云南白药创可贴的药理毒理研究

1、云南白药创可贴的药理毒理研究张立群1 张志伟 1 高崇昆 1 （1.云南白药研究院,云南 昆明650032）摘要：目的 研究云南白药创可贴的药理毒理作用。方法 采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、ADP诱导血小板聚集、小鼠剪尾法、冰醋酸所致的小鼠疼痛、器械所致家兔皮肤损伤、皮肤刺激性试验及皮肤过敏性试验，观察云南白药创可贴对皮肤小创伤的药理毒理作用。结果云南白药创可贴对小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用；并有促ADP诱导的血小板聚集；并有促小鼠止血、减少出血量的作用；并有镇痛及促伤口愈合作用；对皮肤无刺激性和过敏性。结论 云南白药创可贴具有抗炎、止血、镇痛、愈伤的作用，且无明显皮肤刺激性和过敏性。关键词：云

2、南白药创可贴；抗炎；镇痛；止血；愈伤；毒理The Pharmacological and Toxicological Effect Study of Yunnan Baiyao Wound-plasterZHANG Li-qun1，ZHANG Zhi-wei1，GAO Chong-kun1，(1.Research Institute of Yunnan Baiyao, Yunnan Kunming 650032； )Abstract：Objective: To study the pharmacological and toxicological effects of Yunnan Baiya

3、o wound-plaster. Methods: Ear edema model induced by xylene in mice, ADP-induced platelet aggregation, mice tail-cut methods, pain caused by acetic acid, skin injury of rabbit caused by physical instruments, skin irritation and allergy test were used to investigate the pharmacological effects of Yun

4、nan Baiyao wound-plaster in curing small skin wound. Results: Yunnan Baiyao wound-plaster can significantly inhibit the edema induced by xylene in mice; promote the platelet aggregation induced by ADP; accelerate hemostasis and reduce bleeding volume. Also it had the analgesic action and can acceler

5、ate the wound heeling, with no skin allergy or irritation. Conclusion: Yunnan Baiyao wound-plaster has the effects of anti-inflammation, hemostasis, Analgesia and wound heeling, with no obvious toxic and side effects.Key words: Yunnan Baiyao wound-plaster；Antiinflammatory；Analgesia；Hemostasis；Wound

6、healing；Toxicology云南白药是具有百年历史的伤科经典名药，具有止血和愈伤作用。云南白药创可贴充分利用云南白药止血愈伤的显著功效，与现代先进的卫生材料有机结合，使用方便，快捷、有效。云南白药创可贴是云南白药外用的一次变革，它不仅具有传统创可贴物理止血与保护创口的作用，而且由于内置云南白药提取物的药芯，具备了云南白药的功效。本试验用炎症、疼痛、出血、创伤的不同动物模型，研究了云南白药创可贴抗炎、镇痛、止血、愈伤的功效及对皮肤的刺激性和过敏性。1、材料与仪器1.1动物小鼠：ICR种，昆明医学院动物室提供，合格证号：SCXK（滇）2005-0008；家兔：云南省昆明市光明农场提供。1.

7、2 试药与试剂：云南白药创可贴浸膏（云南白药提取物），云南白药研究院提供；阿斯匹林片：40mg/片，昆明友谊制药厂生产，批号：061117；ADP：Sigma公司生产，配制成100g/ml生理盐水溶液；冰醋酸：天津市博迪化工有限公司生产2，4二硝基氯化苯：上海试剂一厂生产2、实验方法与结果2.1 云南白药创可贴对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响1取ICR小鼠50只，雄性，体重2325g,随机分为空白对照组、云南白药创可贴高、中、低剂量组、阿斯匹林组。空白对照组灌胃等量的蒸馏水，其余各组按剂量灌胃给药；一小时后，每鼠左耳涂501二甲苯致炎，右耳作对照，30分钟后拉颈处死动物，剪下两耳并打下圆耳片，分

