医学专题—ABO血型系统及定型正反不符dy探素课件

1、医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素ABO血型血型(xuxng)系统及定型系统及定型第一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素l正定型细胞定型l用抗体特异性的试剂血清检查(jinch)红细胞的抗原l 玻片法 试管法 微量板法ABO常规常规(chnggu)定型定型第二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素ABO常规常规(chnggu)定型定型l反定型(dng xng)血清定型(dng xng)l用血型的试剂红细胞检查血清中的抗体l 试管法 微量板法第三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素正反定型结果相符时，才可以记录(jl)血

2、型结果。第四页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素ABO正反不符正反不符(bf)时时l受检红细胞是洗涤后悬浮于NS.吗?l是用最敏感的试管法吗?l受检者年龄60吗?l病人的丙种球蛋白减低吗?l病人血清与O型普检红细胞的反响与试剂红细胞一样(yyng)吗?l病人是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌吗？l混合视野反响是输血后标本吗？第五页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素技术上错误技术上错误(cuw)的常见来源的常见来源l血液标本或试管鉴定不当l红细胞悬浮液过浓或过淡及纤维蛋白、小血凝块的干扰l人为的书写错误l标本混乱l忽略观察溶血现象l未参加试剂l未按

3、照试剂生产商的说明操作l离心机校准不良(bling)l试剂受到污染l温度在离心过程中增高第六页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素造成正反定型造成正反定型(dng xng)不符的不符的4种变异情况种变异情况l减弱(jinru)的或减少的抗原反响l未知的抗原反响l减弱的或缺少的抗体反响l未知的抗体反响第七页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素减弱或减少减弱或减少(jinsho)的抗原反响的抗原反响lA或B抗原的亚血型lA、B及AB型RBC与试剂抗血清作实验时，预期反响：4l细胞分型法减弱的凝集反响：健康献血员可能A/B亚型l抗AB 血清能检出某些(mu x

4、i)不与抗A/抗B试剂发生反响的A/B亚型第八页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素减弱或减少的抗原减弱或减少的抗原(kngyun)反响反响l疾病状态下,抗原强度减弱l如:A型白血病/肿瘤患者在疾病活动期改变为A2或A3亚型 ,疾病缓解(hun ji)期复原l疾病状态下,血型物质过量,中和抗A/抗B试剂,造成假阴性/弱凝集: 卵巢囊肿 胃癌 胰腺癌 肠道阻塞l对策:试管法 红细胞三洗第九页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素未知抗原未知抗原(kngyun)反响反响l获得性Al奇异变形杆菌感染的O/B:l 与抗A反响呈混合(hnh)视野第十页，共六十页。医

5、学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素未知抗原未知抗原(kngyun)反响反响l获得性BlRBC反响象AB型,血清(xuqng)中有抗B抗体l细胞分型法: A抗原B抗原第十一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素获得性获得性B的成因的成因(chngyn)lGerbal等假设细菌的脱乙酰基酶deactetylases可以将A的免疫结构域糖N乙酰氨基半乳糖胺转化为半乳糖胺。l这个半乳糖胺与B的免疫多糖(du tn)半乳糖非常的相似，可以与某些抗B发生反响。 第十二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素抗体抗体(kngt)致敏的红细胞致敏的红细胞l抗体吸附

6、于红细胞外表(biomin)，可显示直抗阳性l自身免疫性溶血性贫血l抗高血压药物l输血反响l新生儿溶血病l放散技术移去抗体第十三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素减弱减弱(jinru)或缺少抗体反响或缺少抗体反响l年龄(ninlng)70l丙球蛋白过低血症l丙球蛋白缺乏血症第十四页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素未知的抗体未知的抗体(kngt)反响反响l缗钱状凝集(nngj)l冷自身抗体l未知的ABO同种抗体l未知的其它同种抗体第十五页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素ABO抗体抗体(kngt)的区别的区别特异性血清其它来源

