实验二 经口急性毒性试验

1、精选文档毒理学实验二 经口急性毒性试验1、 实验目的1、 掌握实验动物分组方法2、 测定LD50的试验设计原则3、 小鼠的经口灌胃技术二、试剂和材料1、实验动物：（1）动物品种：健康成年ICR小鼠，体重18g22g（2）样品来源：首都医科大学实验动物部2、 器材：注射器（1ml）、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂：敌敌畏（1400mg/ml）、苦味酸染液（标记用）。3、 实验内容1、 健康实验动物的选择和性别鉴定 选择健康的雄性小鼠（健康标准：毛顺、毛顺、无分泌物、反应敏锐。动物出现圆圈动作可能为中耳炎，废弃。） 肛门与生殖孔距离：大者为雄性，小者为雌性2、 实验动

2、物称重、编号和随机分组 选择体重在18-22 g的小鼠，采用随机分组的方法（动物按体重分为几个体重段，再从每个体重段分出各组动物），每组10只小鼠，用黄色的苦味酸饱和液标号19,10号小鼠不标记。3、 受试化学物溶液的配制（1）确定灌胃量：0.1ml/10g （2）确定最高给药量，计算溶液浓度，估计给药总体积（3）药品称量及稀释4、 小鼠灌胃技术 左手固定，右手持灌胃器，插入动物口腔，沿咽后壁徐徐插入食道，深度为口腔至剑突的距离。5、 毒性体征的观察和LD50计算（1）毒性体征的观察： 染毒后注意观察小鼠中毒的发生、发展过程及死亡数和死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间，记录死亡情况及时间，

3、观察期为30 min（2） LD50的计算： a、实验各组剂量的确定：设5组，每组雌雄动物各10只。 剂量组距 d 为： d为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用lgLD0依次加d，取反对数，即可得出各组剂量。b、LD50的计算（见附件）：C、求半数致死量的95%可信区间4、 实验过程1、人员分工：本次实习同学分两个大组(A组和B组)，分别在不同实验室。每大组分5个小组，分别处理雌雄动物，每小组10只动物。 集体活动：1、 2、 3、 4、5 组各1人，进行受试物配制。 各小组活动： 每小组1人（共4人），进行动物标记。（1-10号） 每小组1人（共4人），进行体重记录。（1-10号） 每小组1人

4、（共4人），进行灌胃。（1-10号） 每小组1人（共4人），根据体重吸取受试物（0.1ml/10g）5、 剂量设计及受试物配制表见附件六、实验结果1、急性经口毒性试验原始记录（见附件）2 、LD50计算表（见附件）3、 结果计算（按照ppt中所给的剂量设计及受试物配制表计算） =(lg500-lg100)÷4=（0.6990-2）÷4=0.1747=0.1747× =0.0316=2.1747-1/2×（0+0.35）+（0.35+0.2）+（0.2+0.65）+（0.65+1） =1.8777即：65.433587.0162mg/Kg7、 实验结论与分析1、 毒性物质敌敌畏为中等毒性，体重在1822g之间的雄性健康成年ICR小鼠（来源于首都医科大学实验动物部）经口急性染毒的为65.433587.0162mg/Kg。2、 毒性特征：小鼠在经口染毒后短时间内出现抽搐，躁动不安，麻痹，肌张力松弛，反应减弱，同时伴有呼吸加快，口吐白沫，鼻孔溢液，尿失禁，腹泻等症状，然后在10分钟左右死亡。3、 本组小鼠为径口染毒的最低剂量，没有出现死亡小鼠，观察过程中，6号小鼠出现亢奋