初级检验技师临床免疫学和免疫检验(讲义)第二十三章超敏反应性疾病及其免疫检测

1、第二十三章 超敏反应性疾病及其免疫检测超敏反应，又称为变态反应，是指机体对某些抗原初次应答致敏后，再次接触相同抗原 刺激时，所出现的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的异常免疫应答。引起超敏反应的抗原物质称为 变应原，它可以是 完全抗原，如异种动物血清、微生物、寄生虫及其代 谢产物；也可以是 半抗原，如青霉素等药物及多糖类物质。此外，其自身组织抗原 也可以成为变应原。根据超敏反应发生的速度、机制等，将其分为四型：I型超敏反应，即速发型超敏反应；n型超敏反应，即细胞毒型或细胞溶解型超敏反应；川型超敏反应，即免疫复合物型或血管炎型超敏反应；w型超敏反应，即迟发型超敏反应。第节I型超敏反应I型超敏

2、反应主要由特异性igE抗体介导产生，其发生速度最快，常在第二次接触相同抗原后数分钟内即出现临床反应，其反应可发生于局部，亦可发生于全身，故又称速发型超敏反应，习惯上又称过敏反 应。其主要特征有：超敏 反应发生快，消退快；常引起 生理功能紊乱，较少发生严重的组织细胞损伤；由特异性IgE型抗体介导，无补体参与 ；具有明显的个体差异和遗传背景。对相应抗原易产生IgE型抗体的患者称为特应性个体或过敏体质个体。一、I型超敏反应发生机制（一）参与I型超敏反应的主要成分1. 变应原 某些药物或化学物质，如青霉素、磺胺等。多为半抗原，进入机体后与某种蛋白结合而成 为变应原。吸入性变应原，如花粉颗粒、尘螨排泄物

3、、真菌丝及孢子等。食物变应原，如奶、蛋、鱼 虾等。某些酶类，如尘螨中的半胱氨酸蛋白；细菌酶类物质如枯草菌溶素可引起支气管哮喘。2. 抗体IgE型抗体称为变应素。在 5类免疫球蛋白中，IgE是血清中含量最低，半衰期最短，分解率最高，对热最不稳定的lg。而在I型超敏反应患者体内即特应性个体，IgE含量显著增高。IgE主要由鼻咽、扁桃体、气管和胃肠道黏膜下固有层淋巴组织中的 B细胞产生。IgE为亲细胞抗体，它可通过其Fc段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面相应IgE Fc受体结合。IgE的产生依赖于Th2细胞活化后分泌的IL-4。Th1细胞分泌的IFN- 丫可抑制Th2细胞分泌IL-4。3. 细胞 参与I

4、型超敏反应的有 肥大细胞和嗜碱性粒细胞 及嗜酸性粒细胞。（二）I型超敏反应发生过程1. 致敏阶段 变应原首次进入，诱导IgE抗体产生，与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合。通常致敏状态可持续数月甚至更长。结合有IgE胞称为致敏靶细胞。2. 激发阶段 再次接触相同变应原时，变应原与致敏靶细胞膜表面的IgE抗体结合，发生FC& RI交联，使细胞内各种酶活化，钙离子内流，导致细胞脱颗粒，释放生物活性介质。3. 效应阶段此阶段是释放的生物活性介质作用于效应组织和器官，引起局部或全身过敏反应。根据效应发生的快慢和持续时间的长短，可分为：早期相（速发相）反应通常在接触相同变应原后 数秒或数分钟内发生，可持

5、续数小时。该种反应主要 由组胺、前列腺素等引起。晚期相（迟发相）反应主要发生在变应原刺激后 612小时，可持续数天或更 长时间。二、常见I型超敏反应性疾病（一）全身超敏反应1. 药物过敏性休克以青霉素引发的过敏性休克最为常见。2. 血清过敏性休克 临床应用动物免疫血清如破伤风抗毒素、白喉抗毒素等进行治疗或紧急预防时，有 些患者可因曾经注射过同种动物的血清制剂而发生过敏性休克，重者可在短时间内死亡。（二）局部性超敏反应1. 呼吸道过敏反应：主要表现为过敏性鼻炎和过敏性哮喘 。2. 消化道过敏反应：有些人进食鱼、虾、蟹、蛋、牛奶等食物或服用某些药物后，可发生过敏性胃肠 炎，主要表现为恶心、呕吐、腹

