PET塑料瓶盖臭氧线灭菌验证报告

1、江门量子高科生物股份有限公司臭氧灭菌线灭菌一生糖瓶盖验证文件-生产三课2011年1月臭氧灭菌线灭菌一生糖瓶盖验证文件口其他口公用系统日设备口清洁口工艺口制水系统口成本验证小组：组长：彭辉跃（生产部）签名/日期:组员：谢景强（工程部）签名/日期:李业宏（生产部）签名/日期:郑海源（质保部）签名/日期:莫建文（质保部）签名/日期:杨竞辉（质保部）签名/日期:签名/日期:冯坚良（质量管理委员会）签名/日期:报告：杨竞辉部门：质保部日期：2011-01-201 .验证背景第4页2 .验证目的第4页3 .验证范围第4页4 .验证地点第4页5 .验证对象第5页6 .验证设备第5页7 .验证试验所评估的指标

2、第5页8 .验证试验的阶段分布第5页9 .验证方法第6页10 .验证周期第13页11 .验证结果汇总第13页12 .验证结论第13页13 .验证报告第13页14 .验证证书第14页一、验证背景臭氧灭菌线在2010年11月底，购自广州市科帮洁净工程技术有限公司，它是根据用户实际要求特殊制作的消毒传送设备。具采用内置臭氧发生器，在相对隔离的传送带隧道内进行消毒的形式，对放置在输送带上的瓶盖进行有效的消与。利用FFU高效过滤单元传送带隧道内的空气不断循环，并通过中、高效过滤器对空气进行过滤，使隧道内空气达到10万级标准，有效保证了瓶盖不受粒子的污染。内置一台20g/h的内置式臭氧发生器，两台500C

3、MH可调风量FFU。顶部装置一台排风机造成负压，使臭氧不致外排。瓶盖灭菌线用于生产三课一生糖瓶盖灭菌用，在投产前，需要对消毒效果进行验证。设备技术参数：名称数量规格备注输送带1条8000X80000.3M/MIN臭氧发生单元6个每个40W内置臭氧发生器2个60WF口80W新增火菌UV灯6根每根40WFFU2个每个135W排风机1个0.27W、验证目的验证臭氧灭菌线的灭菌效果三、验证范围生产三课臭氧灭菌线四、验证地点生产三课瓶暂存间内五、验证对象一生糖瓶盖（含外盖和内塞）六、验证设备仪器名称型号规格用途臭氧气体检测报警仪CPR-B60100PpM测试灭菌箱内臭氧浓度秒表液晶显示测试物体进出火菌箱

4、内所需的时间七、验证试验所评估的指标1000cfu/cm2以内的细菌到10cfu/cm2的灭菌率为95%以上八、验证试验的阶段分布作曲线图。阶段起止日期验证项目验证内容/方法12010-12-12输送带的速度输送带的速度22010-12-12火菌箱内臭氧浓度用臭氧报警仪32010-12-12对臭氧灭菌线进行灭菌验证取干净空盖进行菌液涂抹，其中一半进行杀菌验证，另外一半作阳性对照。42010-12-15观察并记录验证结果计算灭菌单，确定启效性。52011-01-02输送带的速度输送带的速度62011-01-02火菌箱内臭氧浓度火菌箱内臭氧浓度72011-01-02对包材UV受氧杀菌线进行试提速杀

5、菌验证取干净空盖进行菌液涂抹，其中三分之二进行杀菌验证，另外三分之一作阳性对照。82011-01-5观察并记录验证结果计算灭菌单，确定启效性。92011-01-5对来料空盖的微生物含菌量进行收集数据检测连续3批来料空盖的微生物含菌量，收集数据，制九、验证过程1 .瓶盖臭氧线安装完毕，经过安装确认、运行确认。2 .初次臭氧线测试2.1 .初次臭氧灭菌线输送速度的测试：2.1.1. 在入一生糖瓶盖灭菌箱前并靠近输送线的箱壁上相聚0.2米处分别用标签贴2个记号；置一小物体于第一个记号对应的输送线上，启动一生糖瓶盖臭氧灭菌输送带，记录该小物体由第一个记号到达第二个记号的时间。记录见表格1初次检验输送线

6、速度一览表。表格1初次臭氧灭菌线输送速度一览表厅P变频器读数运行开始时间运行结束时间标准运行时间Hz时-分时-分minmin129.314时20分14时51分3031229.314时20分14时51分3031结论合格检测人：时间：复核人：时间：2.2 初次臭氧浓度测试2.2.1. 启动PPU排风机及臭氧发生器后，才查记录变频器的参数为29.3HZ,启动臭氧气体检测仪，分别放在灭菌箱的起点后约200MMR灭菌箱末端约200MM处，放置5min后检查其臭氧读数；启动PPU排风机、臭氧发生器及紫外灯（UV后，检查记录变频器的参数为29.3HZ,启动臭氧气体检测仪，分别放在灭菌箱的起点后约200MMR

