增骨丸对维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型影响的实验研究(一)

1、增骨丸对维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型影响的实验研究 一 摘要】目的：探讨中药复方制剂增骨丸对维甲酸诱导的大鼠骨质疏 松模型的影响。方法：将 50 只 8 月龄雌性 SD 大鼠随机分为 2 组：正 常组13只、骨质疏松组 37只。模型复制成功后，把骨质疏松组随机 分为 3 组：模型组、乙烯雌酚组、增骨丸组。观察增骨丸对模型大鼠 血清雌二醇E2、骨钙素BGF、碱性磷酸酶AKP、血清抗酒石酸 酸性磷酸酶TRAP、钙Ca、磷P及尿中钙U|Ca、羟脯氨酸U|HOP、尿肌酐U|Cr的影响。结果：增骨丸组与模型组比拟，血清 E2、 BGP、 AKP 显著升高 P0.05 ； T RA P、 U|Ca、 U|

2、HOP 含量及 U|Ca/U|Cr、U|HOP/U|Cr 值明显下降P0.05 或 P0.01。结论：增 骨丸对骨质疏松有良好的治疗作用，其机理可能是一定程度地提高了 体内的雌激素水平，抑制骨的吸收，影响骨的形成。中药增骨丸可通 过体内多方面调节作用，到达制骨质疏松的开展，具有良好的应用前 景。【关键词】增骨丸；维甲酸；骨质疏松症；实验研究骨质疏松Ostteoporosis简称0P是以骨量减少、骨组织显微结构退化为特征，以致骨的脆性增高而骨折危险性增加的系统性多病因的一种 全身骨骼疾病 1-2。临床表现腰背痛、身体畸形、骨折等。由于世界 人口的老龄化，致使该病发病率逐年升高，且合并严重并发证，

3、对个 人、家庭、社会构成严重的负担。因此，对 OP的研究已成为一个世界 性医学课题。增骨丸是在中医辨证论治理论的指导下，根据骨质疏松症病理特点， 由甘肃省中医骨伤科专家宋贵杰老教授拟定的中药复方， 经 30 余年来临床观察，对治疗骨质疏松症疗效肯定，并已有相关科研 报道。为了进一步研究该方对 0P的作用机制，我们做了增骨丸对维甲 酸诱导的骨质疏松大鼠模型影响的实验研究。 1材料与方法 1.1 实验动 物8月龄健康未交配 SpragueDawleySD大鼠50只，体重250280g, 购自青海省实验动物中心。 1.2 药物及试剂盒增骨丸煎液：由甘肃省中 医学院附属医院药剂科制备，常规煎煮，减压浓

4、缩，药液质量浓度为 每mL含生药2.67g,冷藏备用。乙烯雌酚：购自甘肃省中医学院附属 医院，由天津力生制药股份生产，批号2021214，每片 1mg，使用时研磨以蒸馏水配制成 0.01mg/ml 的药液灌胃。维甲酸：购自重 庆华邦制药股份，批号 0950191，每个胶囊20mg,使用时研 磨以蒸馏水配制成10mg/ml的混悬液灌胃，现配现用。BGP放免试剂 盒、E2放免试剂盒北京北方生物技术研究所生产，TRAP试剂盒、 AKP试剂盒、Ca试剂盒、P试剂盒、HOP试剂盒、Cr试剂盒南京建 成生物工程研究所生产。1.3主要仪器LG-3A高速冷冻离心机北京 医用离心机厂、VIS-7220型可见分光

5、光度仪北京第二光学仪器厂、 SN-695B型智慧放免测量仪上海原子能研究所日环仪器厂、CX全自 动生化分析仪美国Beckman公司生产。1.4实验方法动物的分组 和造模实验前适应性喂养10d，将50只大鼠按体重随机分为2组：一 组为正常组13只，以蒸馏水灌胃，1次/ d, 3mL/次。另一组为骨质 疏松组37只，每只每天给予维甲酸按 70哑/您灌胃14d, 1次/d。在第 15d 两组各处死 5 只大鼠取材(胫骨)，观察模型复制情况。 1.4.2 给药与饲养所有动物在统一条件下(室温1924C,相对湿度40%左右)，普通饲料喂养(由兰州大学医学院动物饲养中心提供) ，自由饮 水。造模成功后进入

6、 45d 的治疗阶段，给药剂量按人与大鼠体外表积 比折算成等效剂量。因两组各处死 5 只大鼠，加之在造模及喂养过程 中因不明原因骨质疏松组又死亡 2 只，故正常组为 8 只，骨质疏松组 为 30 只。再将骨质疏松组随机分为 3 组：模型组 10 只，灌蒸馏水 3mL/ 次；增骨丸组10只，按5g/ (kg )剂量灌胃45d;乙烯雌酚组10只， 按0.86mg/ (k d)剂量灌胃。各组大鼠每周灌胃6次，连续灌胃45d。 1.4.3 取材与处理灌药第 46d 处死大鼠，处死前用电子台秤称其重量。 股动脉取血 35mL,置37C水浴箱中 2h，待血清别离后离心(2000r/min ),取大鼠血清置-20C低温冰箱保存待测。处死前Id,分 别置大鼠于代谢笼中，收集24h空腹尿液，置-20C低温冰箱中备用。 检测指标和方法放免法测血清 BGP及E2含量。采用偶氮胂皿法 测定血清钙及尿钙 (S|Ca、U|Ca ， mol/L) ，磷钼酸法测定血清磷 (S|P,mol/L)， 比色法测定血清碱性磷酸酶(S|AKPIU/L),用比色法测定血清抗酒石酸 酸性磷酸酶(S|TRAPU/L),用苦味酸法测定尿肌酐(U|Cr,umol/L),用氯 安T法测定尿羟脯氨酸(U|HOP,mg/L),并计算U|Ca/U|Cr值、