6、痛和腹泻等症状，严重者也可发生过敏性休克。3. 皮肤过敏反应：可由药物、食物、油漆、肠道寄生虫或冷热刺激等引起。主要表现为皮肤荨麻疹、湿疹和血管神经性水肿等。病变以皮疹为主，特点是剧烈瘙痒。三、I型超敏反应免疫学检测（一）皮肤试验1. 原理当变应原进入致敏者皮肤，与吸附在肥大细胞和（或）嗜碱性粒细胞上的igE结合，导致肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒， 释放生物活性介质。 在2030分钟内局部皮肤出现红晕、 红斑、风团及瘙痒， 数小时后消失。若出现此现象者判断为皮试阳性，即对该变应原过敏。2. 皮内试验方法（1） 1型超敏反应皮内试验：皮肤消毒后，于前臂内侧将变应原提取液（0.010.02ml ）

7、注入皮内。形成约23mm的皮丘。如同时作数种变应原皮试时，两种皮试变应原的间距应为2.55.0cm （高度可疑敏感的变应原应选择 5cm），并于注射后1525分钟观察结果。1型超敏反应 皮内试验的阳性结果以风团为 主。阳性对照液常用 盐酸组胺，阴性对照液一般用变应原的稀释保存液或生理盐水。试验中一般采用左右两臂一侧作对照，另一侧做试验。假阳性的常见原因：变应原稀释液偏酸或偏碱；患者有皮肤划痕症；抗原不纯或被污染；抗 原量注射过多。假阴性的常见原因：变应原抗原性丧失或浓度过低；患者皮肤反应较低；受试者正使用抗组胺 类药或激素类药；注射部位过深或注射量太少。（2）挑刺试验：也称点刺试验。将抗原和对

8、照液滴于受试者前臂内侧皮肤上，然后在该处用针尖透过抗原液滴，与皮肤呈 45°进针点刺，以不出血为度，1分钟后拭去抗原液，15分钟后观察结果。挑刺试验较皮内试验安全，假阳性较少，但敏感性较皮内试验低。I型超敏反应挑刺试验的阳性结果以红晕为主。3. 临床意义（1） 寻找变应原：避免接触变应原是防治超敏反应的重要手段。通过皮肤试验检测出引起超敏反应的 变应原，为患者防止该病再次发生提供预防依据。（2） 预防药物或疫苗过敏：某些药物如青霉素、链霉素、普鲁卡因等易引起变态反应。注射异种抗血清（如破伤风抗血清和狂犬病抗血清）者应在使用前作过敏试验。（二）血清总IgE检测1. 测定方法（1） 化学

9、发光免疫测定法：用化学发光物质标记抗 IgE，与血清中IgE反应后，通过化学发光分析， 计算出血清中IgE含量。此法敏感性高、特异性强、稳定性好，测定自动化、检测时间短，临床多采用此 法。（2）双抗体夹心ELISA：方便、实用，敏感性和特异性均较好，不需要特殊仪器，临床上较为常用。临床意义：血清总IgE含量受多种因素的影响，如年龄、种族、地域、环境、遗传及检测方法等。因 此在分析血清IgE结果时须参考当地人群IgE水平。IgE升高常见于过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特发性皮炎、湿疹、药物性间质性肺炎、支气管肺曲霉病、寄生虫感染、急慢性肝炎和IgE型多发性骨髓瘤等。（三）特异性IgE检测1. 测定方法

10、特异性IgE是指能与某种过敏原特异结合的IgE。检测时是用纯化的特异变应原 替代抗IgE进行检测。常用的方法是放射免疫技术和免疫印迹测定法。2临床意义特异性IgE的增高对I型超敏反应疾病的诊断有重要价值。免疫印迹测定法有无污染、无需特殊设备、操作简单、能一次性确定多种变应原等优点，目前在国内 已广泛应用。第二节n型超敏反应n型超敏反应又称细胞毒型或细胞溶解型超敏反应，它是由靶细胞表面的抗原与相应IgG或IgM类抗体结合后，在补体、巨噬细胞和 NK细胞参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。一、n型超敏反应发生机制（一）靶细胞及其表面抗原正常组织细胞、改变的自身组织细胞和被抗原或

11、抗原表位结合修饰的自身组织细胞，均可成为n型超 敏反应中被攻击杀伤的靶细胞。根据靶细胞的种类和靶抗原的来源，可以将靶细胞表面的抗原分为4类：1. 同种异型抗原 如ABO血型抗原、Rh抗原、HLA抗原、血小板抗原等。2. 共同抗原 如链球菌胞壁多糖抗原与心脏瓣膜、关节组织之间的共同抗原。3. 变性自身抗原 感染和理化因素作用（如辐射、热化学制剂等），导致自身细胞或组织抗原物质的变 性。4. 外来抗原 如某些化学制剂作为半抗原进入机体后，与细胞或蛋白质结合成为完全抗原，刺激机体产 生特异性抗体。（二）抗体 参与n型超敏反应的抗体主要是IgG和IgM，少数为IgA。（三）发生过程 抗体与靶细胞膜上的