7、灭菌箱末端约200MM放置5min后检查其臭氧读数。结果见表格2初次检测臭氧浓度一览表。表格2初次检测臭氧浓度一览表位置前端后端2.3.阳性菌灭菌验证:状态没开UV开UV没开UV开UV标准臭氧浓度（PPM2.52.52.52.5>15结论不合格检测人：时间：复核人：时间：在12月12日，上午8:30至12:00,化验室制备不同浓度的混合细菌液（即分别用接种环将金黄色葡萄球菌株和大肠杆菌株各接一环至10ml已灭菌的生理盐水中，充分摇匀，并将菌种打散制成一个均匀菌液。随后将两种菌液各吸0.5ml注入9ml已灭菌的生理盐水中，制成10-1浓度的混合稀释液，依次类推，制成10-1、10-2、10

8、-33个不同稀释倍数的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的混合稀释液）。用已灭菌的移液管分别吸取0.02ml的3个不同浓度的混合稀释液置于内塞内壁（每个稀释度取2个盖子），随后用预先润湿菌液的棉杆在空盖的内壁均匀涂抹。每个浓度的混合细菌液涂抹2个空盖，1个作阳性试验，1个作阴性试验。并放于实验室内的生物安全柜内晾干。2.3.1. 取涂抹有不同浓度菌液的空盖各1个不经UV灭菌，用作阳性试验对照；取涂抹有不同浓度菌液的空盖各1个于灭菌线上。运行参数如表格3灭菌验证运行参数。表格3灭菌验证运行参数变频器枷率放入时间出来时间火菌时1用29.3Hz16时15分16时46分31min操作人：时间：复合人：时间：2.

9、3.3.灭菌后，把全部的空盖放入干净的取样袋内，马上送化验室进行菌数检测。2.3.4. 阳性菌处理后，在恒温箱内36c培养48h,微生物检测结果见表格10微生物检测结果。表格4微生物检测结果金黄葡锢球菌+大肠杆菌灭菌前（盖口随机朝上或朝下）火菌后（盖口随机朝上或朝下）菌液浓度稀释倍数'10110210310110210310-1X多不可计多不可计19500多不可计多不可计1630010-2X3660048000备注：表中国“一”的地方表小无2.3.5. 计算杀菌率2.3.5.1. 结果分析：根据验证方案中不同稀释梯度的菌液所测的微检结果，选取最具代表性的数据进行计算处理。依表格4中数据

10、显示最具代表性的稀释梯度为10-1和10-2。2.3.5.2. 结果计算计算公式：灭菌前菌落数一灭菌后菌落数灭菌率=X100%灭菌前菌落数计算式及计算结果如表格5瓶盖灭菌数据分析表格5瓶盖灭菌数据分析表放置状态菌液浓度计算式标准实际火菌率瓶盖口随机朝上或是朝下10-1X(多/、可计)X101/2-(0+0)X101/2X100%(多/、可计)X101/2>95%100.00%10-2X(36+48)X101/2-(0+0)X101/2>95%100.00%(36+48)X101/2X100%结论合格计算人：时间：复核人：时间：3 .在2010年12月质保部检查3批瓶盖的微生物指标，

11、检验报告单编号及检验结果如表格6瓶盖来料的微生物测试一览表。检测方法：将10ml已灭菌的0.85%£理盐水加入到无菌小烧杯内，取无菌棉签浸润生理盐水后擦拭涂菌面后置于生理盐水中清洗，整个擦拭、清洗重复4次随后充分振荡均匀清洗过棉签的生理盐水，并取1ml做微生物检验。表格6瓶盖来料的微生物测试一览表至蛊批号来料批号供应商报告单编号微检结果（cfu/瓶）1#2#3#平均10121110-12-27穗联包装有限公司B1012043000010121210-12-29穗联包装有限公司B1012048000010121410-12-31东莞利族商贸有限公司B10120560000结论来料瓶盖的

12、微生物指标均合格，建议进入阳性菌灭菌测试。检测人：时间：复核人：时间：4 .根据检测结果，供应商决定增加2台内置式臭氧发生器，分别为60WF口80W它们和机内原有的6个Q臭氧单元统一开关控制，再重新测试。2010年12月20日厂家增加了2台臭氧机，2011年1月2日，再次对瓶盖臭氧线进行灭菌测试。4.1. 一生糖瓶盖臭氧灭菌线输送速度测试。4.1.1. 在14时30分，启动PPU排风机、检查记录变频器的参数，把计时器放在输送带灭菌箱的起点处，启动输送带，灭菌箱的长度为5.8米，然后让输送带送它到灭菌箱的终点，检查所用时间是否标准时间30分钟以上。结果见表格7输送带测试一览表表格7输送带测试一览

