均将小鼠分为2组（n=10）:生理盐水组和氯化镂组。给药方式和剂量生理盐水组腹腔注射生理盐水（25ml/kg），氯化铵组腹腔注射氯化铵（%氯化铵25ml/kg）。两组在给药后5min进行水迷宫和Y迷宫实验，并于24h后不给药重复上述实验。水迷宫实验3动物进行水迷宫实验，检测小鼠空间分辨学习能力。水迷宫含4个盲端，终点有一高出水面的平安区。水温操纵在（25±1）。实验分4d进行，仅第3天测试前5min给药，余均不给

7、药：第1天训练A点1次和B点3次，第2天训练C点3次，第3 天测C点，第4天测C点。每次训练时刻均限定在3min内，超时者按3min计。每只小鼠每次训练和测试均记录小鼠由入水至抵达各终点的时刻（抵达时刻）和进入盲端的次数（错误次数）。别离记录第3、4 两天从C点抵达终点时刻和错误次数的均值作为学习经历成绩。Y迷宫实验4应用MG-3Y迷宫刺激器，测试成绩分为学习成绩和经历成绩。宫箱设有3条通道，每臂结尾有信号灯，箱底通以交流电。灯光指示为平安区，不通电。将小鼠置于一支臂端，另两支任意一支给灯光信号，示平安区。适应1min后给予电击，以小鼠直接逃至平安区为正确反映，不然为错误。实验共3d,第1天给

8、药后5min开始实验，学习能力以小鼠达到持续9次以上正确反映时所需的电击总次数为准。别离在24h、48h后，不给药再次测试，以电击10次中正确反映的次数为准，以衡量其经历能力。所有学习经历测试均在安静、暗光下进行。统计学处置统计学数据以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较用t查验，多组间比较用完全随机设计方差分析法（ANOVA和q查验,P<为统计学上有显著性不同。2结果与生理盐水组相较，氯化铵组第3天水迷宫实验抵达时刻延长（P<），错误次数增多（P<）；Y迷宫实验学会次数增多，不同有显著性（P<。用药后第二、3天，各

9、组两法观测，不论是达到时刻、错误次数仍是正确反映的次数不同均无显著性（P>。见表一、2。表1小剂量氯化铵对小鼠学习经历的阻碍表2小剂量氯化铵对小鼠学习经历的阻碍（Y迷宫实验，n=10,x±s）3讨论血氨要紧来自肠道、肾脏和骨骼肌生成的氨，但胃肠道是氨进入躯体的要紧门户。正常人胃肠道每日可产氨4g，大部份是由血循环弥散至肠道的尿素经肠菌的尿素酶分解产生，小部份是食物中的蛋白质被肠菌的氨基酸氧化酶分解产生。机体清除血氨的要紧途径为：尿素合成，绝大部份来自肠道的氨在肝脏中经鸟氨酸代谢环转变成尿素；脑、肝、肾等组织在ATP的供能条件下，利用和消耗氨以合成谷氨酸和谷氨酰胺；肾脏是

10、排泄氨的要紧场所，除排出大量尿素外，在排酸的同时，也以NH4+勺形式排除大量的氨；血氨太高时可从肺部呼出少量1-2。当氨产生、摄入过量（如本实验），或清除障碍（如肝功能衰竭）的时候，就会使血氨水平升高，专门是游离型的NH切高，游离的NH的毒性，且能透过血脑屏障进入脑内。氨进入脑内会干扰脑内能量代谢，改变脑内神经递质，阻碍神经细胞膜功能，还有增加脑水肿、改变基因表达和诱导线粒体通透性改变等作用2,5，从而引发脑功能障碍。氯化铵进入体内后，能够使血氨浓度迅速升高。本实验注射的小剂量氯化铵可不能致使小鼠显现重症的脑功能障碍，如痉挛、昏睡、昏迷或死亡，但小鼠在给予小剂量氯化铵后显现了学习和经历能力的下降，在停药24h以后，小鼠的学习经历能力恢复正常，本实验提示单次小剂量给予氯化铵能够引发小鼠短时间学习经历功能的障碍，但可不能造成持久性损害。【参考文献】1金惠铭,王建枝.病理生理学M.第6版.北京:人民卫生出版社,2006:248-261. 2KatayamaK.AmmoniametabolismandhepaticencephalopathyJ.HepatolRes,2004,30S:73-80. 3徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方式学M.第3版.北京:人民卫生出版社,2002:226-834. 4王跃春，王子栋，孙黎明，等.动物学习经历能力的Y-型迷宫测试