12、相应抗原结合后，可通过以下途径杀伤靶细胞或导致靶细胞功能 紊乱。1. 补体介导的细胞溶解抗体2. 巨噬细胞的吞噬作用3. ADCC作用4. 刺激或抑制靶细胞二、常见n型超敏反应性疾病1. 输血反应多发生于ABO血型不合的输血。2. 新生儿溶血症 如母亲为Rh阴性血型，胎儿为 Rh阳性血型，再次妊娠时，胎儿又为Rh阳性。初次分娩后，72小时内给母体注射 Rh抗体，能及时清除进入母体内的Rh阳性红细胞，可有效预防再次妊娠时发生新生儿溶血症。3. 自身免疫性溶血性贫血 某些病毒如流感病毒、EB病毒感染或长期服用某些药物如甲基多巴后，能使红细胞膜表面抗原发生改变，刺激机体产生红细胞自身抗体。引起自身免

13、疫性溶血性贫血。4. 药物过敏性血细胞减少症青霉素、磺胺、安替比林、奎尼丁和非那西丁等药物抗原表位能与血细胞膜蛋白或血浆蛋白结合获得免疫原性，从而刺激机体产生抗药物抗原表位特异性的抗体。这种抗体与结合有药物的红细胞、粒细胞或血小板作用，或与药物结合，形成抗原-抗体复合物后，再与具有 Fc受体的血细胞结合，可引起药物性溶血性贫血、粒细胞减少症和血小板减少性紫癜等。5. 肺出血肾炎综合征 是由自身抗体（抗W型胶原抗体）引起的以肺出血和肾小球肾炎为特征的疾病。自身抗体与肺泡和肾小球毛细血管基底膜中W型胶原结合，激活补体或通过调理作用，导致肺出血和肾炎。6. 甲状腺功能亢进 又称为Graves病，患者

14、体内可产生抗甲状腺上皮细胞表面甲状腺刺激素（ TSH受 体的自身抗体。该种抗体与甲状腺细胞表面TSH受体结合，可刺激甲状腺细胞合成分泌甲状腺素，引起甲状腺功能亢进，而不使甲状腺细胞破坏。多数人认为它是n型超敏反应的一种特殊表现形式。三、n型超敏反应免疫学检测（一）抗血细胞抗体的检测抗血细胞抗体大多属于不完全抗体，这种抗体与相应抗原结合后不出现凝集现象。1. Rh抗体的检测Rh抗体检测方法常有盐水凝集法、酶介质法等。2. 抗球蛋白检测（1）直接Coombs试验：即可直接检测红细胞表面有无不完全抗体的试验。该试验是检测致敏红细胞 的一种方法。用于检测红细胞是否已被不完全抗体致敏，如新生儿溶血症、溶

15、血性输血反应、自身免疫性溶血性贫 血等。（2）间接Coombs试验：即用已知的不完全抗体检测受检红细胞上相应的抗原，或用已知抗原的红细 胞检测受检血清中相应的不完全抗体。该试验主要用于检测血清中的不完全抗体，如输血、血制品、器官移植、妊娠所致免疫性血型抗体及自身免疫性血型抗体，也用于交叉配血。（二）临床意义在贫血患者 ABC血型一致的输血中，如 Rh抗体阳性，应输 ABC血型一致的Rh阴性血。母亲为Rh阴性血型，分娩了 Rh阳性的胎儿。一般妊娠16周应作首次Rh抗体检测，结果为阴性，以 后每68周再测定。结果为阳性，则第20周重复检测，以后每隔 24周复查1次，直至分娩。Rh抗体效价1: 16

16、或1 : 32时，胎儿很可能发生水肿。再次妊娠时应对孕妇Rh抗体进行监测，Rh抗体超过1： 64即应采取措施，如孕妇血浆交换术等。伴有溶血性贫血的患者，Coombs试验检测为阳性，说明体内产生有抗红细胞抗体，可帮助自身免疫性溶血性贫血的诊断。第三节 川型超敏反应川型超敏反应是指由可溶性免疫复合物沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜，通过激活补体，并在 血小板、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞等的参与下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为主要 特征的炎症反应和组织损伤。一、川型超敏反应发生机制（一）中等大小可溶性免疫复合物的形成血液循环中的可溶性抗原与相应的IgG或IgM类抗体结合，形成可溶性免