7、血型频率性 质抗BA全部常属IgM效价 8-512初乳 唾液泪液(IgA)抗ABO、 Oh全部常属IgG,与Ax,A3凝集抗A在蜗牛鱼卵中也可发现抗AB全部常属IgM效价 32-2048抗A1A2B A2Ax22-35%1-8%大多数少数报告有输血反应用A2细胞吸收过的抗A血清;双花扁豆(Doliekos biflorus)抗HOh 非Oh全部部分被H物质抑制欧洲荆豆(Ulex europaeus)第十六页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素天然天然(tinrn)抗体和免疫抗体抗体和免疫抗体l天然抗体l未经可觉察的抗原刺激而产生的抗体lO型血清中多为IgG抗A和抗BlA/B

8、型血清中大多(ddu)为IgM抗体l免疫抗体l妊娠/输血等第十七页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素缗钱状凝集缗钱状凝集(nngj)l球蛋白浓度增高(znggo):多发性骨髓瘤/原发性巨球蛋白血症l纤维蛋白原增高l血管扩张剂l霍奇金淋巴瘤l新生儿脐带血中的华尔道胶第十八页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素冷自身冷自身(zshn)抗体抗体l抗I是反定型中最常见的自身抗体l有时也见抗i和抗Prl抗I通常凝集所有供者RBC包括患者(hunzh)自身及反定型所用RBCl抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱l脐带血所带的I抗原量少通常不被凝集第十九页，共六十

9、页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素抗抗HIl与冷凝集有关的最常见的特异性抗体(kngt)是抗Il有些冷抗体与I和H抗原强的细胞如O和A2细胞反响最强，称之为抗HI联合抗体。第二十页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素冷自身冷自身(zshn)抗体之鉴别抗体之鉴别l 抗I 抗i 抗H 抗HI 抗Pr 成OI + - + + + 成AI + - - - + 脐Oi - + + - +l酶OI + - + + +l抗HI： O成A2成B/A成脐O脐AB第二十一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素未知的同种未知的同种(tn zhn)抗体抗体lABO

10、同种(tn zhn)抗体:A2/A2B中的抗A1l A1/A1B中的抗Hl未知的同种抗体:l筛选细胞及反定型中的O细胞l一组谱细胞鉴定抗体特异性第二十二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素ABO亚型亚型lA抗原(kngyun)中主要为A1和A2 l其它A亚型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、和AellB亚型一般比A亚型更少：B3、Bx、Bm和Bel等第二十三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素第二十四页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素判断判断(pndun)ABO亚型亚型:l1 红细胞与抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度l2 红

11、细胞上H物质活性的强弱l3 血清(xuqng)中是否存在抗A1l4 分泌型人的唾液中A、B和H物质第二十五页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素第二十六页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素A1和和A2的鉴别的鉴别(jinbi)项目A1细胞A2细胞与抗A反应42与抗A1反应成人抗原位点100万25万脐血抗原位点31万25万乙酰D半乳糖胺转移酶PH 6时最多PH 7时最多第二十七页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素各种各种( zhn)弱弱A亚型的鉴别程序亚型的鉴别程序红细胞弱凝集混合外观(Mf）A60A3与抗AA3 Ax10 红细胞呈

12、十分弱的mf凝集Aend及/或抗Aend只与抗AB呈弱凝集AxA1B反应不凝集容易吸附放散抗AAm能吸附分泌型唾液中有一定量的A物质及放散不容易吸附放散抗AAy抗A分泌型唾液含少量的A物质Am Ay 吸附放散抗AAelAel分泌型唾液只含H物质无A物质第二十八页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素A2l与人源性抗A试剂的反响强度为4, 与抗H+/2+l可能有不规那么抗A1存在 (sometimes)l1-8% A2和22-35%的A2B存在抗 A1l血型物质(wzh) A Hl举例 抗A 抗B Ac Bc Ocl 4+ 4+ + - -第二十九页，共六十页。医学专题ABO血