13、表变频器读数运行开始时问运行结束时间标准运行时间Hz时-分时-分minmin29.314时45分15时16分3031结论合格检测人：时间：复核人：时间：4.2. 一生糖瓶盖灭菌线臭氧浓度的测试。4.2.1. 在15时55分，启动臭氧发生器、紫外灯开关后，启动臭氧气体检测仪，分别放在灭菌箱的前端后约200MM末端前约200MMt,检查其臭氧读数，标准为不低于15PPIM结果见表格8臭氧浓度测试结果。表格8臭氧浓度测试结果位置前端后端臭氧浓度PPM3.43.74.34.2标准PPM>15结论不合格应厂家要求，先进入下一阶段，阳性菌灭菌效果验证。检测人：时间：复核人：时间：4.3.阳性菌灭菌验

14、证4.3.1. 在1月2日，上午8:30至12:00,化验室制备不同浓度的混合细菌液（即分别用接种环将金黄色葡萄球菌株和大肠杆菌株各接一环至10ml已灭菌的生理盐水中，充分摇匀，并将菌种打散制成一个均匀菌液。随后将两种菌液各吸0.5ml注入9ml已灭菌的生理盐水中，制成10-1浓度的混合稀释液，依次类推，制成10-1、10-2、10-33个不同稀释倍数的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的混合稀释液）。用已灭菌的移液管分别吸取0.02ml的3个不同浓度的混合稀释液置于内塞内壁（每个稀释度取3个盖子），随后用预先润湿菌液的棉杆在空盖的内壁均匀涂抹。每个浓度的混合细菌液涂抹3个空盖，1个作阳性试验，2个作阴

15、性试验。并放于实验室内的生物安全柜内晾干。4.3.2. 取涂抹有不同浓度菌液的空盖各1个（共3个）不经UV灭菌，用作阳性试验对照；取涂抹有不同浓度菌液的空盖共3个于灭菌输送线上盖口朝上放置，取涂抹有不同浓度菌液的空盖共3个于灭菌输送线上盖口朝下放置，随后一并进行灭菌验证。运行参数如表格9灭菌验证运行参数。表格9灭菌验证运行参数变频器频率放入时间出来时间灭菌时间灭菌方式29.3Hz16时09分16时40分31min瓶蛊口向上瓶蛊口向卜操作人：时间：复核人：时间：4.3.3. 灭菌后，把经灭菌和未经灭菌的空盖放入干净的取样袋内，马上送化验室进行菌数检测。4.3.4. 阳性菌处理后，在恒温箱内36c

16、培养48h,微生物检测结果见表格10微生物检测结果。表格10微生物检测结果金黄葡锢球菌+大肠杆菌（cfu/个盖）火菌前瓶蛊口1可上火菌后瓶蛊口向卜火菌后释倍数菌液浓小、10110210310410510110210310110210310-1X-3204761100-10-2886321000-10010-2X1691520-00-00171710-00-00操作人：时间:复核人：时间:备注：表中国"一”的地方表小无。4.3.5. 计算杀菌率4.3.5.1, 结果分析：根据验证方案中不同稀释梯度的菌液所测的微检结果，选取最具代表性的数据进行计算处理。依表格9中数据显示最具代表性的稀释

17、梯度为10-1和10-2。4.3.5.2, 结果计算计算公式：灭菌前菌落数一灭菌后菌落数灭菌率=X100%灭菌前菌落数计算式及计算结果如表格11瓶盖灭菌数据分析表格11瓶盖灭菌数据分析表放置状态菌液浓度计算式标准实际灭菌率瓶盖口向上10-1X(47+63)X103/2-(1+0)X101/2X100%3(47+63)X10/2>95%99.99%10-2X32(47+63)X10/2-(0+0)X10/2>95%100.00%(47+63)X103/2X100%瓶盖口向下10-1X31(47+63)X10/2-(1+10)X10/2vdnnoz.>95%99.00%3(47+

18、63)X10/210-2X(47+63)X103/2-(0+0)X102/2>95%100.00%(47+63)X103/2入100%结论合格计算人：时间：复核人：时间：一生糖瓶盖臭氧灭菌线消毒效果验证报告2011年1月25日，验证小组根据已批准的一生糖瓶盖臭氧灭菌线消毒效果验证方案，对一生糖瓶盖臭氧灭菌线进行消毒效果验证工作，现将验证工作报告如下：1 .验证方案说明1.1. 验证方案在实施过程中未做修改。1.2. 验证方案各项性能指标在验证过程中未做变动，误差在允许范围内，记录完全属实。2 .验证结果2.1. 一生糖瓶盖臭氧灭菌线消毒验证的资料和文件符合GMP的管理要求。2.2. 一生糖瓶盖经臭氧灭菌线消毒后符合生产工艺和GMP要求。2.3. 验证方法本身有缺陷，验证所用包材量无法等同于实际生产条件下的包材量。2.4. 规定时间内灭菌箱内臭氧浓度没有达到规范要求。3 .建议3.1. 经验证，一生糖瓶盖臭氧消毒线是可行的。3.2. 该消毒验证周期为1年