17、疫复合物。而可溶性免疫复合物大小的形成，主要受其可溶性抗原和抗体的性质以及抗原和抗体结合比例影响。正常状态下，免疫复合物的形成有利于机体通过单核-吞噬细胞的吞噬将抗原性异物清除。但在某些情况下，可溶性免疫复合物也可引起疾病。通常大分子可溶性免疫复合物易被单核-巨噬细胞吞噬清除；小分子可溶性免疫复合物容易透过肾小球滤膜随尿排出体外；其中中等大小的可溶性免疫复合 物可沉积于毛细血管基底膜，引起川型超敏反应。（二）中等大小可溶性免疫复合物的沉积与下列因素有关：1. 局部解剖学与血流动力学因素2. 血管活性胺类物质作用（三）免疫复合物沉积引起的组织损伤1. 补体的作用C3a和C5a与肥大细胞或嗜碱性粒

18、细胞上的受体结合，使其释放组胺等炎性介质，导致局部毛细血管通透性增加、渗出增多，出现水肿。C3a和C5a是中性粒细胞趋化因子，可吸引中性粒细胞聚集于免疫复合物沉积部位，引起组织损伤。2. 中性粒细胞的作用聚集的中性粒细胞在吞噬免疫复合物的同时，还释放蛋白水解酶、胶原酶、弹性纤维酶和碱性蛋白酶等，使血管基底膜及周围组织发生损伤。3. 血小板的作用 免疫复合物和 Cab可使血小板活化，释放血管活性胺类物质，引起血管扩张、通透性 增加导致水肿；也可以使血小板聚集、激活凝血机制，形成微血栓，引起局部组织缺血、出血及坏死。二、常见川型超敏反应性疾病（一）局部免疫复合物病1. Arthus反应 是一种实验

19、性局部川型超敏反应。2. 类Arthus反应 糖尿病患者局部反复注射胰岛素后可刺激机体产生相应 IgG类抗体，若此时再次注射胰岛素，即可在注射局部出现红肿、出血和坏死等反应。多次注射狂犬病疫苗或使用抗毒素（马血清）也可出现类Arthur反应。（二）全身免疫复合物病1. 血清病 通常是在初次大量注射异种动物抗毒素（免疫血清）后12周发生，其主要临床症状是发热、皮疹、淋巴结肿大、关节肿痛和一过性蛋白尿等。这是由于患者体内产生的抗毒素抗体和体内抗毒素 结合形成可溶性免疫复合物所致。2. 链球菌感染后肾小球肾炎一般多发生于 A族溶血性链球菌感染后 23周内，体内产生抗链球菌抗体，该抗体与链球菌可溶性抗

20、原结合形成循环免疫复合物，沉积在肾小球基底膜上，引起免疫复合物肾炎。其他微生物如葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型肝炎病毒、疟原虫等感染也可引起类似的肾小球肾炎。3. 类风湿关节炎 某些病因使体内IgG分子发生变性，从而刺激机体产生 抗IgG的自身抗体（IgM为主）， 临床上称为类风湿因子（RF）。自身变性IgG与类风湿因子结合形成免疫复合物，沉积于关节滑膜，引起类风湿关节炎。4. 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮是由于体内持续出现DNA抗DNA复合物，沉积于肾小球、关节或其他部位血管基底膜，引起肾小球肾炎、关节炎等多脏器损害。三、川型超敏反应免疫学检测川型超敏反应的发生主要是中等大小可溶性免疫复合物沉积

21、于局部或全身多处毛细血管基底膜，激活 补体，引起的炎症反应和组织损伤。免疫复合物的检测，对诊断疾病、观察疗效、判断预后有重要意义。（一）免疫复合物的检测 检测组织中固定的IC常用免疫组织化学技术。循环IC的检测方法临床上多采用抗原非特异性方法。（二）抗原非特异性循环免疫复合物的检测物理法、补体法、抗球蛋白法和细胞法。（三）临床意义 检测免疫复合物虽不是疾病诊断的主要指标，但在发病机制研究、了解病情进展、判 断治疗效果等方面能提供有意义的帮助。第四节 W型超敏反应W型超敏反应又称迟发型超敏反应（DTH，是效应T细胞与特异性抗原结合后，引起的以单个核细胞浸润和组织损伤为主要特征的炎症反应。其特点是

