植物组织培养期末复习题

1、植 物 组 织 培 养 期 末 复习题一、填空题（每空分）1 .植物组织培养按培养对象分为_组织培养_、_器官培养 不胎培养、细胞培养_、 原生质体培养等几种类型.2 .在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的Cac” 2H2O和葡聚糖硫酸钾其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂.3 . 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞具有全能性 的理论概念；1943年White提出植物细胞全能性 ”学说，并出版了植物组织培养 手册，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。4 .用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在80 C的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在 150

2、 C的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是 60 C .5 .细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的全部遗传信息口形成完整植株的潜在的能力。6 . 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了MS培养基,其特点是 无机盐浓度较高,且为较稳定的。7 . 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 _根Jl勺生长.这.时J兑分 化_占主导地位；比值高促进 芽 的牛长.这时 分化 占主导地位.9.组织培养的特点是：无菌、人工控制、一离体.10 . 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得单倍体植株,这促进了花药和花粉培养的研究。11

3、.在组织培养中，不耐热的物质用过滤一 _法灭菌，而培养基常用湿热灭菌 法灭菌.13.在组织培养中，非洲菊是靠 从生芽 的方式进行繁殖的、而蝴蝶兰是以原球茎 的方式进行快繁的。15 .在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以、带 _1-2_个叶原基为好。16 .原生质体的分离有机械法和酶解法两种方法.17 .进行植物组织培养最基本的前提条件是离体 。18 .植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为 适光 培养和 嗜光 培养。20 .组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是 黄化（污染）、褐化、玻璃化21 . White培养基 无机盐 浓度低，适合生根培养。22

4、.在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成一正比一,而与脱毒效果成 反比。23 . 一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"_ 脱分化 "。25 .茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为普通茎尖培养和茎尖分生组织培养两种类型。27 .愈伤组织的形态发生有器官发生禾口体细胞胚发生两种情况。28 .植物组织培养按培养的方式分为一液体 培养和一固体 培养。29.1960年，英国学者Cocking用一真菌纤维素酶酶解 分离原生质体成功，从而创新原 生质体的培养技术。30.大多数植物组织培养的适宜温度范围是23-25 C、培养基的PHffi是.3

5、2 .在组织培养中，ZT和GA必须用过?腺 法灭菌，而接种室空间采用紫外线照射 或 甲醛熏蒸法灭菌.33 .不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生cl离子（CO-） 来杀菌的；升汞是靠 汞离子 来达到灭菌目的。34 .幼胚培养时，其发育过程有 早熟萌发?胚性发育、形成愈伤三种方式。35 .植物的胚胎培养，包括 胚胎培养、幼胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及 子房的培养.38 . 一个已停止分裂的成熟细胞转变为 分生 状态，并形成 愈伤组织.的现象称为"脱分 化”.39 .由胚乳培养可以获得 单 倍体植株，经秋水仙素处理可以获得 一 倍体植株.40 .去除植

6、物病毒的主要方法是理化法和组培法两种方法，当把二者结合起来脱毒 效果最好.41 .花药培养是 器官 培养,花粉培养属于细胞 培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成单倍体植株.43 .原生质体的融合可实现 体细胞 的杂交，其融合的方式分为 自然融合和人工诱 导两类.二、不定选择题（每小题2分）1 .培养室里的湿度一般保持在_C_.A 3040% B 5060% C 7080% D 8090%2 .下列不属于生长素类的是AD A Kt ; B IAA; C NAA D ZT3 .影响培养基凝固程度因素有 ABD.A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温

7、度；D培养基的PH4.活性炭在组织培养中的作用有 ABCA吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化；C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D增加培养基中的养分;5 .下列具有细胞全能性的细胞是：ABCDA成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞 D番茄的受精合子6 .第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是 B:.A Morel； B Haberland ; CO Schleiden ; DU White7 .下列培养基中 C 无机盐的浓度最低。A MS培养基；B B5培养基；C White培养基；N6培养基8 .高温易被破坏分解的植物激素是_AbD_A IAA ; B

8、GA ; C NAA ; D Zt9 .从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历ACDE个时期。A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期10 .下列不属于活性炭在组织培养中作用的是 D.A吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化；C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长； D增加培养基中的养分;11 .下列不属于细胞分裂素的植物激素是 B 0A 6-BA; B NAA C Zt ； D Kt12 .植物组织培养的特点是 ABCA培养条件可人为控制；B生长周期短，繁殖率高；C管理方便；D产量大14.下列不属于大量元素的盐是 C 0A NH4NO3 B KNO3 ; C ; D15 .

