标准菌株使用标准操作规程

1、标准菌株使用标准操作规程1 检验目的对实验室的标准菌株进行合理的保存，并规范合理的使用流程，保证菌株的性能稳定可靠。2 范围微生物实验室保存的标准菌株。3 职责微生物组工作人员正确执行本操作规程。4 术语和定义4.1 标准菌株其特征进行了分类和描述，有明确的来源。 ATCC( AmericanTypeCultureCollection )美国标准菌 株收藏中心。4.2 标准储备菌株标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。4.3 工作菌株标准储备菌株传代后得到的同种菌株。4.4 标准培养物标准菌株、标准储备菌株、工作菌株的统称。4.5 质控菌株ATCCt佳，但当无法获得时可以使用ATCC寅化的菌株

2、或我国国家菌种库储存的标准菌株。特殊情况，例如定性试验可用已知的菌种作为质控菌株。室间质评的菌株即可。5 保存程序5.1 标准菌株用1ml无菌的小牛血清或营养肉汤溶解。根据菌种的生长特点，接种到新鲜培养基上选择适宜的培养条件培养18-24h。酵母菌要求3天，形成抱子的微生物宜保存抱子。5.2 标准储备菌株成分有蛋白月东、牛肉浸出粉、氯化钠、甘油、纯化木。相当于20%勺甘油。挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80 C保存。除链球菌和嗜血杆菌以外细菌均可使用。保存期限1-5年。成分为脱纤维羊血。挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80

3、C保存。主要用于保存链球菌、嗜血杆菌及厌氧菌。保存期限1-5年。5.3 工作标准菌株由标准储备菌株传代得到的菌株。标准储备菌株对多向下传三代。过多的传种会增加变异的机会。标准储备菌株根据菌种特点选择适宜白培养基和培养条件进行培养18-24h即工作标准菌株。储存在2-8 C,可放四周。个别营养要求高的为2周，例如肺炎链球菌和嗜血杆菌。使用时应编号并登记。5.4 编号方法每个菌的保存管都要有唯一的编号，签字笔标注，便于查找和管理。来源数字意义购买的标准菌株1501ATCC2592215 年第 1 株 ATCC25922储备标准菌株1501ATCC25922-3由1501ATCC25922传代而来的

4、3号标准储备菌株5.5 记录管理5.5.1 菌种应有严格的登记。每个编号都要有详细的记录包括来源、传代、保存方法、使用记录、使用 原因、高压灭菌记录等。附表标准菌株记录表标准储备菌株记录表5.5.2 菌种保管应有专人负责，保存于专用冰箱中，双人双锁，确保菌种安全。保管人员变动时，必须 严格交接手续。5.5.3 各种菌种应按规定时间接种，注意菌种有无污染及变异，如发现变异时，应及时更换6使用流程标准菌株 购买的标准菌株，编号，-80 C保存 一*用完第二天高压灭菌复苏接种合适的培养基，孵育出菌落一 性能验证标准储备菌株一 挑取典型的菌落到合适的稳定剂中，编号，-80 C保存，准备n支日质控每周取

5、出一支标准储 备菌株传种合适的培 养基，适宜条件孵育出 售碳培养物可以作为第f传代培养物周质控每周取出一支标准储备菌株传种合适的培月质控每月取出一支标准储备菌株传种合适的培专一个新的储备菌株管用完第二天介举 ,J J,适宜条件孵育出斤壬,适宜条件孵育出作为工作菌株使用，第二.灭菌器用传茜#后修袍0棒使 厦；与俗牌小烫幽后第 ,新戢压省源准储备 菌株传种，进入下一轮 周期，程序如上面几个1骤赢星吸菌最后一天的 的工作菌株作为传代 培养物继续使用一周。购买的标准菌株（可追溯来源，卫 生部室间质评菌株可作为质控菌 株使用，按照标准菌株管理）接种传代培养一次，并进行 纯度和生化鉴定 作为“储存标准菌株”进行递行纯度检查 和生化鉴定。作为传代物或 7质1苴控制支“工7.17.2讨隹荐的储存时间每天传代平板作为第二天的、 行室内质控，用完立刻和室内质控作菌株”特定端麻那螂耶态是否符合菌种。有没有杂菌生长。；J上机等生化试验，鉴定菌种有没有变化。可以再重复一周，规则同上。 但一般来说工作菌株不能超 过3代7.3如果有污染或怀疑有问题时，应准备新的首次传代物或者获取新的标准菌株。8参考文献序号唯一性编号义献名称9.1ISBN978-7-117-19862-2/R19863全国临床检验操作规程第四版9.2ISBN978-7-5478-1226-6/R- 395临床微生物学诊断