22、：炎症反应发生较慢，通常在接触相同抗原后2472小资料收集于网络，如有侵权请联系网站删除时出现炎症反应，炎症消失也慢；此型超敏反应与抗体和补体无关；而与效应T细胞和炎症细胞因子参与致病有关。一、W型超敏反应发生机制参与W型超敏反应的效应 T细胞主要有 CD4Th1 （Tdth）细胞和CD8Tc （CTL）细胞。"型超敏反应的发 生机制与细胞免疫反应基本一致。（一）抗原与效应细胞引起"型超敏反应的抗原主要有胞内寄生菌、病毒、寄生虫和化学物质等。这些抗原物质经抗原提呈细胞（APC摄取、加工处理成抗原肽 -MHC分子复合物的形式表达于 APC表面，使T细胞活化分化。效应性T细胞主

23、要为CD4Th1细胞和CD8Tc细胞。（二）T细胞介导炎症反应和组织损伤1. CD4+Th1细胞介导的炎症反应和组织损伤通过释放IFN- 丫、TNF淋巴毒素（LT）、IL-3、GM-CSF单核细胞趋化蛋白-1 （ MCP-1等细胞因子发挥作用。2. CD8+Tc细胞介导的细胞毒作用效应CD8Tc细胞与特异性抗原结合，释放穿孔素和颗粒酶等介质，使靶细胞溶解死亡或凋亡；也可活化后表达FasL，与靶细胞表面表达的 Fas结合，诱导靶细胞发生凋亡。二、常见W型超敏反应性疾病（一）感染性迟发型超敏反应多发生于胞内寄生病原体感染，如结核分枝杆菌、病毒、原虫等。当胞内感染有结核分枝杆菌时，巨 噬细胞在CD9

24、Th1细胞释放的细胞因子IFN- y作用下被活化，可将结核分枝杆菌杀死。如果结核分枝杆菌 抵抗活化巨噬细胞的杀伤效应，则可发展为慢性炎症，形成肉芽肿。肉芽肿中心是由巨噬细胞融合而成， 在缺氧和巨噬细胞的细胞毒作用下，可形成干酪样坏死。结核菌素试验是典型的传染性迟发型超敏反应的 局部表现。（二）接触性皮炎通常是由于接触小分子半抗原物质，如油漆、染料、农药、化妆品和某些药物如磺胺和青霉素等引起。 这些小分子半抗原与体内蛋白质结合成完全抗原，使T细胞致敏。当机体再次接触相同抗原，皮损表现为局部皮肤出现红肿、皮疹、水疱，严重者可出现剥脱性皮炎。（三）移植排斥反应在同种异体间的移植排斥反应中，受者的免疫

25、系统首先被供者的组织抗原（ HLA致敏，受者体内的致敏T细胞识别移植器官上的异体抗原，导致淋巴细胞和单核细胞局部浸润等炎症反应，形成移植排斥反应， 可造成移植器官的坏死。三、"型超敏反应免疫学检测（一）W型超敏反应皮肤试验原理W型超敏反应皮肤试验是用皮内注射、皮肤斑贴等方法使变应原进入已致敏机体，体内致敏的 T细胞再次接触到变应原后，释放多种细胞因子，造成局部以单核细胞和淋巴 细胞浸润为主的炎症反应。2448小时后局部出现红肿、硬结、水疱等现象，以此来判断变应原是否引起机体W型超敏反应或机体的细胞免疫功能状态。（二）方法1. 结核菌素皮试 抗原用旧结核菌素（0T或结核分枝杆菌的纯蛋白

26、衍生物（ PPD，于前臂内侧皮内注射，4872小时后观察结果。W型超敏反应皮内试验的阳性结果以红肿和硬结为主。2. 斑贴试验 寻找接触性皮炎的变应原。纱布浸蘸变应原溶液，贴敷于前臂内侧或背部正常皮肤上，待2472小时观察结果。 阳性结果以红肿和水疱为主。（三）临床意义1. 寻找变应原 避免接触变应原是防治超敏反应的重要手段。斑贴试验主要用于寻找接触性皮炎的变应 原。2. 结核菌素皮试目的了解机体是否对结核分枝杆菌有免疫力及接种卡介苗后的免疫效果观察。人群 中大约96%勺人均感染过结核分枝杆菌，细胞免疫正常者，皮试结果应为阳性。排除结核菌感染。如细胞 免疫正常，皮试结果阴性，可排除结核菌感染。但值得注意的是，在患者极度衰竭时，即使感染了结核菌， 仍可反应为阴性。了解机体细