9、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是ABCDA细胞分裂加快B 正在分裂的细胞体积小，内无液泡C细胞的核和核仁增至最大 D细胞中的RNAt量减少，16 .在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是：厚A稳定原生质体的形态而不使其被破坏 B支持作用C提供营养D调节PH值17 .能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：_ABA GA B IAA; C NAA D Zt 3.下列实验中可能获得单倍体植株的是 BCD。A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养18 .在组培条件下，花粉的发育大致有下列几种途径：cdA营养细胞发育途径B 生殖细胞发育途径C营养细胞和生殖细胞

10、同时发育途径 D花粉的均等分裂19 .同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞20 .第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是 B:.A Morel ； B Haberland ; C Schleiden ; D White21 .脱落酸（ABA需要用 C法灭菌。A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌；D高压湿热灭菌；23 .下列实验中可能获得三倍体植株的是C .A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养24 .原生质体纯化步骤大致有如下几步：将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，

11、一般以 500r/min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中（除不含酶外，其他成分和酶液相同），再次离 心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为 40100uml勺滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛 管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为1041067 ml。正确的操作步骤是：CADB© C D25 .下列不属于生长素类的植物激素是 A DA Kt B IAA C NAA D ABA26 .玉米素（ZT）需要用 C法灭菌.A灼烧灭菌 B 干热灭菌 C 过滤

12、灭菌 D 高压湿热灭菌三、判断题（对的画“，”；错题画“X”，并改正。每小题 2分）1 . 一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。 V2 .由胚乳培养获得的三倍体植株，也一定要进行染色体倍数的检查.V3 . 一股来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。x4 .经过花药培养所获得的植株都是单倍体。X5 . 2 , 4D可用0. 1mol/L的HCl助溶，再加蒸储水定容. 乂6 .环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一股要求80% -90 %的相对湿度。V7 .幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易.V8 . 一般的说，PHffi高于时，培养基

13、全变硬；低于 5时，琼脂不能很好地凝固。 V9 .在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸储水定容。 V10 .未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，易培养.V11 .花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。X12 .通过子房的培养，即可能得到单倍体植株，又可能得到二倍体植株.V13 .在配制NAA®液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸储水定容15 .环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分，湿度过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。V16 . White培养基无机盐浓度低，适合生根培养。 V17 .由性细胞发育

14、而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚.X18 . 2 , 4-D可用0. 1mol/L的NaOK KOH®溶，而后加无菌水定容。V20 .二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织.X21 .在MS勺培养基成分中，属于微量元素.X22 .未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，不易培养 .X23 .固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。X24 .兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁，非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁.X25 .用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好.X四、名词解释1 .植物组织培养：是指在无菌和人工控制的

15、环境条件下，利用适当的培养基，对离体的 植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。2 .细胞全能性：指每一个植物细胞都携带有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表 达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器 官甚至胚状体，直至形成完整植株的潜在能力。3 .脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失 去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化 细胞特性的细胞的过程。4 .母液：在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各 种化学成分所花费的

16、时间和误差， 常常将配制培养基所需无机大量元素、 微量元素、铁盐、 有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液5 .驯化：指外来植物通过改变其遗传性状以适应新环境的过程6 .外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体7 .愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织， 并在体外培养使之再分化成植株的技术。8 .单细胞培养.:亦称游离细胞培养(free cell culfure )。是指酵母菌、细菌等单细胞 生物的培养，或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养。9 .灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物

17、以及芽抱,使之达到无菌保障水平。10 .玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养 物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。11 .无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木。12 .胚状体：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了 胚胎发育过程所形成的胚 状类似物，此现象无论在 体细胞培养还是生殖细胞培养中均可以看到,因而统称为 体细胞 胚或胚状体。在离体 植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞，经过 胚胎 发生和发育过程,形成与 合子胚相类似的结构13 .细胞全能性：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基