13、型系统及定型正反不符dy探素A2lA1和A2决定簇的区别是仅存在量的差异l还是抗原决定簇结构不同？l用A2细胞重复吸收来源于B型个体的抗A血清可以移去所有抗体，说明二者之间仅是量的差异。lA2和A2B个体常常产生抗A1，说明(shumng)A2细胞上缺乏A1细胞上的一种决定簇。 第三十页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素血型血型(xuxng)前体物质：前体物质：lType1 Gal13GlcNAc 1R血清(xuqng)lType2 Gal14GlcNAc 1R 红细胞lType3 Gal13GalNAc1R红细胞lType4 Gal13GalNAc 1R 红细胞lTyp

14、e5 Gal13Gal 1R人工合成lType6 Gal14Glc 1R第三十一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素第三十二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素A1和和A2同样同样(tngyng)存在质的区别存在质的区别lA1细胞(xbo)出现重复的3型A抗原结构，但A2细胞(xbo)却没有。l抗A1是3型或4型A特异性的，或者抗A1可以优先与3型或4型A反响。第三十三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素l只有A1转移酶能够转化3型H加一个N乙酰氨基半乳糖基成为3型Al因此A2细胞(xbo)上可以检测到3型H而不是3型A抗原。第

15、三十四页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素l双花扁豆植物血凝素检测N乙酰氨基半乳糖胺，当过量的浓度下，它可以凝集(nngj)A2细胞，因此将它用作A亚型分型试剂更多是依赖A1和A2表现型数量上的差异。第三十五页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素A3l最早由Friedenreich在1936年描述l与抗A和抗AB共同孵育时：“混合视野(shy)外观mixed field agglutination。即：小的凝集块周围是大量未凝集的细胞。l与抗A反响强度低于A2l与抗AB反响呈混合视野,但并不增强l偶有抗A1 (occasionally) l血型物质 A

16、 HlA3不像是A2和O细胞的嵌合体 第三十六页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素AendAfinn，AbantulAend最早由Weiner 等于1959年描述l类似于A3细胞：它们与一些抗A和抗AB表现很弱的混合视野外观lAend分泌型的唾液中只有(zhyu)H物质，但是无A物质l抗A1出现在局部Aend个体的血清中l10细胞凝集Mf第三十七页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素AmlAm细胞不能被抗A和抗AB凝集，或者仅能发生很弱的凝集。Am细胞可以吸附放散抗A 。lAm分泌型的唾液(tuy)中包含正常含量的A和H物质，Am血清中通常无抗A1。l

17、Am作为ABO位点上一个稀有的等位基因遗传lAm在法国献血者的频率是150 000中有1例。A型人中占0.0015%，中国台湾的数据是400 000万人中1例。第三十八页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Aml抗原性较弱 抗A: - / w+l抗H 4+(甚至会超过Oc)l无抗A1产生,与抗AB反响不增强l血型(xuxng)物质: A H第三十九页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素AxlAx表现型最初由Fischer和Hahn于1935年报道，它的主要血清学特点是：l红细胞与多数来源于B型血清的抗A不发生(fshng)反响，但是可以被大多数来源于O型

18、个体的抗AB凝集，没有混合视野表现。l血清中含有抗A1，后者有时候可以凝集A1和A2细胞。l除了H物质，Ax分泌型个体唾液中可以捡出痕量的A物质第四十页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Axl抗A: -/ w+l抗H:4+(与Oc的抗H差不多)l常有抗A1(Frequently) ,比A2 A3都高l与抗A+B的反响比抗A明显增强l血型(xuxng)物质 H第四十一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素AxAx表现型具有很高的遗传异质性：许多家系资料说明Ax以ABO位点上一种(y zhn)稀有的等位基因的方式遗传在一些家庭中遗传背景不清楚在两项独立的研

