唾液淀粉酶的影响因素

1、背景酶具有催化效率高，专一性强，作用条件温和等特酶具有催化效率高，专一性强，作用条件温和等特点，目前在科研、食品加工、饲料生产、医疗等方点，目前在科研、食品加工、饲料生产、医疗等方面具有广泛的应用。唾液淀粉酶存在于唾液中，是面具有广泛的应用。唾液淀粉酶存在于唾液中，是一种有催化活性的蛋白质，可将淀粉水解为麦芽糖。一种有催化活性的蛋白质，可将淀粉水解为麦芽糖。影响其活性的因素有很多，除了本身结构特点和结影响其活性的因素有很多，除了本身结构特点和结构功能特点影响之外，还主要包括构功能特点影响之外，还主要包括PHPH值、温度、重值、温度、重金属离子、抑制剂、激活剂及酶浓度等。金属离子、抑制剂、激活剂

2、及酶浓度等。实验背景实验原理麦芽糖、葡萄糖遇碘不显色麦芽糖、葡萄糖遇碘不显色淀粉水解产物与碘液反应生成不同的颜色反应淀粉水解产物与碘液反应生成不同的颜色反应淀粉淀粉+碘生成蓝色碘生成蓝色糊精糊精+碘根据水解程度，由紫色到橙色，水解越彻底，碘根据水解程度，由紫色到橙色，水解越彻底，颜色越浅，直到生成无色糊精（碘不显色）颜色越浅，直到生成无色糊精（碘不显色） 实验材料实验仪器实验仪器：控温水浴锅、制冰机、电磁灶：控温水浴锅、制冰机、电磁灶、不锈钢锅不锈钢锅 白瓷板白瓷板、试管、滴管、移液管（试管、滴管、移液管（1-2ml）实验试剂实验试剂：蒸馏水蒸馏水、1%淀粉液淀粉液、1%蔗糖、蔗糖、0.1%尿

3、素液尿素液 大豆尿素酶溶液大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2 0.1%NaCl、1M NaOH、0.5M H2SO4、碘液碘液 各种各种pH缓冲液：缓冲液：5.0；6.8；8.0淀粉酶温度pH抑制剂实验步骤1.1.稀释唾液的准备。稀释唾液的准备。2.2.准备好准备好3737水浴、冰水浴及沸水浴，点滴板加碘液水浴、冰水浴及沸水浴，点滴板加碘液 各各1 1滴，备用。滴，备用。3.3.取小试管取小试管4 4支，编号，各加支，编号，各加1%1%淀粉溶液淀粉溶液3030滴，滴，pHpH 6.8 6.8缓冲液缓冲液1010滴。滴。1 1号管作对照，号管作对照，2 2号管放号管放3737

4、水浴水浴, , 3 3号管放冰水浴，号管放冰水浴，4 4号管放沸水浴中，各预温号管放沸水浴中，各预温10min10min。4.4.向向1 1号管加蒸馏水号管加蒸馏水1010滴，向滴，向2 2，3 3和和4 4号管各加稀释唾号管各加稀释唾 液液1010滴，混匀放原水浴中。滴，混匀放原水浴中。5.5min5.5min后由后由2 2号管每隔一定时间（号管每隔一定时间（1min1min或或2min2min），取），取 液液1 1滴于白瓷凹板上做碘反应，观察并记录颜色变滴于白瓷凹板上做碘反应，观察并记录颜色变 化情况，到碘反应接近浅红色时，取出各管，包括化情况，到碘反应接近浅红色时，取出各管，包括 1

5、1号管，分别各取号管，分别各取1 1滴做碘反应，观察对比结果。滴做碘反应，观察对比结果。6.6.把把4 4支试管放入支试管放入3737水浴下，水浴下，510min510min后取出，向各后取出，向各 管内加碘液管内加碘液2 2滴，混匀，观察结果。综合分析所测滴，混匀，观察结果。综合分析所测 三种温度下的酶活性情况，并以三种温度下的酶活性情况，并以1 1号管为对照说明号管为对照说明 冰水浴及沸水浴两温度对酶活性影响的异同。冰水浴及沸水浴两温度对酶活性影响的异同。 试管号试管号 1234第一次碘反应第一次碘反应 第二次碘反应第二次碘反应4.54.5号管加稀释唾液号管加稀释唾液1010滴，放滴，放3

6、737水浴中，记录时间，每水浴中，记录时间，每隔隔1min1min或或2min2min，由第，由第5 5号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液做碘反应，滴溶液做碘反应，待碘反应呈浅红色或橙黄色时，取出试管记录保温时间。待碘反应呈浅红色或橙黄色时，取出试管记录保温时间。5.145.14号试管放入号试管放入3737水浴中，向水浴中，向1 1号管加号管加1010滴蒸馏水。滴蒸馏水。以以1min1min间隔，并记录时间，依次向间隔，并记录时间，依次向2424号试管中加入稀释号试管中加入稀释唾液唾液1010滴，摇匀，按照滴，摇匀，按照5 5号管的保温时间，以号管的保温时间，以1min1min间隔，间隔，依

7、次取出各管，并立即加碘液依次取出各管，并立即加碘液2 2滴，混匀。向滴，混匀。向1 1号管加号管加2 2滴滴碘液。观察各管颜色，判断在同碘液。观察各管颜色，判断在同pHpH条件下淀粉被水解的条件下淀粉被水解的程度，分析程度，分析pHpH对淀粉酶活性的影响，确定其最适对淀粉酶活性的影响，确定其最适pHpH。 时间（时间（min）试管号试管号 12341234试剂（滴）试剂（滴） 管管号号 1234 1 1% %淀粉淀粉30303030pH=6.8pH=6.8缓冲液缓冲液101010100.10.1%Cu%CuSOSO4 4100.10.1%NaCl%NaCl10蒸馏水蒸馏水10 0.10.1% %HgClHgCl2 210稀释唾液的准备稀释唾液的准备取点滴板取点滴板1 1个，向白瓷凹板内各加碘液个，向白瓷凹板内各加碘液1 1滴，准备好滴，准备好3737水浴水浴取小试管取小试管3 3支，如下表加入试剂支，如下表加入试剂5min5min后由后由2 2号试管每隔号试管每隔1min,1min,取液滴取液滴于白瓷凹板上做碘反应，观察记录于白瓷凹板上做碘反应，观察记录颜色变化情况，至反应