18、因组，并具有发育成完整植株 的潜在能力。14 .指示植物：指示植物与被指示对象之间在全部分布区内保持联系的称为普遍指示植 物；只在分布区的一定地区内保持联系的则称为地方指示植物。15 .消毒：消毒 是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽抱的方法。通常用化学的方 法来达到消毒的作用。16 .植物生长物质：是指一些在低浓度下能调节植物生长发育的微量有机物。植物生长物 质包括五大类被公认的植物激素和其他内源植物生长调节物质。17 .单倍体：只含有配子体染色体组数的植株。18 .无菌操作：用于防止 微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操 作19 .脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织

19、、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分 生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。21 .花粉胚：花粉胚就是用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚，发育成的植株就只有 正常胚一半的染色体组，所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子。22 .褐变：饲料在加工过程中或长期贮存于湿热环境下，其所含的氨基化合物如蛋白质、氨基酸及醛、酮等与还原糖相遇，经过一系列反应生成褐色聚合物的现象称为褐变反应， 简称褐变。24 .指示植物法：25 .再分化：离体培养的植物细胞和组织可以脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几 种类型的细胞、器官、组织、甚至完整植株。26 .平板培养：亦称平面培养

20、。将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状，然后在此 平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官，这种培养称为平板培养27 .次生代谢产物：植物中一大类并排植物生长发育所需的小分子化合物，具产生和分布 通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。次生产物在植物中的合成与分解过程称为 此生代谢。28 .人工种子：又称合成种子， 指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有 养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。五、简答题1 .植物组织培养有哪些特点？答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和 细胞。特点：培养条件可人为控制

21、植物生长周期短，繁殖系数高 管理方便，不受 季节环境条件影响，有利于工厂化生产和自动化控制。2 .培养基一般包括哪些基本成分？其作用是什么？如何配制？答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、 天然物质、Ph凝固剂等。水分是一切生物生命活动的物质基础，是很多生物化学反应的 原料和代谢产物。无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的 营养元素。有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质。植物 生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织，还可以诱导不定芽、不定胚的形 成。天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性

22、物质。pH过高时，培养基会变硬;pH过低时，则影响培养基的凝固。凝固剂是在配制固体培养基时使用，使培养基凝固。其 他添加物是有时为了减少外植体的褐变，需要向培养基中加入一些防止褐化的物质。3 .简述愈伤组织细胞分化4 . 原生质体融合有哪几种主要方法?答： 植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力 1.自发融合2.诱发融合：a, NaNO处理b ,高PH值一高浓度钙离子处理c ,聚乙二醇（PEG处理 d ，电融合 3. 化学融合5. 组织培养中，pH值起什么作用？如果pH值过高或过低会有什么后果？6. 植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容是什么

23、?答：（1） 培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。（ 2）培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理。（ 3）无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。（ 4）培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH渗透压等各种化学环境条件。7. 培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌 ?答： 1）培养基一般采用湿热灭菌， 如果培养基中的有些成分高温易分解， 则可采用过滤灭菌。（2）培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。（3）植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具

24、体操作如下：A）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植 体用流水冲洗干净。B）用70%勺酒精浸润材料30s左右。C）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时 不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。D）植物材料用无菌水冲洗3-5次，以除去灭菌剂。8. 由胚乳培养获得的植株，是否一定要进行染色体倍数的检查?为什么?9. 花药培养产生的植株染色体倍性如何?其产生的原因是什么?10. 为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定?为什么已通过病毒（ 特定病毒 ） 鉴定的无病毒苗还须重复鉴定 ?11. 使用植物生长物质应注意些什么 ?12. 为什么幼

25、胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂?13. 胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用 ?14. 试比较花药培养与花粉培养的异同。15. 简述酶法分离原生质体的步骤 .答：叶片表面消毒-去除表皮，将叶片切成小块-叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶 液中-摇床保温培养-原生质体沉到培养皿底部-除去酶溶液-将原生质体移入CPWt洗-离心-清洗基质两次-重悬浮于培养基16. 影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些?17简述人工种子生产步骤？答:选取目标植物 -从适合的外植体上诱导愈伤组织-将愈伤组织转移到液体培养基愈 伤组织在液体培养基中增生扩大-愈伤组织转移至无激素培养基-产生体细胞胚包裹人工种皮炼苗-温室（大棚）播种 获得目标植物 18 愈伤组