8、析天平上称重，以（左耳重-右耳重）/右耳重作为肿胀率并计算抑制率，比较各给药组与空白对照组的肿胀率，结果见表1。表1 云南白药创口贴对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响组 别动物数（只）给药剂量（g/kg）肿胀率（）抑制率（%）空白对照10 00.55±0.80云南白药创口贴高剂量100.500.13±0.06*76.4云南白药创可贴中剂量100.250.18±0.16*67.3云南白药创可贴低剂量100.120.21±0.15*61.8阿斯匹林100.400.17±0.07*69.1*与空白对照组比较P0.01实验结果：云南白药创可贴高、中、低剂量

9、组均能明显对抗二甲苯所致小鼠耳廓肿胀。2.2 云南白药创可贴对ADP诱导的家兔血小板聚集的影响1取家兔6只，体重22.5kg，心脏取血，EDTA抗凝，离心分别取出PRP及PPP。于血小板聚集仪上体外侧定云南白药创可贴提取物高、低剂量对ADP诱导的家兔血小板聚集作用，实验结果见表2。表2 云南白药创可贴对ADP诱导的家免血小板聚集的影响组 别样本数(个)药物浓度(g/ml)血小板最大聚集强度（%）空白对照组6024.46±11.06云南白药创可贴高剂量60.05 88.02±10.42*云南白药创可贴低剂量60.02570.45±9.67*与空白对照组比较P0.01

10、实验结果表明：云南白药创可贴能促进ADP诱导的血小板聚集。2.3 云南白药创可贴对小鼠出血时间及出血量的影响2取ICR小鼠80只，1822克，雌雄各半，随机分为对照组，云南白药创可贴高剂量，云南白药创可贴低剂量组，阳性药对照组（云南白药混悬液）。每天灌胃给药一次，连续3天，于末次给药后小时以利剪将小鼠尾尖8mm处剪断，待血液自行溢出开始计时，每隔30s用滤纸吸去血滴一次，直至血液自然停止，记录出血时间，剪下渗血滤纸，置碱液中萃取，萃取液于520mm波长处比色，以透光率间接表示出血量，实验结果见表3。表3 云南白药创可贴对小鼠出血时间及出血量的影响组别动物数（只）给药剂量(g/kg)出血时间（）

11、透光率（）对照组206.49±2.9424.58±21.86云南白药创可贴高剂量200.52.92±2.79*72.78±32.89*云南白药创可贴低剂量200.253.92±2.56*47.66±34.93*云南白药混悬液202.5g/kg3.28±2.78*62.52±33.30*与空白对照组比较P0.01实验结果：云南白药创可贴高低剂量均能缩短小鼠剪尾出血时间，减少出血量。2.4 云南白药创可贴对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响2取ICR小鼠40只，雌雄各半，体重1822g，随机分为对照组，云南白药混悬液组，云南白药

12、创可贴高剂量组、低剂量组，每天灌胃给药一次，连续3天，于末次给药后0.5小时，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.1ml/10g，记录注射致痛剂后20分钟内各鼠扭体次数，结果见表4。表4 云南白药创可贴对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响组 别动物数（只）给药剂量（g/kg）扭体次数抑制率（%）对照组10 60.4±11.7云南白药创可贴高剂量10 0.5 32.0±18.4* 47.0云南白药创可贴低剂量10 0.25 30.8±12.7* 49.0云南白药粉混悬液10 2.5 31.6±13.7* 47.7与对照组比较 *P0.05 * P0.01实验结果：云南白药

13、创可贴高低剂量组均可明显减少小鼠注射致痛剂后产生的扭体次数。2.5 云南白药创可贴对家兔破损皮肤的影响破损皮肤的制备：家兔10只，用手术刀片在家兔脱毛皮肤上划破，深度为0.3cm，长度为2cm，以出血为度。每只家兔的6块破损皮肤上分别贴创可贴8mg/片两块，23mg/片两块、空白创可贴（不含云南白药）两块，24小时后，撕去创可贴，观察伤口的愈合情况。经统计学Ridit法检验，空白组分别与云南白药创可贴8mg/片组、24mg/片组比较均有极显著性差异（P0.01）；8mg/片组与24mg/片组之间无显著性差异（P0.05）。结果表明：云南白药创可贴对家兔破损皮肤有较好的愈创作用。2.6 云南白药