19、究中，法国Ax的频率为1/77000 (A型人中的0.003%)和1/44000 第四十二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Aintl与抗A1反响(fnyng)较弱 2+l与抗A及抗H反响较强 4+/3+l仅有A1和Aint的细胞与抗A1发生反响第四十三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素AintlLandsteiner和Levine：有些A型个体的红细胞既不能定义为A1也不能定义为A2lAint在黑人中较白人更为常见，lAint是作为ABO位点上的一个等位基因遗传(ychun)的。l它的H抗原强度象A2一样强，甚至更强。第四十四页，共六十页。医学

20、专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Aell在通常的条件下，Ael细胞(xbo)与抗A和抗AB不发生凝集，虽然它们可以结合这些抗体，结合的抗体可以通过吸收放散技术检测到lAel分泌型唾液中无A物质，仅有H物质，血清中常含有抗A1，也可以含有能够凝集A2细胞的抗体第四十五页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Ael l在Ael血清和红细胞膜上不能检出A转移酶。l在法国150000例献血者中，没有检测到Ael表现型，在中国台湾400000人中捡出5例Ael个体lAel以ABO位点上的一种稀有(xyu)的等位基因遗传的。第四十六页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不

21、符dy探素AwlOlsson等l对其它弱A亚型的ABO基因的外显子、剪切部位和启动子进行序列(xli)测定l那些表现型不太容易被划分到任何现存的分类中。这些异常的基因被称作Aw15。 第四十七页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Subgroups of APheno-typeRed cellstestedWith anti-seraSerum tested withKnown red cellsSalivaof secretorsAnti-A-B-AB-A1-HA1A2BO A1V_VV_V_A and HAint+_V+_V_A and HA2+_V_+Some-tim

22、es. +_V_A and HA3+mf_+mf_+Occa-sionally. +_V_A and HAm-/w+_-/w+_V_V_A and HAx-/W+_+/+_VFre-quently +_V_H第四十八页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素B亚型亚型l弱的B变异型是很少的。l可能(knng)是由于在许多群体中B基因的频率要相对低得多。l弱B亚型较难以分类。lSalmon做出结论：B亚型最好的分类应参照A变异型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些不符合其它4种类型的Bw。 第四十九页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素B3l1972年 W

23、iener和Cioffi首先报道一例ABH非分泌型B3。l它被作为最稀少的一种B亚型 l这种表现型以与抗B和抗AB呈现混合视野反响为特点l血清中缺乏抗Bl唾液中含有正常含量的B抗原lB3通常是由于(yuy)ABO位点上的稀有等位基因所致。 第五十页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素Bxl一种异质性的血型l典型的Bx红细胞与抗B和抗AB呈弱凝集。l血清中含有弱的抗BlBx分泌型唾液中含有一些B物质，后者常常(chngchng)仅能通过Bx细胞与抗B的凝集抑制试验才能检测到lBx是ABO位点上的一种稀有的等位基因。第五十一页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy

24、探素BmlBm细胞不能被抗B或抗AB凝集lB抗原仅能通过敏感的技术比方吸收(xshu)放散抗B才能检测到。lBm分泌型唾液中B物质的含量接近正常BlBm个体的血清中不含有抗B。l通常Bm是作为ABO位点上一个变异的基因来遗传的，但是有几个例外报道。 第五十二页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素BellBel红细胞与抗B和AB不发生凝集反响，但是它们(t men)确实可以结合抗B，抗体可以通过放散技术被检测到。lBel分泌型唾液中不出现B物质，血清中可能存在抗B抗体。lBel作为ABO位点上的稀有基因而遗传， 第五十三页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素BwlOlsson等确认了7种新的等位基因，它们与正常B基因相比(xin b)有1个核苷酸改变，导致一个氨基酸的取代见表2.19Bw2到8，所有这些等位基因与B的弱表达相关，但是没有做进一步分类。第五十四页，共六十页。医学专题ABO血型系统及定型正反不符dy探素正反不符正反不符(bf)的解决的解决正定型中意外阳性或阴性洗涤细胞参加自身对照增加血清/细胞比例降低孵育温度,延长孵育时间 4 /22 /37 15min-30min镜检用不同来源的抗体试验用