14、创可贴皮肤刺激性试验32.6.1 对完整皮肤的刺激性试验成年健康家兔12只，雌雄各半，体重22.5kg，试验前24h将家兔背部脊柱两侧共四块皮肤去毛，每块面积约4cm2，将左侧的两块以完整的皮肤分别贴含云南白药提取物8mg/片及23mg/片的云南白药创可贴各一片，将右侧的两块以完整的皮肤贴不含药的创可贴作为对照。贴药24h后，用温水清洗皮肤，观察贴药皮肤的红斑和水肿反应，连续贴药7天，以同样方法观察皮肤反应。按皮肤刺激性反应评分标准评分，计算刺激性反应值。结果表明：云南白药创可贴8mg/片及23mg/片组对家兔完整皮肤的刺激性反应值均为0；试验结果表明：云南白药创可贴对家兔完整皮肤无刺激性。2

15、.6.2 对破损皮肤刺激性试验成年健康家免12只，雌雄各半，体重22.5kg，用上述方法制备去毛皮肤，再制作破损皮肤，即采用手术刀将去毛皮肤消毒并划破，以轻度渗血为度。给药及观察方法同完整皮肤刺激性试验。按皮肤刺激性反应评分标准评分，计算刺激性反应值。试验结果：云南白药创可贴8mg/片及23mg/片组对家兔破损皮肤的刺激性反应值均为0；试验结果表明：云南白药创可贴对家兔破损皮肤无刺激性。2.7 云南白药创可贴皮肤过敏性试验3豚鼠24只，雌雄各半，体重250300g，随机分成3组，生理盐水对照组、云南白药创可贴组（云南白药提取物0.05g/ml）、阳性对照组（1%2、4二硝基氯代苯）。试验前24

16、h，将豚鼠背部脊柱两侧去毛各一块，每块面积3×3cm，以皮肤涂抹法给药0.2ml，分笼饲养，试验第7天和第14天以同样的给药方法重复给药。第28天激发给药，将受试物0.2ml涂于豚鼠背部右侧去毛区，阳性对照组涂1%2、4二硝基氯代苯，6h后洗掉受试物，即刻观察。于24、48、72h多次观察皮肤过敏情况，按皮肤过敏性反应评分标准评分，将皮肤的红斑、水肿等全身过敏反应的豚鼠例数除以豚鼠总数，即得致敏率。试验结果：阳性对照组豚鼠皮肤致敏率为100%，生理盐水对照组及云南白药创可贴组豚鼠致敏率均为0；试验结果表明：云南白药创可贴对家兔皮肤无过敏反应。3、讨论云南白药创可贴是云南白药系列产品之

17、一，本试验研究采用的方法多为常用的经典方法。近年来，为更好地挖掘云南白药的新用途，研究人员从各方面对云南白药及其系列产品进行了广泛、深入的研究，特别对其止血、愈伤的作用机理进行了研究。止血研究结果表明：云南白药创可贴具有较强的促血小板聚集作用，有促使凝血酶原时间、出血时间和凝血时间缩短的作用。其止血机理是促血小板膜表面糖蛋白Gpb/a复合物和GMP140表达以及促血小板活化；血小板膜表面糖蛋白与血小板的粘附、聚集和释放的功能密切相关4。当血小板活化时，糖蛋白Gpb/a复合物和GMP140由血小板开放管道系统从膜内转移到膜外，使它在膜上的表达增加5，同时增加了与纤维蛋白原的结合，促进血小板聚集。

18、云南白药创可贴的另一重要作用是促伤口愈合，其愈伤机理是促进机体血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的生成，这些生长因子能够促进细胞不断增值，加速新生血管生成，从而使伤口组织供血丰富，有益于伤口的愈合6。本试验结果证明，云南白药创可贴具有止血、抗炎、镇痛、愈伤的作用，且对皮肤无刺激性、无过敏性。云南白药创可贴的应用，给小创口带来了更全面的治疗与呵护，它是云南白药宝贵价值的再挖掘。参考文献：1徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学M.北京:人民卫生出版社,1982:532,841.2李仪奎.中药药理实验方法学M.上海:上海科学出版社,1991:496,353.3中华人民共和国卫生部药政局，中药新药研究指南Z.1994:210